芜湖市科技计划重点项目(2008620)
- 作品数：9 被引量：25H指数：2
- 相关作者：蔡亚非王根林范睿吴国良杨帆更多>>
- 相关机构：安徽师范大学南京农业大学更多>>
- 发文基金：芜湖市科技计划重点项目“十一五”国家科技支撑计划安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 牛Irak-1基因的电子克隆及生物信息学分析
- 2010年
- 电子克隆提供了一种利用基因组数据库克隆新基因全长cDNA序列的策略。利用小鼠Irak-1基因编码序列(NM_008363)为种子序列进行电子克隆获得了牛Irak-1基因完整编码序列。然后,用生物信息学方法分析了该基因的结构,微卫星位点,密码子偏性和氨基酸的同源性等。结果表明:该基因cDNA全长2 645bp,无内含子,最大开放阅读框2 157bp,编码718个氨基酸,与小鼠的同源性为77%。
- 蔡亚非张凯吴国良范睿王根林
- 关键词：电子克隆生物信息学
- 奶牛HSP70基因3'-侧翼区多态性分析及其与生产性能的关系被引量：2
- 2009年
- 以160头荷斯坦和娟姗奶牛作为研究对象,分别测定了其在不同温度条件下,直肠温度、呼吸频率、产奶量及乳成分,并进行了统计分析。同时设计引物扩增HSP70基因3'-侧翼区,通过PCR-SSCP技术分析HSP70基因3'-侧翼区的多态性,并发现一个多态位点。结果表明:扩增片段为292bp,扩增产物有基因多态性,共发现4种基因型,分别为荷斯坦牛的AA(H)型、AB(H)型和娟姗牛的AA(J)型、AB(J)型。其中B基因可能为抗热应激基因,这4种基因型奶牛个体的生产性能差异不显著(P>0.05)。
- 吴国良崔群维刘卉玲杨帆范睿蔡亚非王根林
- 关键词：直肠温度HSP70基因多态性热应激
- 牛Pbx-1基因的电子克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2009年
- 新基因全长cDNA序列很难获得,但电子克隆却提供了基因克隆的一种策略。利用小鼠Pbx-1基因编码序列(NM_183355)为种子序列进行电子克隆获得牛Pbx-1基因完整编码序列。然后,用生物信息学方法分析了牛的Pbx-1基因的结构,密码子偏性和氨基酸的同源性等。结果表明:该基因cDNA全长1 754 bp,无内含子,最大开放阅读框1 305 bp,编码434个氨基酸,预测其编码的蛋白分子量为47 189.5 D a,与小鼠的同源性为81%。
- 刘卉玲崔群维吴国良范睿蔡亚非王根林
- 关键词：电子克隆生物信息学
- 铅对小鼠血液和肝肾影响的实验性初步观察被引量：11
- 2010年
- 用全血细胞分析仪检测染毒小鼠新鲜血样,再用日立7020生化分析仪,配合试剂盒法对血清进行检测,研究铅对血液与肝肾功能的影响,结果表明:100mg/kg浓度的醋酸铅对小鼠的血液有显著影响,白细胞数目(WBC),淋巴细胞数目(Lymph),中性粒细胞数目(Gran)等指标显著增加(P<0.05),此外对血小板凝血系统功能显著影响,血小板数目(PLT)等指标下降极显著(P<0.01),对血红细胞(RBC),血红蛋白(HGB)等指标影响不显著(P>0.05)。肝肾功能性指标:谷丙转氨酶(ALT),谷草转氨酶(AST)尿素氮(UREA)肌酐(CREA)生化酶显著偏离正常值(P<0.05)。表明铅对肝脏肾脏功能有显著的破坏。对检测结果做了进一步的分析讨论。
- 赵剑童希琼蔡亚非
- 关键词：醋酸铅尿素氮谷丙转氨酶
- 携人源TPA基因的慢病毒表达质粒的构建与鉴定
- 2010年
- 利用PCR扩增人源TPA基因,再用酶切-连接的方法将目的片段亚克隆入慢病毒表达质粒pL-PGK-eGFP中,最后用测序、酶切和在293细胞中瞬时表达的方法进行了鉴定.结果显示:含人源TPA基因的pL-PGK-TPA-eGFP慢病毒表达载体构建成功,为进一步利用转基因技术更加安全高效地生产TPA,治疗血栓类疾病打下基础.
- 张昱王燕杨帆蔡亚非王根林
- 关键词：组织型纤溶酶原激活剂慢病毒载体基因表达
- β-LG基因编码区多态性及其对荷斯坦牛乳成分的影响
- 引言奶牛乳蛋白主要由酪蛋白和乳清蛋白两种蛋白质组成,主要有四种酪蛋白和两种乳清蛋白。而β-乳球蛋白(β-LG)是牛和其它反刍动物乳中的一种主要的乳清蛋白组分,在其他哺乳动物乳中也很常见,其功能目前尚不明确,但是在啮齿类动...
