湖南省自然科学基金(10JJ5035)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
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- 相关机构：中南大学湘雅三医院湖南省人民医院更多>>
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- TRAF1基因干扰质粒的构建及其对胃癌细胞生物学功能的影响
- 2012年
- 目的：构建TRAF1基因干扰重组质粒及建立TRAF1基因干扰瞬时转染胃癌细胞模型，然后通过干扰目标胃癌细胞中的TRAF1基因来检测TRAF1对胃癌细胞的生物学功能的影响。方法：首先通过rea1—tin1ePCR和Western印迹验证TRAF1在胃癌细胞系BGC823，SGC7901，MGC803中的表达，筛选出TRAF1表达量最高的一株细胞作为干扰转染的目标细胞；设计及构建3个TRAF1的shRNA表达载体pLVX-shRNA-TRAF1．shRNA1～3，将其分别转染至目标胃癌细胞系中，应用rea1．timePCR和Western印迹筛选出干扰效率最强的shRNA，最后通过MTF及流式细胞术检测TRAF1对胃癌细胞凋亡能力的影响，通过Transwe11小室迁移实验来检测对其迁移功能的影响。结果：与GES．1比较，TRAF1基因在BGC823，SGC7901，MGC803中的表达均有上调（P〈O．05），其中以BGC823表达最高；3个TRAF1shRNA对TRAF1基因均有抑制作用，以pLVX-shRNA-TRAF1-shRNA2干扰效果最强；干扰胃癌细胞BGC823中的TRAF1可使细胞生长活力减弱，凋亡明显增加，但对其迁移功能无明显影响。结论：TRAF1基因在胃癌细胞系BGC823中上调最明显；pLVX-shRNA-TRAF1．shRNA2可成功干扰BGC823中TRAF1的表达；TRAF1可抑制BGC823细胞的凋亡。
- 王芬杨燕冯茜步光奎黄利华闾宏伟郭勤徐灿霞沈守荣
- 关键词：TRAF1胃癌细胞系
- 不同幽门螺杆菌临床菌株对人胃黏膜细胞系GES-1增殖和凋亡的影响及其致癌性的研究被引量：8
- 2011年
- 目的:比较不同幽门螺杆菌(H.pylori)临床菌株对人胃黏膜细胞系GES-1细胞增殖、凋亡的影响,了解不同毒力菌株对胃黏膜的影响及致癌性。方法:选用临床分离自胃癌、胃炎患者的菌株各10例分别与GES-1细胞以不同浓度比例共培养,在不同时间点进行MTT和流式细胞仪检测,筛选出对GES-1细胞的增殖影响最大(A菌株)和最小(B菌株)的两株菌株,利用蒙古沙土鼠感染模型了解其导致胃黏膜病变情况及致癌性。结果:当细胞/细菌浓度比为1∶1,1∶50共培养12 h和细胞/细菌浓度比为1∶50共培养24 h时,分离自胃癌患者的H.pylori临床菌株可以不同程度地促进GES-1细胞增殖,与胃炎菌株组的吸光度值比较差异有统计学意义(P<0.05)。当细胞/细菌浓度比为1∶50,1∶200共培养时,胃炎菌株组和胃癌菌株组细胞凋亡率较对照组明显增加(P<0.05),胃炎菌株组与胃癌菌株组间差异无统计学意义(P>0.05)。筛选出的2株菌株感染蒙古沙土鼠模型后28周,A菌株引起蒙古沙土鼠胃黏膜肠化及癌变,与B菌株组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同来源的H.pylori临床菌株对GES-1细胞的增殖影响具有差异性,分离自胃癌黏膜的菌株可明显促细胞增殖,并可以引起蒙古沙土鼠严重的胃黏膜癌前病变及胃癌发生。
- 王芬潘建华罗丽丹黄利华闾宏伟郭勤徐灿霞沈守荣
- 关键词：幽门螺杆菌凋亡蒙古沙土鼠
