国家自然科学基金(30973760)
- 作品数：10 被引量：60H指数：5
- 相关作者：王拥军周重建施杞李晓锋徐乐勤更多>>
- 相关机构：上海中医药大学安徽中医学院福建中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会创新基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 益气化瘀方减轻HIF-1α条件性基因敲除小鼠膝关节软骨退变的研究被引量：15
- 2013年
- 目的:观察低氧诱导因子-1α(HIF-1α)条件性基因敲除(HIF-1αcKO)小鼠膝关节软骨退变情况,以及中药复方益气化瘀方对减缓HIF-1αcKO小鼠椎间盘软骨退变的作用。方法:①将杂交繁殖获得同窝的HIF-1α+/+小鼠和HIF-1α-/-小鼠,分为HIF-1α+/+小鼠4月龄组、HIF-1α-/-小鼠4月龄组,HIF-1α+/+小鼠6月龄组、HIF-1α-/-小鼠6月龄组,每组3只。在4、6月龄依次处死相应的小鼠,取膝关节软骨,分别进行Mankin评分、藏红固绿、HE及免疫组化相关指标染色及分析,研究软骨组织的改变情况。②将2月龄HIF-1α-/-小鼠随机分为生理盐水组和益气化瘀方组,以生理盐水组小鼠作为正常对照,每组6只,共12只。灌胃给药2个月后,取各组小鼠的膝关节,分别进行Mankin评分、HE染色和藏红固绿染色,ColⅡ、ColX、VEGF、MMP-13和Sox9免疫组化染色及分析。结果:①HIF-1α-/-小鼠4月龄组膝关节软骨组织出现破损和骨化,细胞分布不均匀,软骨细胞减少。HIF-1α-/-小鼠6月龄组膝关节软骨损伤更加严重。HIF-1α-/-小鼠4月龄组椎间盘软骨中Ⅱ型胶原(ColⅡ)和Sox9表达降低,X型胶原(ColX)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、VEGF蛋白表达增加。HIF-1α-/-小鼠6月龄组ColⅡ蛋白与Sox9表达进一步降低,ColX、MMP13、VEGF蛋白表达进一步上升。②与生理盐水组比较,益气化瘀方干预后膝关节软骨部位的骨化和缺损减轻,软骨细胞分布较均匀,细胞总数增加。免疫组化染色显示,益气化瘀方组ColⅡ和Sox9蛋白的表达升高,ColX、VEGF、MMP-13蛋白表达减少。结论:HIF-1α基因敲除小鼠出现了膝关节软骨退变,并且这种退变随着小鼠增龄而加重;益气化瘀方可以减轻HIF-1α基因敲除小鼠的膝关节软骨退变。
- 王晶董芳芳李晓锋舒冰施杞王拥军周重建
- 关键词：HIF-1Α基因膝关节软骨
- 骨质疏松与椎间盘退变相关性的研究进展被引量：3
- 2011年
- 骨质疏松症和椎间盘退变性疾病均为骨退行性疾病,临床上两者常可并见于同一病例,二者可能存在相似的发病机制,但骨质疏松和椎间盘退变的内在联系目前没有明确论述。本文就骨质疏松和椎间盘退变两方面的相关性从:骨质疏松对椎间盘营养的影响、炎性因子在椎间盘退变性疾病和骨质疏松症中的作用、雌激素对骨质疏松和椎间盘退变的影响、破骨细胞/破软骨细胞对骨质疏松和椎间盘退变的影响、OPG对骨质疏松和椎间盘的保护作用等几方面做一探讨。最后得出:骨质疏松和椎间盘退变存在一定的相关性和相似的发病机制,骨质疏松这一病理因素可能参与了椎间盘退变的病理进程,从而推测骨质疏松会引起或加速椎间盘的退变。
- 李晓锋席智杰梁倩倩徐乐勤周泉周重建施杞王拥军
- 关键词：骨质疏松椎间盘退变
- “肾有两脏”理论探微被引量：3
- 2013年
- 中医理论认为,肾具有藏精、主生殖、主生长发育等生理功能,其概念已非常明确。但对其解剖定位、功能界定,尚存在混乱,甚至是错解,严重阻碍了现代中医肾脏理论的发展。从中医经典理论的追溯、现代组织胚胎学、解剖学的最新发展及实验室、临床研究成果等方面,重新解读了中医肾的概念与功能。
- 姚长风杨洲周重建施杞王拥军
- 关键词：藏象学说
- 低氧诱导因子1α基因敲除小鼠椎间盘退变与益气化瘀方的干预被引量：1
- 2013年
- 背景:低氧诱导因子1α与椎间盘软骨的正常生理及病理情况存在密切的关系,能够维持软骨组织在低氧环境中的正常活性,低氧诱导因子1α基因敲除后,软骨组织无法维持其正常低氧状态,导致软骨组织营养供应障碍,使软骨细胞处于异常缺血缺氧状态,长此以往,软骨组织会发生退变。目的:观察低氧诱导因子1α条件性基因敲除小鼠椎间盘软骨退变情况,以及中药复方益气化瘀方对减缓低氧诱导因子1α基因敲除小鼠椎间盘软骨退变的作用。方法:①将杂交繁殖获得同窝的低氧诱导因子1α+/+对照小鼠和低氧诱导因子1α基因敲除小鼠,分别分为为2.5月龄组和4.5月龄组(n=6)。分别在2.5、4.5月龄处死相应小鼠,取L4-6腰椎进行藏红固绿、苏木精-伊红染色及免疫组化相关指标染色及分析。