- 杨帆王燕李平陈杰刘慧玲蔡亚非王根林刘红林
- 文献传递
- 体细胞Caspase-3信号通路及DNA甲基化调控卵泡闭锁的分子机制
- 2010年
- 为了揭示caspase-3等细胞凋亡相关基因及DNA甲基化水平在小鼠卵泡闭锁中的作用,小鼠经注射10 IU hCG后,在0、12、24、48、72和96 h解剖取出卵巢,用HE染色、DNA电泳、免疫组化、RT-PCR技术、甲基化酶切等试验方法,研究在卵泡发育及闭锁过程中caspase-3等凋亡相关基因的表达及DNA甲基化水平的变化。结果表明:bax、caspase-3的表达量在48 h以前持续减少,在48 h达到最低值,在72 h显著增多(P<0.05),且在卵腔液中大量表达;甲基化水平在48 h以前持续减少,在48 h达到最低值,在72 h显著增多(P<0.05);卵泡凋亡程度在48 h之前也持续减少,在72 h显著增多(P<0.05)。bcl-2的表达量在48 h之前持续增加,在72 h显著减少(P<0.05)。提示:卵泡的发育和闭锁可能受体细胞Caspase信号通路调控,并通过卵腔液发挥作用决定其存亡;另外,甲基化水平的改变可能与卵泡的闭锁直接相关。
- 刘楠乔蔡亚非许家玉周军智杨帆范睿
- 关键词：体细胞CASPASE-3甲基化
- β-LG基因外显子2多态性对荷斯坦牛乳成分的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:为了研究中国荷斯坦奶牛的β-乳球蛋白(-βlactoglobulin,-βLG)基因外显子2多态现象对乳产量及成分影响。方法:本实验采用单链构象多态(PCR-SSCP)技术对中国荷斯坦奶牛-βLG基因(NCBI登录号:DQ489319)外显子2进行克隆及多态性研究。结果:8种SSCP带型:ab,abc,abcd,abd,abe,abcde,abce和abde型,带型频率分别为:0.14,0.10,0.27,0.23,0.05,0.04,0.11和0.06(P<0.05);6个单核苷酸位点:位点1 C>T,位点2 T>C,位点3 C>T,位点4 C>G,位点5 C>A,位点6 A>T或C,且它们的遗传多态信息含量处于中度或高度多态(PIC>0.25)。结论:中国荷斯坦奶牛-βLG基因外显子2区具有单核苷酸多态,单个核苷酸的改变影响奶牛的生产性能(牛乳产量、乳蛋白和脂肪含量等)。
- 杨帆周学军刘楠乔张煜吴国良程跃黄希文蔡亚非王根林
- 关键词：中国荷斯坦奶牛PCR-SSCP遗传多态性
- 含PGK启动子慢病毒表达质粒的构建与鉴定被引量：1
- 2009年
- 为了构建一个含有人源PGK1(human phosphoglycerate kinase 1)启动子的慢病毒表达载体pL-PGK-GFP.采用PCR从人组织中扩增PGK1基因的启动子部分,再用酶切-连接的方法将扩增的启动子区片段亚克隆入慢病毒表达质粒pL-EGFP中,再用测序、酶切和瞬时表达的方法进行鉴定.结果是下游的eGFP基因在PGK1启动子驱动下,在293FT细胞中表达绿色荧光蛋白报告基因,这表明成功构建了慢病毒表达质粒pL-PGK-GFP.扩增的537bp PGK1启动子片段具有一定的启动效率,能在HIV来源的慢病毒载体中驱动下游目的基因的表达.
- 周军智邹永康李建国刘楠乔蔡亚非王根林
- 关键词：慢病毒载体基因表达
- 小鼠脊髓挫伤型损伤后caspase-3、bax、bcl-2和c-kit基因的表达被引量：8
- 2010年
- 为揭示凋亡相关基因和c-kit基因在脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后的相互关系,利用RT-PCR和免疫组化技术,分别检测了caspase-3、bax、bcl-2、c-kit的mRNA和蛋白在小鼠脊髓损伤后的表达。结果显示:在SCI后4 h开始出现大量的神经元和胶质细胞凋亡,其中促凋亡因子表达增加,而抑制凋亡因子表达量减少。caspase-3的mRNA和蛋白的表达在SCI后开始增加,并在72 h时达到峰值,bax表达规律与之基本一致,但是其峰值出现在24 h。随着时间的变化,bcl-2与c-kit的表达均表现为升高—降低—升高的变化趋势,与caspase-3和bax的变化趋势相反,且其调控作用均发生在caspase-3之前。此外,SCI后c-kit基因也呈现抑制凋亡的作用。表明:损伤是导致脊髓发生凋亡的因素之一;bcl-2是凋亡抑制因子,与bax共同控制细胞凋亡,并直接作用于下游caspase-3的表达。
- 范睿张昱许家玉鲁亚平蔡亚非
- 关键词：凋亡相关基因C-KIT基因
