重庆市自然科学基金(CSTC2010BB5112)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：何大维魏光辉张永波吴鑫何文飞更多>>
- 相关机构：重庆医科大学教育部襄阳市中心医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Piwil2重编程人成纤维细胞形成肿瘤干细胞的初步研究被引量：9
- 2013年
- 目的初步观察精原干细胞自我更新基因Piwil2重编程人成纤维细胞的细胞形态及功能特征变化,建立Piwil2调控肿瘤干细胞发生过程的细胞实验模型。方法将携带Piwil2-GFP标记和空载目的基因GFP标记的慢病毒载体分别感染原代培养的小儿包皮成纤维细胞,筛选建立稳定表达Piwil2-GFP和GFP成纤维细胞系,观察细胞形态变化及肿瘤球形成过程,分析细胞染色体核型,进行裸鼠体内成瘤实验,RT-PCR、免疫组织化学进一步鉴定重编程后细胞的干细胞特征及三胚层分化的相关标志物。结果转染后第5天,Piwil2-GFP成纤维细胞开始由长梭形逐渐转变为圆形,第14天出现集落样生长状态,挑选集落重悬后培养形成类似"肿瘤球"样克隆,其细胞染色体核型呈超二倍体的异质性改变。"肿瘤球"样克隆裸鼠体内移植2周时100%形成肿瘤,肿瘤组织学及免疫组化鉴定为表达多种外胚层、中胚层及内胚层肿瘤标志物的恶性肿瘤,RT-PCR显示细胞及裸鼠肿瘤表达干细胞多能基因Oct-4、Nanog、Sox2,以及三胚层特征标志物。结论Piwil2重编程人成纤维细胞后的细胞具有干细胞及多潜能分化特性,以及显著的肿瘤细胞异质特性。
- 吴鑫何大维张永波蔡春红魏光辉
- 关键词：成纤维细胞肿瘤干细胞
- T3调控氟他胺诱导大鼠隐睾生殖母细胞发育障碍及NCAM表达被引量：1
- 2011年
- 目的观察三碘甲腺原氨酸(T3)对氟他胺(Flu)诱导的SD大鼠隐睾生殖母细胞(Go)发育及神经细胞黏附分子(NCAM)表达的调控作用。方法 15μg/(kg.d)T3皮下注射Flu诱导出生后第1 d(PD1)仔鼠、PD20隐睾仔鼠,观察干预后隐睾发生率、组织学改变,免疫组化及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测NCAM表达。结果 Flu诱导仔鼠PD1给予T3干预,成年后隐睾发生率为25%(8/32),较未干预组的隐睾发生率40.9%(9/22)降低,且隐睾曲细精管内无残留生殖母细胞(Go),NCAM阴性表达。Flu诱导的PD13仔鼠睾丸组织、PD20仔鼠隐睾组织NCAMmRNA表达高于正常组(P<0.01,P<0.05),T3干预后,NCAMmRNA表达均低于非T3干预组(P<0.01),并与正常组无明显差异(P>0.05)。结论 T3可以降低Flu诱导暴露后隐睾发生率,下调NCAM表达,降低或消除隐睾曲细精管Go残存。
- 马超何大维姜勇超赵丹何文飞魏光辉
- 关键词：氟他胺隐睾三碘甲腺原氨酸神经细胞黏附分子
- 粒细胞集落刺激因子及其受体在儿童肾母细胞瘤中的表达
- 2012年
- 目的检测粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)及其受体(G-CSFR)在儿童肾母细胞瘤中的表达。方法收集我院2009年1月至2011年6月确诊的肾母细胞瘤患者手术标本27例。应用免疫组织化学方法检测肿瘤标本的G-CSF、G-CSFR的表达和分布情况。结果肾母细胞瘤标本中粒细胞集落刺激因子和其受体的表达率分别是62.96%、66.67%。其中,G-CSF和G-CSFR在同一样本中均阳性表达者16例(59.26%),均阴性表达者8例(29.63%)。G-CSF阳性和G-CSFR阴性表达1例(3.70%),G-CSF阴性和G-CSFR阳性表达2例(7.41%)。G-CSF和GCSFR的表达与性别、年龄、临床分期和病理分型均无相关性(P>0.05)。结论 G-CSF,G-CSFR在儿童肾母细胞瘤中高表达,无论性别、年龄、临床分期以及病理类型,均应检测肿瘤G-CSF、G-CSFR表达,对于G-CSFR阳性表达的患者,建议使用G-CSF时,应慎重考虑其对肿瘤的影响。