②取12只0.5月龄低氧诱导因子1α基因敲除小鼠随机均分为生理盐水组和益气化瘀方组。灌胃给药2个月后,取两组小鼠的L4-6椎间盘进行藏红固绿、苏木精-伊红染色及免疫组化相关指标染色及分析。结果与结论:①低氧诱导因子1α-/-小鼠:2.5月龄组椎间盘软骨组织出现破损和骨化,细胞分布不均匀,软骨细胞减少,椎间盘软骨中Ⅱ型胶原和Sox9表达降低,X型胶原、基质金属蛋白酶13表达增加;4.5月龄组椎间盘软骨损伤更加严重,Ⅱ型胶原蛋白与Sox9表达进一步降低,X型胶原、基质金属蛋白酶13表达进一步上升。②与生理盐水组比较,益气化瘀方干预后苏木精-伊红染色和藏红固绿染色显示软骨骨化和缺损减轻,软骨细胞数目较多,分布较均匀。与生理盐水组比较,益气化瘀方组椎间盘软骨中Ⅱ型胶原和Sox9的表达升高,X型胶原、基质金属蛋白酶13表达减少。说明低氧诱导因子1α基因敲除小鼠出现了椎间盘软骨退变,并且这种退变随着小鼠增龄而加重;益气化瘀方可以减轻低氧诱导因子1α基因敲除小鼠的椎�
- 王晶董芳芳李晓锋许金海舒冰施杞王拥军周重建
- 关键词：益气化瘀方低氧诱导因子1Α基因敲除小鼠软骨退变骨化
- 益气化瘀方对腰神经压迫模型大鼠背根节神经细胞凋亡和caspase-3表达的影响被引量：7
- 2010年
- 目的:观察益气化瘀方对腰神经根压迫损伤大鼠背根节神经细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)的影响。方法:雄性SD大鼠40只随机分为假手术组、模型组、弥可保组和益气化瘀方组,每组10只。造模各组用自制胶块压迫于大鼠右侧L_4神经根背根节处,假手术组仅切开皮肤和椎旁肌。造模后假手术组和模型组大鼠给予生理盐水灌胃,益气化瘀方组大鼠给予益气化瘀方煎剂灌胃,弥可保组大鼠肌肉注射弥可保。于造模10 d后取右侧受压神经根,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测神经细胞的凋亡情况;分光光度法结合考马斯亮蓝法检测受压迫神经根caspase-3活性;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测神经根组织caspase-3mRNA表达变化。结果:腰神经根受压迫后背根节的神经细胞凋亡明显增加,模型组大鼠神经细胞的凋亡指数高于假手术组(P<0.01);益气化瘀方和弥可保可减少背根节神经细胞的凋亡,两组大鼠神经细胞的凋亡指数低于模型组(P<0.05)。模型组大鼠神经根组织caspase-3活性和mRNA表达明显增高,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);益气化瘀方和弥可保可降低造模后大鼠神经根组织caspase-3活性及其mRNA表达,二者与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:腰神经根压迫可导致受压神经根组织caspsae-3的过表达和神经细胞凋亡的增加。益气化瘀方可抑制神经根组织caspase-3的过表达,减轻背根节神经细胞的凋亡。
- 徐乐勤李晓锋张有为舒冰施杞王拥军周重建
- 关键词：神经根损伤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- 施杞运用膏方治疗慢性筋骨病经验被引量：15
- 2012年
- 介绍施杞教授运用膏方治疗慢性筋骨病的学术思想,认为在治疗过程中应倡导辨证与辨病相结合,体现以气血为纲、标本兼顾,整体调摄、重在肝脾肾,心身同治、精气神共养的学术思想。并举膏方医案一例。
- 李晓锋王拥军叶秀兰周重建施杞
- 关键词：膏方
- Mash-1转染对胚胎干细胞在小鼠脊髓损伤部位向神经细胞分化的促进作用被引量：2
- 2016年
- 目的观察过表达Mash-1基因的胚胎干细胞在脊髓损伤部位向神经细胞分化的情况及其对脊髓神经损伤的修复作用。方法采用鼠干细胞病毒将Mash-1基因转染CE3小鼠胚胎干细胞稳转株。4周龄雄性SPF级昆明小鼠钳夹法建立急性脊髓损伤模型。造模后3 d向脊髓损伤部位注射生理盐水(模型组,n=12)、CE3胚胎干细胞(CE3组,n=12)、转染Mash-1基因的CE3小鼠胚胎干细胞(CE3-Mash-1组,n=12)。术后1 d、7 d、14 d、21 d、28 d检测小鼠后肢功能评分。术后14 d、28 d分别处死小鼠,HE染色观察脊髓剩余面积;CE3组、CE3-Mash-1组行Oct3/4、nestin、β-tubulinⅢ、神经胶质酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色,观察移植细胞的分化。结果与模型组比较,移植CE3和CE3-Mash-1细胞的小鼠运动功能均提高(F>84.471,P<0.05),脊髓剩余面积增加(F>49.990,P<0.05)。与移植CE3细胞相比,移植CE3-Mash-1细胞在损伤的脊髓部位Oct3/4阳性细胞数显著减少(t=5.439,P<0.001),而nestin(t=-7.536,P<0.001)和β-tubulinⅢ(t=-9.941,P<0.001)阳性细胞数显著增加,GFAP阳性细胞数无显著性差异(t=1.701,P=0.120)。结论过表达Mash-1基因可促进CE3细胞在脊髓损伤部位分化成神经元,促进小鼠后肢运动功能的恢复。
