国家自然科学基金(40276033) 作品数:15 被引量:78 H指数:5 相关作者: 黄河清 孔波 吴韩志 蔡宗苇 曹廷明 更多>> 相关机构: 厦门大学 香港浸会大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 福建省自然科学基金 厦门市科技计划项目 更多>> 相关领域: 生物学 理学 机械工程 医药卫生 更多>>
分析技术在铁蛋白结构与功能研究中的应用 被引量:3 2003年 介绍了电子光谱、电化学、电子显微镜和生物质谱等分析技术在铁蛋白亚基结构、电子隧道、电极活性和释放铁动力学研究中的应用。 曹廷明 黄河清 孔波关键词:铁蛋白 分析技术 电子光谱 电子显微镜 生物质谱 利用MALDI-TOF质谱技术研究胰岛素水解和酶切过程 被引量:6 2003年 利用海牛卵制备的模拟微量混合内切酶体系 ,用基质辅助激光解吸电离 -飞行时间 (MALDI-TOF)质谱技术研究了胰岛素在不同酸碱度和还原条件下的水解和酶解过程。实验结果为研制具有高生物利用度的胰岛素纳米粒口服制剂及选择具有适当耐酸碱及还原特性的包装材料提供了科学依据。 方雪萍 黄河清关键词:胰岛素 水解 酶切 纳米粒 MALDI-TOF MALDI-TOF质谱技术研究海兔卵产卵激素及其分解产物的特性 被引量:1 2006年 采用萃取法和反相HPLC技术分离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)卵内的产卵激素(egg laying hormone,ELH)及其分解产物.选用基质辅助激光解吸离子化飞行时间(Matrix-assisted laser deposition/ioni-zation time-of-flight,MALDI)质谱技术研究NLCS卵内的ELH、ELH分解产物和酸性多肽(acidic peptide,AP)二聚体的组成与结构特性.实验结果表明,NLCS卵不仅含有丰富的ELH及其分解产物,而且它的AP及其分解产物主要呈二聚体状态,推测这种二聚体结构对今后阐明ELH和AP的生理功能和调控机理起着重要的作用. 方财王 黄河清 颜利 蔡宗苇关键词:质谱技术 猪血管紧张肽的质谱特性 被引量:1 2003年 选用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱技术研究不同激光强度对猪血管紧张肽 (AngiotensinⅠ ,AnⅠ )解吸离子化的百分率和一级结构的稳定性。结果表明 :激光强度与AnⅠ解吸离子化百分率有关 ,AnⅠ多聚体解吸离子化所需的激光强度高于单体。AnⅠ与海兔酸性多肽 (Aplysiaacidicpeptide,AP)和海兔胰岛素Cβ(AplysiainsulinCβ,AICβ)混合后 ,采用延迟引出技术和激光强度 2 3 0 0IU分析混合样品 ,该激光强度不影响对AnⅠ和它的多聚体解吸离子化 ,但对AICβ 影响较大 ,相当于丢失了一分子OH-。相同的激光强度对不同结构的多肽多聚体产生不同的解吸离子化百分率 ,优化激光强度是准确分析多肽结构信息关键因素之一。 黄河清 林庆梅 MIAO Hai Won-Suk KIM关键词:激光强度 质谱 优化分离与鉴定蓝斑背肛海兔口腔神经节蛋白质组 被引量:9 2006年 采用双向凝胶电泳技术优化分离蓝斑背肛海兔(Notarcus leachii cirrosusStimpson,NLCS)口腔神经节(Buccal Ganglion,BG)蛋白质组,并获得约300个蛋白质斑点.用组合基质辅助激光解吸电离化飞行时间(MALD I-TOF)质谱技术和胶内酶解技术测定BG蛋白质组中的96个蛋白质斑点的肽指纹(Peptide m ass fin-gerprint,PMF)图谱.经数据库检索与比对后,发现96种蛋白质中仅有4种蛋白质可获得较高的匹配率,它们分别是微管蛋白(Tubu lin)、肌动蛋白(Actin)和两个1,5-二磷酸核酮糖-羧化酶/加氧酶(R ibu lose-1,5-b i-sphosphate carboxylase/oxygenase,R ibu lose),均属于神经细胞骨架蛋白质;同时还发现一种交配信号肽前体(Peptide m ating pheromone precursor).利用LOC trees软件和分类法对56种蛋白质进行亚细胞定位与分类. 