目的研究制备抗玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)单克隆抗体免疫亲和柱(IAC)。方法用辛酸硫酸铵法纯化抗 ZEN 单克隆抗体,将纯化好的单抗与溴化氰活化的4FF 葡聚糖偶联制备抗 ZEN 单克隆抗体免疫亲合柱。采用紫外扫描鉴定偶联反应,间接竞争酶联免疫吸附法及高效液相色谱法(HPLC)对制备好的免疫亲合柱进行评价。结果每根抗 ZEN 单克隆抗体免疫亲和柱,使用0.5 ml 溴化氰活化的4FF 葡聚糖,350 μg ZEN 单克隆抗体,柱容量为0.40 μg。小麦样品添加 ZEN标品60～300 μg/kg,回收率76.33%～90.10%,相对标准偏差6.68%～10.93%。使用本实验室制备的抗 ZEN 单克隆抗体免疫亲合柱建立了 IAC-HPLC 方法,并检测小麦、玉米、饲料样品30份,结果有17份样品为阳性,阳性率56.67%,样品中 ZEN 含量为31.33～377.84 μg/kg;信噪比为3:1时,检测下限为10.00 μg/kg。结论抗 ZEN 单克隆抗体免疫亲和柱能快速特异地将 ZEN 从样品中分离出来,并同时完成净化和浓缩步骤,是一种简便的净化方法。
