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黑龙江省青年科学基金(QC05C81)
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刘兴汉
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bcl-2反义寡核苷酸联合三氧化二砷对膀胱癌细胞生长的抑制作用
2007年
目的观察bcl-2反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODN)与三氧化二砷(As2O3)对膀胱癌细胞生长的抑制作用,比较联合或单独用药的抑制效果。方法人工合成包含bcl-2翻译起始位点的ASODN及无义核酸(NSODN),以质脂体(Lipofectamine)作为载体转染T-24膀胱癌细胞株。分为对照组(加PBS)、反义组(ASODN 1μmoL/L)、无义组(NSODN 1μmoL/L)、As2O3组(2μmoL/L)、As2O3+反义组(联合用药组:As2O3 1μmol/L,ASODN0.5μmol/L)。采用肿瘤细胞生长曲线、四氮唑蓝(MTT)实验和集落形成实验,观察药物对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果从细胞生长曲线看出,与对照组相比,联合用药组肿瘤细胞数减少了62.09%,反义组减少了31.04%,As2O3组减少了39.08%,无义组减少了21.84%。MTT实验,肿瘤细胞抑制率联合用药组为(86.11±7.35)%,As2O3组为(67.21±8.99)%,反义组为(50.23±5.46)%,无义组为(8.22±0.33)%,组间比较差异有统计学意义(F=180.2,P〈0.01)。半数抑制浓度(IC50)联合用药组为(0.98±0.12)μmol/L,As2O3组为(1.53±0.32)μmol/L。反义组的为(1.96±0.22)μmol/L,无义组为(4.33±0.33)μmol/L,组间比较差异有统计学意义(F=354.0,P〈0.01)。肿瘤细胞集落生存率联合用药组为53.76%,反义组为76.32%,As2O3组为75.25%,无义组为90.33%。肿瘤细胞凋亡率联合用药组为(22.66±1.66)%,组间比较均差异有统计学意义(F=232.15,P〈0.01)。结论Bcl-2反义寡核苷酸与As2O3联合应用可明显提高对膀胱癌细胞生长的抑制作用。
任明华
姜洪池
刘兴汉
关键词:
BCL-2
反义核酸
三氧化二砷
重组人内皮抑素提取方法的优化及其对膀胱癌的抑制作用
2009年
目的摸索重组人内皮抑素(rhES)蛋白的最佳表达条件。探索内皮抑素(ES)对膀胱癌实体肿瘤及细胞系的抑制作用。方法分别从不同异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、加IPTG时机、表达时间等几个方面对rhES的蛋白表达条件进行摸索和优化。活性检测:(1)动物实验:观察内皮抑素对裸鼠皮下移植瘤的生长情况的影响。(2)细胞实验:MTT法、肿瘤细胞生长曲线观察内皮抑素对T-24膀胱癌细胞系的作用。结果rhES在大肠杆菌中的表达量占总菌体蛋白的58.65%,纯化后的蛋白纯度为96.22%。动物实验:rhES的抑瘤率为66.8%。细胞实验:MTT实验中rhES的半数抑制浓度IC50=22μg/ml;肿瘤细胞生长曲线表明第7天时rhES组的细胞数比对照组减少了58.75%。结论本实验所优化的最佳表达条件可获得高表达、高活性的rhEs蛋白,Es不但对裸鼠接种的膀胱癌有抑制作用,对膀胱癌细胞系也有抑制作用。
任明华
倪少滨
陈起引
徐万海
王长林
付宜鸣
焦治兴
麻立
赵忠山
刘兴汉
关键词:
内皮抑素类
膀胱肿瘤
蛋白表达
抗肿瘤
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