陈东仕 黄河清 吴韩志 蔡宗苇关键词:海兔 口腔神经节 蛋白质组 双向凝胶电泳 质谱 适合于MALDI-TOF质谱分析蛋白质及亚基的SDS-PAGE技术 被引量:2 2004年 介绍适合于MALDI TOF质谱分析蛋白质及亚基的SDS PAGE技术,其主要特点是采用铜染色法在凝胶板上直接显色且采用有机溶剂萃取电泳纯的蛋白质和亚基,并用MALDI TOF质谱技术直接分析它们的分子量.本技术具有简便、快速和损失率小等优点,尤其适合于蛋白质组学、利用数据库分析蛋白质同源性和确定蛋白质种类等结构信息的研究,是一种较为理想的SDS PAGE和MALDI TOF质谱非在线联用分析技术. 方雪萍 黄河清关键词:蛋白质 SDS-PAGE 分子量 分子生物学 鲨鱼和魟鱼肝铁蛋白电泳纯的制备技术 被引量:6 2004年 采用硫酸铵分级盐析、DEAE阴离子交换层析、SephacrylS-300凝胶层析技术分离纯化鲨鱼肝铁蛋白 (LiverferritinofSphymazygaena,SZLF)和鱼肝铁蛋白 (LiverferritinofDasyatisakajei,DALF)。电子显微镜技术揭示了SZLF和DALF的分子结构 ,阐明了两者蛋白均由蛋白壳和铁核组成。柱层析和电泳技术拓展了电泳纯的SZLF和DALF制备方法 。 陈旭 黄河清 孔波 曹廷明 肖志群关键词:铁蛋白 电泳分离 层析分离 鲨鱼 蛋白质辅助基质提高激光解吸/电离多肽离子化率和绝对强度的研究 被引量:4 2007年 人血清转铁蛋白(Human serum transferrin,HTF)、牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)、鲨鱼肝铁蛋白(Sphyrna zygaenaliver ferritin,SZLF)、马脾铁蛋白(Horse spleen ferritin,HSF)均能辅助基质提高激光解吸/电离胰岛素(Insulin,INS)和海兔酸性多肽(Aplysiaacidic peptide,AP)离子化率和质谱峰的绝对强度(简称为绝对强度),其中绝对强度分别提高10和4倍,这一现象不依赖于INS浓度,而与蛋白质类型和结构有关.SZLF和脱铁核SZLF(apoSZLF)辅助基质提高INS绝对强度的能力几乎相同,蛋白质中的金属离子含量对这种效应无明显影响,主要取决于蛋白质的氨基酸组成与结构.采用胶内酶解和肽指纹技术(PMF)鉴定HTF过程中,发现基质中分别添加SZLF,apoSZLF和HSF后,HTF肽片段质谱检测的质谱峰数目及绝对强度均有明显增加,进一步提高了数据库鉴定HTF的可信度. 卓慧钦 黄河清 翁露娜 黄慧英关键词:MALDI-TOFMS 多肽 肽指纹图谱 MALDI-TOF质谱技术研究海兔神经连索外表层的多肽组成 被引量:7 2004年 厦门蓝斑背肛海兔(Notarcusleachiicirrosus)中枢神经系统(CentralNervousSystem,CNS)缺少腹神经节。杂斑海兔(AplysiajulianaQuoy &Gaimard)和美国加州海兔(Aplysiacalifornia)的CNS均有腹神经节。生物质谱技术研究表明 ,美国加州海兔和厦门蓝斑背肛海兔的CNS的神经连索外表层含有丰富的多肽组成 ,部分多肽表现出转移特性。 黄河清 KimWon-Suk 林庆梅关键词:中枢神经系统 质谱 MALDI-TOF 海兔 多肽 混合蛋白质体系中魟鱼和海兔肝铁蛋白释放铁的动力学研究 被引量:1 2004年 分别制备含有魟鱼肝铁蛋白(liver ferritin of Dasyatisakajei, DALF)和海兔肝铁蛋白(Liver ferritin of Aplysia, ALF)的混合蛋白质体系。选用电子光谱技术和不同电子供体,研究在混合蛋白质体系中,DALF和ALF释放铁的动力学过程和规律。实验结果表明,采用Na2S2O4作为还原剂时,DALF以两相行为进行释放铁的反应;而选用抗坏血酸作为还原剂时,DALF却以一级反应动力学方式进行释放铁的反应,简化释放铁的过程。在混合蛋白质体系中且以抗坏血酸和Na2S2O4为电子供体时,ALF均以一级反应动力学过程进行释放铁的反应,认为某些蛋白质参与协助ALF释放铁反应,从而简化释放铁的过程。 陈平 黄河清 颜利 黄河宁 杨天赐 周常义关键词:铁蛋白