- 徐乐勤李晓锋施杞王拥军周重建
- 关键词：胚胎干细胞基因转染神经分化小鼠
- 胚胎干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展被引量：8
- 2011年
- 胚胎干细胞移植具有为损伤的脊髓提供营养,或分化成少突胶质细胞使脱髓鞘的神经再髓鞘化,或分化成神经元并与宿主神经元建立突触连接等作用,从而修复受损的神经功能,在脊髓损伤的治疗中具有良好的应用前景。
- 徐乐勤丁道芳李晓锋王拥军施杞周重建
- 关键词：胚胎干细胞脊髓损伤
- 益气化瘀方对腰神经压迫模型大鼠神经根组织Bax和Bcl-2的表达影响被引量：6
- 2011年
- 目的:观察益气化瘀方对腰神经根压迫损伤后L4神经根组织Bax和Bcl-2的表达影响。方法:雄性SD大鼠(SPF级)40只按随机数字表法分为假手术组、模型组、弥可保组和益气化瘀方组,每组各10只。采用自制胶块压迫于大鼠右侧L4神经根背根节处,假手术组仅切开皮肤和椎旁肌。造模后假手术组和模型组给予生理盐水灌胃;弥可保组采用肌肉注射弥可保注射液;益气化瘀方组给予益气化瘀方煎剂灌胃,于造模10d后取右侧受压神经根。采用免疫组织化学法检测背根节神经细胞Bax和Bcl-2的蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链反应法检测神经根组织Bax和Bcl-2的基因表达变化。结果:腰神经根压迫后,模型组的Bax蛋白和基因表达明显增高,其中基因表达与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01);而Bcl-2蛋白和基因表达明显减少,其中基因表达与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01)。益气化瘀方可减少Bax的蛋白和基因表达,其中基因表达低于模型组(P<0.01)。另外益气化瘀方可增加Bcl-2的蛋白表达,但对Bcl-2基因表达无明显影响。结论:腰神经根压迫模型可导致受压神经根组织Bax的过表达增加和Bcl-2的表达抑制。益气化瘀方可抑制神经根组织Bax的过表达;可增加Bcl-2的蛋白表达,但对其基因表达无明显影响。
- 徐乐勤张有为李晓锋舒冰王拥军施杞周重建
- 关键词：神经根损伤益气化瘀方BAXBCL-2
- 芪防膝痹方治疗大鼠膝关节骨性关节炎模型的实验研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察芪防膝痹方治疗大鼠膝关节骨性关节炎模型关节软骨的病理改变和血清中PGE2、6-Keto—PGF1α、TXB2的含量变化。方法选取40只4周龄SD大鼠随机分为4组，每组各10只：正常对照组，骨性关节炎模型组，中药干预组，西药干预组。正常对照组不进行处理，普通分笼饲养。余外3组大鼠参照Hulth法造模，中药干预组使用芪防膝痹方灌胃，西药干预组给予西乐葆水溶液灌胃；以上干预自造模建立后第2周开始，2次／d，连续4w。所有大鼠术后第5周时处死并取材，右侧股骨髁标本行藏红-固绿染色观察病理学改变，酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清中PGE2、6-Keto—PGF1α和TXB2的表达。结果藏红-固绿染色显示中药干预组关节软骨表面较光滑，表浅层细胞较少，中间层可见细胞簇集现象，潮线紊乱，藏红-固绿染色减退；中药干预组与骨性关节炎模型组比，经芪防膝痹方干预后大鼠膝关节软骨有明显改善，两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。中药干预组血清中PGE2、6-Keto—PGF1α和TXB2含量低于骨性关节炎模型组，两组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论芪防膝痹方改善了大鼠膝关节骨性关节炎模型的病理改变，其机制与抑制相关炎症因子PGE2、6-Keto—PGF1α和TXB2水平有关。
- 王文昊李晨光高翔吴弢王拥军
- 关键词：膝骨性关节炎动物实验
