新疆地方病分子生物学实验室开放课题
- 作品数：21 被引量：115H指数：8
- 相关作者：侯友翔赵今丛媛媛钟薇王勇更多>>
- 相关机构：新疆医科大学新疆医科大学第一附属医院新疆医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金自治区科技支疆项目计划新疆维吾尔自治区科技支疆项目更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 宫颈癌患者局部组织中T细胞免疫与CD4^+ CD25^+ FOXP3^+ 调节性T细胞的表达被引量：12
- 2016年
- 目的探讨宫颈癌患者局部组织中T细胞免疫与CD4^+ CD25^+ FOXP3^+ 调节性T(Treg)细胞的表达。方法选取2009年1月至2010年12月间收治的40例宫颈癌患者为研究组,另选同期行子宫肌瘤全子宫切除术后的正常宫颈20例患者和2010年9月行体检的健康者20名为对照组。采用流式细胞术检测外周血中CD3^+ 、CD4^+ 、CD8^+ 的T细胞亚群、以及CD4^+ CD25^+ Foxp3^+ Treg细胞的百分比;免疫组织化学SP法检测宫颈癌组织中肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)CD3^+ TILs、CD4^+ TILs、CD8^+ TILs及Treg细胞的分布及20例正常宫颈组织中CD3^+ T细胞、CD4^+ T细胞、CD8^+ T细胞、Treg细胞的分布情况。结果正常宫颈组织中不表达Treg细胞;宫颈癌组织中CD3^+ TILs、CD4^+ TILs、CD8^+ TILs数量高于正常宫颈组织(P<0.05)。宫颈癌患者与正常对照组外周血中CD3^+ 、CD4^+ 及CD8^+ T细胞的数量差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤患者外周血中Treg细胞计数明显高于正常对照组(P<0.05)。结论宫颈癌患者局部组织中主要的T淋巴细胞有所增加,局部组织中对恶性肿瘤存在免疫反应,但Treg细胞的升高表明其引发机体对肿瘤的免疫抑制或逃逸。
- 侯友翔董占飞张银华钟薇古丽娜.库尔班
- 关键词：子宫肿瘤TREG细胞
- 正交试验法优化阿里红多糖的提取工艺被引量：9
- 2009年
- 目的建立阿里红多糖的最佳提取工艺。方法采用水提醇沉法,以总多糖提取率为指标,对阿里红中多糖提取工艺进行系统研究。选择提取时间、浸提料液比、和浸提次数三因素。通过正交实验L9(33)确定阿里红多糖的最佳提取工艺条件。结果最佳工艺条件为浸提时间2h,料液比1∶12,浸提次数3次。结论该工艺简便、合理,为从药材或制剂中提取阿里红多糖提供了参考。
- 王勇帕丽达.阿不力孜米日古力朱炎
- 关键词：阿里红多糖正交实验
- HPLC法同时测定新疆鼠尾草中5个酚酸类成分的含量被引量：4
- 2016年
- 目的:建立HPLC同时测定新疆鼠尾草中原儿茶醛、丹参素钠、原儿茶酸、咖啡酸、迷迭香酸的含量。方法:采用Phenomennex Luna C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.5%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,20%A→30%A;10～20 min,30%A→35%A;20～30 min,35%A→36%A;30～35 min,36%A→47%A),流速1 m L·min^(-1),检测波长为285 nm,柱温40℃,进样量20μL。结果:新疆鼠尾草5个成分在各自的线性范围内(原儿茶醛0.080 96～4.048 0μg·m L^(-1),丹参素钠0.803 2～40.16μg·m L^(-1),原儿茶酸0.172 8～8.640μg·m L^(-1),咖啡酸0.166 4～8.320μg·m L^(-1),迷迭香酸0.800 8～40.40μg·m L^(-1))均呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均加样回收率、精密度、重现性和稳定性均符合有关规定。10批样品中5种酚酸类成分的含量分别为原儿茶醛0.024～0.140 mg·g^(-1),丹参素钠0.676～1.940 mg·g^(-1),原儿茶酸0.017～0.276 mg·g^(-1),咖啡酸0.032～0.264 mg·g^(-1),迷迭香酸0.199～6.319 mg·g^(-1)。结论:该方法经方法学验证,可用于新疆鼠尾草药材的质量评价。