- 张永波何大维何文飞卞则栋吴鑫易钦君魏光辉
- 关键词：粒细胞集落刺激因子粒细胞集落刺激因子受体肾母细胞瘤
- 粒细胞集落刺激因子及其受体在儿童神经母细胞瘤中的表达研究被引量：3
- 2012年
- 目的检测粒细胞集落刺激因子(G-CSF)及其受体(G-CSFR)在儿童神经母细胞瘤中的表达情况。方法收集2009年1月-2011年6月确诊的神经母细胞瘤患儿手术标本25例。应用免疫组织化学法检测肿瘤标本中G-CSF和G-CSFR的表达,分析G-CSF,G-CSFR的表达与患儿年龄、性别及肿瘤临床分期的相关性。结果神经母细胞瘤标本中,G-CSF和G-CSFR阳性表达率分别为68%、72%。其中,G-CSF与G-CSFR均呈阳性者12例(48%),均呈阴性者2例(8%);一致性检验显示,G-CSF与G-CSFR同时检测均为阳性的标本无一致性(Kappa=-0.0456,P=0.8187)。G-CSF阳性与G-CSFR阴性者5例(20%),G-CSF阴性与G-CSFR阳性者6例(24%)。G-CSF和G-CSFR的表达与性别、年龄及临床分期无显著相关性(P>0.05)。结论无论性别、年龄及临床分期,G-CSF和G-CSFR在儿童神经母细胞瘤中均高表达,对于G-CSFR阳性表达的神经母细胞瘤患者,外源性应用G-CSF应慎重考虑其对肿瘤的影响。
- 吴鑫何大维张永波何文飞卞则栋易钦君魏光辉
- 关键词：粒细胞集落刺激因子神经母细胞瘤免疫组织化学
- 没食子酸拮抗环磷酰胺损伤睾丸支持细胞波形蛋白的研究被引量：3
- 2012年
- 目的观察没食子酸（GA）拮抗环磷酰胺干扰睾丸支持细胞波形蛋白（Vimentin）分布表达的作用。方法用SK—N．SH细胞株建立3周龄C57BL／6j小鼠移植瘤模型，实验随机对照组：（1）荷瘤鼠磷酸盐缓冲液（PBS）组（PBS组），每只荷瘤鼠腹腔注射PBS0．5ml，阴性对照；（2）荷瘤鼠环磷酰胺组（cP组），每只荷瘤鼠腹腔注射cP75mg／kg，2次／周，连续2周，阳性对照。（3）非荷瘤正常鼠组（Nc组），用于检测小鼠生殖功能对照；实验组：（1）没食子酸组（GA组），每只荷瘤鼠腹腔注射GA250mg／kg，1次／2d，连续2周；（2）荷瘤鼠没食子酸加环磷酰胺组（GA＋CP组），GA在cP给药前24h给药，每只荷瘤鼠给药剂量、方式、时间同GA、CP组，每组10只C57BL／6j小鼠。比较各组睾丸绝对质量及脏器系数，分别应用免疫组织化学、逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）、Westernblot检测睾丸支持细胞Vimentin分布、mRNA和蛋白水平变化。结果CP治疗后睾丸脏器系数与PBS组比较显著降低（P〈0．05），GA干预后升高（P〈0．05）。单用GA治疗后与PBS组差异无统计学意义（P〉0．05）；cP治疗后睾丸支持细胞Vimentin分布紊乱，mRNA及蛋白表达与PBS组比较显著下调（P〈0．01），GA干预后睾丸支持细胞Vimentin分布与PBS组类似，mRNA和蛋白表达较cP组显著上调（P〈0．01），与PBS组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论GA拈抗环磷酰胺干扰睾丸支持细胞Vimentin正常分布表达作用，可作为环磷酰胺损伤生殖功能的干预药物。
- 何文飞何大维张永波卞则栋吴鑫魏光辉
- 关键词：睾丸支持细胞没食子酸环磷酰胺波形蛋白
