江苏省自然科学基金(BG2001011)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：刘景晶唐松山谢燕飞胡卓逸明欣更多>>
- 相关机构：中国药科大学广东药学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 两种生长激素类似肽对大鼠和人流产胎儿垂体激素分泌的影响研究
- 2005年
- 目的研究ProProhGHRH(144)OH和ProProhGHRH(144)GlyGlyCys两种神经肽对大鼠垂体或人流产胎儿垂体激素分泌的影响。方法将神经肽加入KrebsRinger缓冲液内,在不同保温时间内测定大鼠垂体GH或人流产胎儿垂体的hGH、hTSH、hFSH、hLH和hPRL在体外的释放值。GH浓度用人GH放射免疫多抗试剂盒测定,其他垂体激素浓度用顺磁性粒子化学发光免疫测试试剂盒确定。结果鼠垂体活性结果显示,ProProhGHRH(144)OH组(0.1～10μg/mL)和ProProhGHRH(140)GlyGlyCys组(0.01～1μg/mL)的GH刺激值,与刺激前的空白对照值相比有明显的提高,而且随肽浓度的增加,GH的释放量明显提高。在相同浓度下,ProProhGHRH(144)GlyGlyCys肽释放的GH值远大于ProProhGHRH(144)OH肽释放的GH值,即使ProProhGHRH(144)GlyGlyCys的剂量0.01μg/mL,仍有较好的活性。流产胎儿垂体的体外测试结果显示,在5μg/mL剂量下,3种多肽都产生很好的活性,ProProhGHRH(144)GlyGlyCys的平均活性是ProProhGHRH(144)OH的1.71倍,但3种活性多肽间差异没有显著性(P>0.05)。对hTSH、hFSH、hLH和hPRL垂体激素的测试结果显示,这两种神经肽对它们没有刺激作用。结论ProProhGHRH(144)GlyGlyCys和ProProhGHRH(144)OH有很好的GH释放活性和功能特异性。测试结果表明,GHRH的C端改构可调节垂体释放生长激素的活性。
- 唐松山张娟辉刘景晶
- 关键词：神经肽垂体垂体激素
- 重组乳酸乳球菌X-脯氨酰二-肽酰基-氨基肽酶的纯化及动力学特性(英文)被引量：5
- 2003年
- 重组的乳酸乳球菌X 脯氨酰 二肽酰基 氨基肽酶是一个工具酶 ,它对基因构建的神经肽或活性多肽的转活具有重要意义 .通过细菌细胞的破碎 ,洗涤 ,冷冻离心 ,透析 ,DEAE 纤维素 5 2柱层析等工艺过程达到电泳纯 .该酶比活为 11.92 6U mg ,纯化倍数为 14.37倍和总活性收率为5 5 .5 6% .通过SDS PAGE和凝胶柱层析法 ,测得该二肽酶有单肽链组成 ,分子量 89KD .在该酶的动力学研究中 ,针对特异性底物L 甘氨酰 L 脯氨酰 对 硝基苯胺 ,求得该酶的米氏方程式 1 V =0 0 4 8 [S]+ 0 2 5 66(r =0 994 ) .它的Km 值为 0 1871mmol L ,最大反应速度Vmax为 3 897μmol·L-1·min-1.该酶可被苯甲酰基磺酰氟 ,胰蛋白酶抑制剂和Mn2 +,Ba2 +,Cu2 +andZn2 +等金属离子抑制 ,但可被Mg2 +激活 .进一步试验显示 ,当Cu2 +和Zn2 +浓度增加到 3 72 6mmol L ,抑制作用明显增强 .低浓度的EDTA Na2 (≤ 0 62 12mmol L)不影响酶的活性 .因此 ,该X 脯氨酰 二肽酰基
- 唐松山吴洁谢燕飞明欣胡卓逸刘景晶
- 关键词：丝氨酸蛋白酶动力学特性纯化