- 王晓梅余妍王新玲胡君萍王小青李敏热娜卡斯木
- 关键词：新疆鼠尾草酚酸类成分原儿茶醛丹参素钠原儿茶酸迷迭香酸
- 食管鳞癌中微小核糖核酸-21的作用及对靶蛋白的影响被引量：1
- 2011年
- 目的探讨微小RNA（miRNA）-21对食管鳞癌细胞Ecal09和哈萨克族食管癌的促增殖作用及对程序性细胞死亡基因4（PDCD4）表达的影响。方法将食管鳞癌细胞系Ecal09分为miRNA-21Mimics组（转染序列5＇-UCAACAUCAGUCUGAUAAGCUA-3’）、miRNA-21抑制剂组（转染序列5＇-UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA-3＇）、阴性对照组（转染随机序列）和正常对照组（不予转染等任何处理）。细胞按4．5×10^5个／孔接种于6孔板，基于RNA干扰（RNAi）技术、使用脂质体2000试剂进行细胞转染。采用细胞计数法检测转染后各组细胞的增殖情况。使用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT—PCR）检测各组细胞的miRNA-21转录水平。采用Western印迹技术检测转染后各组PDCD4蛋白表达情况。检测18对哈萨克族食管癌及其对应的癌旁正常食管组织中miRNA-21转录和PDCD4蛋白表达情况。结果转染48h后，与正常对照组比较，miRNA-21Mimics组Ecal09细胞数增加36％（P=0．002），miRNA-21抑制剂组细胞数减少28％（P=0．002），阴性对照组细胞数变化不明显（P=0．515）。转染48h后，miRNA-21抑制剂组、miRNA-21Mimics组、阴性对照组、正常对照组miRNA-21的相对表达量分别为0．37±0．10、9．17±1．08、0．74±0．23和1．04±0．34，PDCD4蛋白相对表达量分别为1．47±0．11、0．61±0．09、0．89±0．12、0．79±0．02。与正常对照组比较，miRNA-21抑制剂组miRNA-21相对表达量下降（P=0．031）、PDCD4蛋白相对表达量上调（P=0．001），miRNA-21Mimics组miRNA-21相对表达量上升（P=0．001）、PDCD4相对表达量下调（P=0．030），阴性对照组则差异无统计学意义（P值分别=0．272和0．541）。18对哈萨克族食管癌组织中16对的miRNA-21相对表达量（0．11±0．09）高于其对应的癌旁正常食管组织（0．03±0．03，P=0．001），PDCD4蛋白相对表达量（0．92±0．39）低于其对应的癌旁正常食管组织（1．57±0．8
- 刘涛刘清马文静阿孜古丽·吐尔逊郑树涛伊力亚尔·夏合丁马正海卢晓梅
- 关键词：微小核糖核酸
- 伊犁黑蜂蜂胶对不同状态下变形链球菌乳酸脱氢酶及其相关基因影响的实验研究被引量：3
- 2015年
