武汉市科技攻关计划项目(20041003068-05)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 相关作者:罗小平宁琴习东刘祖黎卢强华更多>>
- 相关机构:华中科技大学华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金:武汉市科技攻关计划项目国际科技合作重点项目计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 金纳米颗粒基因探针检测HBV DNA被引量:3
- 2007年
- 目的制备金(gold,Au)纳米颗粒HBV DNA基因探针,通过透射电镜直接检测乙肝患者血清中的HBV DNA,实现不经过PCR扩增检测DNA。方法制备Au纳米颗粒和Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,用荧光标记法检测纳米颗粒探针表面寡核苷酸的覆盖数和杂交效率。在检测体系中加入乙肝患者血清中提取的HBV DNA,透射电镜下观察。结果制备的Au纳米颗粒粒径为(10±5)nm,水相分散良好,在520nm有Au特征性的最大吸收峰,经寡核苷酸修饰后,其最大吸收峰改变为524nm。Au纳米颗粒基因探针表面寡核苷酸的最大覆盖数目为(132±10)条,最大杂交效率为(22±3)%。在液相中与HBV DNA反应后,透射电镜下可观察到Au纳米颗粒凝聚成大的聚集体。结论成功制备了Au纳米颗粒HBV DNA基因探针,可直接用于HBV DNA的检测。
- 习东宁琴卢强华姚凯伦刘祖黎罗小平
- 关键词:乙型肝炎病毒金DNA探针
- 金纳米颗粒基因探针同步检测HBV和HCV的初步研究被引量:1
- 2009年
- 目的建立一种简单、快速同时检测HBV DNA和HCV RNA的诊断方法。方法利用PCR方法扩增HBsAg阳性合并抗HCV阳性的患者血清中HBV DNA和HCV cDNA并提取。制备Au纳米颗粒HBV DNA、HCV cDNA基因探针。在含有Au纳米颗粒HBV DNA、HCV cDNA基因探针的液相检测体系中加入HBV DNA和(或)HCV cDNA,透射电镜下观察。结果PCR可扩增HBV DNA和HCV cDNA,出现预期的431bp和323bp特异性条带。使用Au纳米颗粒基因探针通过透射电镜可同步检出乙、丙型肝炎合并感染患者血清中提取的HBV DNA和HCV RNA。结论通过透射电镜,使用Au纳米颗粒基因探针可同步检出乙、丙型肝炎合并感染患者血清中的HBV DNA和HCV cDNA,甚至可达到无需PCR水平,此方法具有敏感性高、特异性好的特点。
- 习东罗小平宁琴
- 关键词:肝炎病毒乙型肝炎丙型DNA探针