陕西省“13115”科技创新工程(2008ZDKG-68)
- 作品数：1 被引量：6H指数：1
- 相关作者：王劼宋振安宁杨振雷鸣更多>>
- 相关机构：陕西省农业分子生物学重点实验室西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省“13115”科技创新工程更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人SUMO-1基因原核表达、纯化及多克隆抗体制备与鉴定被引量：6
- 2009年
- 目的构建人SUMO-1基因的原核表达载体,诱导表达重组蛋白,制备兔抗人SUMO-1抗血清。方法从质粒pcDNA-HA-SUMO1-GG中用PCR方法克隆到编码人SUMO-1N端97个氨基酸的基因片段,构建了SUMO-1原核表达载体pET41a(+)-SUMO1,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导蛋白表达并利用GST亲和层析柱进行纯化,以纯化后的融合蛋白GST-SUMO1为抗原免疫家兔,获得抗血清。Western blotting、ELISA法鉴定获得的抗血清。结果成功构建原核表达载体,纯化到融合蛋白GST-SUMO1,用纯化的融合蛋白免疫家兔制备了多克隆抗体,Western blotting、ELISA法证实多克隆抗体制备成功。结论成功获得了人SUMO-1多克隆抗体,为进一步研究人SUMO-1蛋白的功能奠定了基础。
- 宋振王劼安宁杨振雷鸣郭泽坤
- 关键词：原核表达蛋白纯化多克隆抗体
