大连市科技计划项目(2005E11SF068)
- 作品数:3 被引量:7H指数:1
- 相关作者:刘天庆马学虎崔占峰范文霞于小川更多>>
- 相关机构:大连理工大学牛津大学更多>>
- 发文基金:大连市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 角膜内皮细胞玻璃化冷冻保护剂的实验研究被引量:6
- 2009年
- 对角膜内皮细胞的玻璃化冷冻保护剂进行了研究,进而获得一种玻璃化溶液。首先筛选渗透性保护剂;在此基础上,进行糖类非渗透性保护剂的筛选。渗透性保护剂的筛选范围包括二甲基亚砜、乙二醇、1,2-丙二醇、2,3-丁二醇、乙酰胺和乙二醇单甲醚。糖类非渗透性保护剂包括木糖、果糖、甘露糖、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和海藻糖。所采用的细胞活性的评价方法包括台盼兰拒染法和CCK-8试剂盒。研究结果表明:在众多的渗透性保护剂中,乙二醇的保护效果最好;糖类保护剂中,葡萄糖的保护效果较好。获得的玻璃化溶液的组成是:载体溶液-乙二醇-葡萄糖,其中乙二醇和葡萄糖的浓度分别为52%(w/w)和8%(w/w)。经此玻璃化溶液冷冻保存后的角膜内皮细胞的活率高达(85.5±0.7)%。
- 范文霞马学虎葛丹于小川刘天庆崔占峰
- 关键词:角膜内皮细胞玻璃化保护剂
- 不同直径神经干细胞球慢速低温冻存的研究
- 2009年
- 为提高神经干细胞冻存复苏后的效果及存活率,对不同尺寸与状态的神经干细胞球进行了在不同浓度DMSO(二甲基亚砜)下的慢速冻存比较。首先用CCK-8试剂盒测定神经干细胞的生长曲线,然后对处于对数生长期的3类神经干细胞(单细胞悬液,直径30~50μm球,直径80~100μm球)分别进行了7个不同浓度(3%,5%,7%,8%,10%,15%,20%)DMSO的冻存实验比较,并对冻后复苏的细胞进行活性检测和诱导分化。结果表明,直径80~100μm的神经干细胞球,DMSO浓度8%,复苏后细胞活率82.9%,且仍具有多项分化潜能。神经干细胞间的亲密联系和刻痕信号与直径尺寸共同作用,影响着神经干细胞的冻存复苏效果。
- 马学虎侯颖石颖张蕾范文霞葛丹刘天庆崔占峰
- 关键词:神经干细胞DMSO
- 角膜内皮体外模型玻璃化法保存研究被引量:1
- 2008年
- 以牛角膜内皮细胞在培养至融合时的单层细胞作为角膜内皮的体外模型,采用两种玻璃化溶液,考察玻璃化过程对细胞活性的影响.首先以光学显微镜和扫描电镜考察了体外模型的细胞形态和胞间连接情况,发现培养的角膜内皮细胞融合后无论是细胞形态和胞间连接都与天然的角膜内皮相近.然后用低温显微镜考察了两种玻璃化溶液在升降温过程的结冰情况,发现两玻璃化溶液在100℃/min的降温和升温速率下都能玻璃化且反玻璃化较弱.设计了一套保护剂的导入和洗脱方案,使得内皮细胞的体积变化维持在-50%~40%.最后以CCK-8试剂盒考察了玻璃化溶液的毒性和细胞经冷冻后的活性,发现VS^2的毒性比VS^1强;经VS^1和VS^2冷冻后的细胞活率分别为61.3%和51.7%,这说明VS^1的保存效果比VS^2好.
- 范文霞马学虎于小川刘天庆崔占峰
- 关键词:角膜1,2-丙二醇海藻糖