辽宁省自然科学基金(9910500706)
- 作品数：4 被引量：29H指数：2
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- 乙肝病毒标志物在胎儿和胎盘组织中的表达及其与HBV母婴传播关系的研究被引量：1
- 2007年
- 目的通过对乙肝阳性产妇外周血、胎儿及胎儿附属物进行乙肝病毒标志物的检测,探讨HBV宫内感染发生的机制。方法通过ELISA法及实时荧光定量PCR法检测血清标本中HBV标志物及HBV DNA水平;通过对组织标本的免疫组织化学染色检测组织中HBV标志物的表达。结果胎儿脐血HBV DNA水平与母血HBV DNA水平相关,母血HBV DNA高水平(≥107copy/mL)时脐血HBV DNA阳性率明显增高,P<0.05。胎儿脐血HBV DNA水平显著低于母血HBV DNA水平,P<0.05。胎盘组织可见HBsAg免疫组织化学染色阳性,但未发现HBcAg染色阳性。在引产胎儿胎肝和胎肾组织中发现HBsAg和/或HBcAg免疫组织化学染色阳性细胞。结论母亲HBV DNA高水平是发生HBV宫内感染的高危因素。脐血HBV DNA阳性是判断HBV宫内感染的相关指标;HBV可能通过胎盘感染的途径由母体进入胎儿体内,并可能在胎儿体内定位和复制,这可能是导致HBV宫内感染的原因。
- 白菡张琳窦晓光冯国和张一力赵桂珍
- 关键词：乙型肝炎病毒宫内传播
- 乙肝疫苗阻断HBV母婴传播免疫失败与母子HBV基因分型及S基因变异的相关性被引量：2
- 2007年
- 目的：对照研究乙肝疫苗免疫阻断失败的儿童和母亲血清HBV DNA水平、基因型及病毒S基因变异情况，探讨导致乙肝疫苗阻断母婴传播免疫失败的病毒学因素。方法：通过实时定量PCR（RQ-PCR）法检测母子血清HBV-DNA含量；PCR法扩增出母子HBV DNA S基因片断，纯化后进行基因测序。结果：7对母子共15份血清HBV DNA均为高水平（〉1．0×10^8 copy／ml）。其中2对属于基因B型，5对属于C型。母子间基因序列同源性为99％～100％，HBV-S基因核苷酸测序结果与选定的标准株进行比较，存在多个位点的变异，特别是“a”决定簇的变异。核苷酸变异影响病毒氨基酸的表达。结论：乙型肝炎疫苗阻断HBV母婴传播失败的原因可能与HBV变异株的感染有关，特别是“a”决定簇的变异，变异株来源于母亲。
- 白菡张琳窦晓光马力石理兰李颖赵桂珍
- 关键词：疾病传播乙型
- 胎盘滋养层细胞的乙型肝炎病毒感染与宫内感染机制被引量：20
- 2007年
- 目的：检测HBV对胎盘、胎肝和滋养层细胞的感染情况，探讨HBV的宫内感染机制。方法：研究对象包括20例孕妇胎盘组织、6例引产胎儿胎肝组织及体外培养的胎盘滋养层细胞。ELISA法检测孕妇外周血、胎儿脐血和6个月婴儿外周血HBV标志物；荧光定量PCR法检测血清和滋养层细胞中的HBV DNA；免疫组织化学法和免疫荧光法检测胎盘、胎肝组织及滋养层细胞中HBV标志物的表达；末端脱氧核糖核酸转移酶介导的缺口标记法（TUNEL）检测胎盘和滋养层细胞凋亡情况。结果：孕妇血清HBV DNA水平与胎儿脐血HBV DNA水平相关，脐血HBV DNA阳性者其母血HBV DNA〉1.0×10^7拷贝／mL；6例胎盘组织和3例引产胎儿胎肝组织中可见HBsAg免疫组织化学染色阳性细胞，其中1例胎肝组织中发现HBcAg阳性细胞；体外培养滋养层细胞与HBV DNA阳性血清共孵育后，可检测到HBsAg的表达，亦可检测到HBV DNA。体内和体外实验均检测到HBV感染后滋养层细胞凋亡呈增加趋势，且胎盘细胞的凋亡与脐血HBV DNA水平相关。体外实验结果显示，随感染时间的延长，滋养层细胞凋亡呈增加趋势。6个月后，12例新生儿有1例血清HBsAg、HBeAg和抗-HBc阳性，6例抗-HBs阳性。结论：HBV宫内感染的机制可能是通过HBV感染胎盘屏障而使胎儿发生HBV宫内感染。HBV在胎儿组织器官内的定位和复制可能是新生儿发生慢性HBV感染的重要因素。滋养层细胞凋亡可能是胎盘屏障阻断HBV宫内传播的一种保护性机制。
- 白菡丁洋张琳马力赵桂珍窦晓光
- 关键词：胎盘滋养层
- 人早孕胎盘绒毛膜滋养层细胞体外培养模型的建立被引量：6
- 2006年
- 目的通过对早孕胎盘绒毛膜滋养层细胞的分离,纯化和培养,寻找一种稳定、简便可获得较高纯度滋养层细胞的培养方法。方法通过胰酶/DNA酶联合消化法对妊娠6-10周绒毛组织进行消化,获得单细胞悬液,比较Per-coll密度梯度离心和淋巴细胞分离液对滋养层细胞的分离纯化效果。含10%FBS的DMEM/F12培养基培养,并比较是否应用鼠尾胶原对细胞贴壁和生长的影响。通过免疫荧光方法对滋养层细胞进行鉴定。结果经简化Percoll密度梯度离心分离纯化的滋养层细胞纯度高,明显优于淋巴细胞分离液的分离效果(P<0.001);细胞生长表面预先经鼠尾胶原处理后,细胞贴壁良好,分裂生长旺盛。结论利用简化Percoll密度梯度离心法分离细胞,并在应用鼠尾胶原的条件下进行培养,可以获得满意的人绒毛膜滋养层细胞的体外培养模型。
- 白菡何丽霞马力李颖赵桂珍
- 关键词：滋养层细胞细胞培养
