国家高技术研究发展计划(2007AA02Z472)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：程训佳付永锋冯萌陈实罗慕侠更多>>
- 相关机构：复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划卫生行业科研专项国家基础科学人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多主枝孢霉重组变应原Cla h8的制备及其免疫活性鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的:通过基因工程手段,获得重组多主枝孢霉变应原蛋白Cla h8,有利于进行变应原的标准化,为标准化抗原的临床特异性诊断与治疗奠定基础。方法:从多主枝孢霉菌体中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Cla h8编码基因,将其连入pET-19b载体。转入大肠杆菌BL21 Star(DE3)pLysS,经诱导表达后,进行提纯复性,用Western blot和Dot-blot检测其免疫活性。结果:重组多主枝孢霉变应原Cla h8蛋白可以与多主枝孢霉过敏患者的血清中IgE和IgG抗体特异性结合,与天然蛋白具有相似的免疫活性。结论:制备并获得了具有生物学活性的可溶性重组多主枝孢霉变应原Cla h8蛋白,可用于多主枝孢霉变应原的标准化,克服天然提取物的非单一性及标准化难的障碍。
- 杨柳付永锋李雪萍冯萌程训佳
- 关键词：蛋白表达
- 螨性过敏性疾病的免疫治疗研究进展被引量：2
- 2009年
- 尘螨分布广泛,其蜕皮、尸体,尤其是代谢产物都是强烈致敏原,是引起各类过敏性疾病的重要病因之一,其中最主要的是引起过敏性哮喘。螨性过敏性疾病在全球的发生及其严重程度正日渐受到关注。免疫治疗作为一种针对螨性过敏性疾病的对因治疗,受到人们越来越多的重视。本文对螨性过敏性疾病免疫治疗方法,如特异性免疫治疗(SIT)、DNA-变应原免疫疗法、抗IgE单克隆抗体免疫疗法、抗CD11a单克隆抗体免疫疗法、趋化因子受体拮抗剂免疫疗法和抗FcγRⅠ单克隆抗体免疫疗法等进行了综述。
- 冯萌程训佳
- 关键词：尘螨免疫治疗
- 热带剥爪螨变应原Blot 5的克隆表达、纯化及免疫学鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的:克隆热带剥爪螨主要变应原Blot 5基因,表达纯化该蛋白,并检测其免疫活性。方法:提取热带剥爪螨总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Blot 5编码基因,将其连入原核表达载体pET-19b,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21 Star(DE3)pLysS,IPTG诱导表达后,通过Ni2+亲和层析纯化重组变应原Blot 5。用Dot blot、Western blot和ELISA等方法检测重组变应原Blot 5免疫活性。结果:Dot blot和Western blot结果表明重组变应原Blot 5和热带剥爪螨粗提液都能和Blot 5鼠单克隆抗体结合。重组变应原Blot 5检测69份热带剥爪螨过敏患者血清和21份户尘螨过敏患者血清中的特异性IgE,阳性率分别为29.0%和33.3%。结论:表达和纯化了具有与天然蛋白相似的免疫活性的重组热带剥爪螨变应原Blot 5,可用于热带剥爪螨变应原的标准化,为标准化抗原的临床特异性诊断与治疗奠定基础。
- 蔡俊龙杨彬邓宜红陈实罗慕侠李勤付永锋程训佳
- 关键词：重组变应原BLOT
- 日本柳杉花粉变应原CJP-6的重组表达和免疫反应性鉴定
- 2012年
- 目的:获得日本柳杉花粉主要变应原CJP-6的编码基因,构建其原核表达载体进行表达,并对重组CJP-6(rCJP-6)进行免疫活性鉴定。方法:从日本柳杉花粉中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增CJP-6编码基因,将其克隆入pET-19b表达载体。转入大肠杆菌BL21 Star(DE3)pLysS,经IPTG诱导表达,以Ni2+亲和层析柱对重组变应原进行纯化,采用Dot blot和ELISA方法检测重组变应原rCJP-6与对日本柳杉花粉、尘螨和蒿草花粉过敏患者的血清中的IgE反应活性。结果:重组变应原与日本柳杉花粉过敏患者血清中的IgE具有较高的结合活性,rCJP-6与尘螨、蒿草花粉过敏患者血清中的IgE也具有很高的反应性,而且反应性与日本柳杉花粉过敏的患者血清相似。结论:制备并获得了具有IgE结合活性的重组日本柳杉花粉变应原CJP-6,日本柳杉花粉变应原是中国过敏反应性疾病患者潜在的变应原,为国内过敏反应性疾病的临床诊断和免疫治疗及进一步的实验研究奠定了基础。
- 蒋建国刘瑞玲付永锋程训佳
- 关键词：日本柳杉交叉反应性IGE