- 目的目的通过新疆伊犁黑蜂蜂胶乙醇提取物(Ethanol Extract of Propolis,EEP)对不同状态下变形链球菌乳酸脱氢酶活性及其相关基因表达影响的作用,研究伊犁黑蜂蜂胶抑制变形链球菌产酸的原因并探讨其可能的防龋机制。方法 (1)分别培养浮游状态与生物膜状态下生长的变形链球菌,根据实验分组用含梯度浓度EEP的BHI培养基、50 mg/L氟化钠的BHI培养基作用18 h,通过还原性辅酶I氧化法测定乳酸脱氢酶活性。(2)分别培养浮游状态与生物膜状态下生长变形链球菌,根据实验分组用含梯度浓度EEP的BHI培养基、含50 mg/L氟化钠的BHI培养基作用18 h,反转录-实时荧光定量PCR(RTq PCR)法测定各组乳酸脱氢酶编码基因ldh表达情况。结果 (1)在浮游状态与生物膜状态下,EEP组和Na F组乳酸脱氢酶活性均有降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)浮游状态时,实验组组和阳性对照组ldh表达明显受到抑制(P<0.05);生物膜状态下,实验组在1 MBEC、1/2 MBEC、1/4 MBEC浓度时ldh表达受到抑制(P<0.05),Na F组ldh表达差异没有统计学意义(P>0.05)。结论伊犁黑蜂蜂胶能够抑制浮游状态与生物膜状态下变形链球菌乳酸脱氢酶活性及其编码基因ldh表达,来抑制细菌产酸,伊犁黑蜂蜂胶可能是通过此途径抑制变形链球菌产酸,从而达到防龋的效果。
- 祖力卡尔江.阿合买提林静于倩赵今
- 关键词：变形链球菌乳酸脱氢酶实时荧光定量PCR
- 伊犁黑蜂蜂胶对变形链球菌属及其生物膜代谢影响研究被引量：4
- 2015年
- 目的探讨伊犁黑蜂蜂胶乙醇提取物(Ethanol extract of Propolis,EEP)与氟化钠(NaF)对致龋变形链球菌属产酸、产糖代谢关键酶乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)与葡萄糖基转移酶(Glycosyltransferase,GTF)及基因表达的影响及其防龋机制。方法分别培养游离状态与生物膜状态下生长的变形链球菌、远缘链球菌,以含梯度浓度EEP的脑心浸液培养基(Brian Heart Infusion,BHI)作为实验组,50mg/L NaF的BHI培养基作为阳性对照组,以不添加任何药物的BHI培养基作为阴性对照组。各组与不同生长状态的细菌作用18h。采用还原性辅酶I氧化法测定乳酸脱氢酶活性。硫酸铵盐析结合超滤离心法提取GTFs粗酶,蒽酮法测定GTFs活性。RT-qPCR法测定各组LDH编码基因ldh表达和各组GTFs编码基因gtfb、gtfc、gtfd表达。结果在游离状态与生物膜状态下,变形链球菌、远缘链球菌各实验组和NaF组LDH活性均明显受到抑制(P<0.05)。在游离状态和生物膜状态下,EEP组、NaF组变形链球菌GTFs活性没有变化(P>0.05)。游离状态时,变形链球菌、远缘链球菌实验组和NaF组ldh表达明显受到抑制(P<0.05);生物膜状态下,变形链球菌实验组在1、1/2、1/4MBEC浓度时ldh表达受到抑制(P<0.05),远缘链球菌实验组在1、1/2、1/4、1/8MBEC浓度时ldh表达受到抑制(P<0.05),NaF组细菌在ldh表达差异没有统计学意义(P>0.05)。游离状态与生物膜状态下,变形链球菌实验组gtfb、gtfc、gtfd基因表达与阴性对照组差异无统计学意义(P>0.05)。游离与生物膜生长状态下,变形链球菌NaF对gtfb基因表达有促进作用(P<0.05)。结论伊犁黑蜂蜂胶是通过抑制产变形链球菌属糖代谢途径LDH活性及其转录来抑制变形链球菌产酸,从而达到防龋的效果。
- 祖力卡尔江.阿合买提李艳孟凡琦赵今
- 关键词：蜂胶乳酸脱氢酶葡萄糖基转移酶荧光定量PCR
- 宫颈癌人乳头瘤病毒感染与CD4^+CD25^+Foxp3^+调节性T细胞的相关性研究被引量：8
- 2013年
- 目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒(HPV)感染与T细胞亚群、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的相关性。方法采用HPV核酸扩增分型检测试剂盒及流式细胞术检测宫颈癌组(40例)、正常对照组(20例)的HPV分型和外周血中T细胞亚群及CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分率。结果 HPV阳性的患者外周血T细胞亚群与HPV阴性的患者比较,差异无统计学意义(P>0.05),但调节性T细胞(Treg)在HPV阳性与阴性组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分率与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞呈显著正相关(r=0.613,P<0.05)。结论宫颈癌患者免疫功能与正常人无明显差异,Treg细胞与宫颈癌患者HPV持续感染、肿瘤免疫逃避密切相关。
- 侯友翔张园钟薇古丽娜.库尔班
- 关键词：宫颈癌调节性T细胞人乳头瘤病毒
- 三氧化二砷对裸鼠宫颈癌移植瘤的作用及机制被引量：8
- 2011年
- 目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO,As2O3)对宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长的作用及机制。方法建立裸鼠移植瘤模型,分为低浓度As2O3组[2mg/(kg.d)],高浓度As2O3组[5mg/(kg.d)],顺铂(DDP)组[3mg/(kg.d)]及阴性对照组(0.9%氯化钠0.2ml/d),连续给药10d,观察抑瘤率及药物对裸鼠的影响。透射电子显微镜观察肿瘤的超微结构,免疫组织化学检测p-P38和Caspase-3的表达。结果低浓度As2O3,高浓度As2O3及DDP的抑瘤率分别为22.95%、54.86%和54.48%,后两者的抑瘤率与阴性对照组的差异有统计学意义(P<0.05),但DDP的不良反应大。p-P38和Caspase-3在As2O3组的表达明显高于阴性对照组(P<0.05)。结论 As2O3可通过诱导肿瘤细胞凋亡抑制宫颈癌移植瘤的生长。
- 林晨拉莱.苏祖克史永华魏琴
- 关键词：宫颈癌裸小鼠三氧化二砷凋亡
- 哈萨克族食管癌中人乳头状瘤病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用
- 2012年
- 目的建立检测哈萨克族食管癌石蜡样本中HPV16/18(human papillomavirus 16/18,HPV16/18)病毒载量的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(real time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)方法,并探讨病毒载量与食管癌病理分级的相关性。方法分别构建HPV16/18和内参基因β-actin的重组质粒,制备质粒标准品;确定最佳实验条件,建立高灵敏度的qRT-PCR方法,并对103例经病理学确诊的哈萨克族食管癌石蜡包埋组织提取DNA后,进行HPV16/18载量的检测,分析其载量与哈萨克族食管癌病理分级的相关性。结果建立了HPV16/18和β-actin标准曲线,HPV16/18和β-actin标准品Ct值与其相应梯度稀释标准品浓度呈良好线性关系r,2>0.990,扩增效率分别为85.3%～105.0%,经溶解曲线分析产物特异。103例哈萨克族食管癌样中HPV16的检出率为18.3%,并有3例合并混合HPV18感染;其中HPV16的病毒载量在哈萨克族食管癌转移组中是未转移组中的1.35倍。结论成功建立了灵敏度较高的检测HPV16/18病毒载量的实时荧光定量PCR方法。HPV16/18感染是哈萨克族食管癌发生发展的因素之一,但其病毒载量与恶性程度相关性不显著。
- 刘涛郭景霞郑树涛梁萌李秀凌刘清朱慧马正海
- 关键词：哈萨克族食管癌HPV16/18病毒载量
- 阿里红多糖中糖醛酸的含量测定被引量：10
- 2010年
- 采用间羟基联苯法对阿里红多糖中的半乳糖醛酸进行含量测定,在波长520nm处测定吸光度,实验表明标准半乳糖醛酸浓度在0.01～0.05mg/mL之间呈良好的线性关系,该法简便易行,准确性高,重现性好。探讨了测定过程的影响因素,并通过此法测定阿里红多糖中的半乳糖醛酸平均含量为17.07%。
- 帕丽达.阿不力孜丛媛媛王勇
- 关键词：糖醛酸
