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广东省中医药管理局基金(1060117)
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
相关作者:
卢燕茹
江振友
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相关机构:
暨南大学
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发文基金:
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卢燕茹
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中山大学学报...
年份
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2007
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人GM-CSF基因真核表达载体构建与表达
被引量:4
2007年
【目的】构建以基因佐剂hGM-CSF基因为基础的真核表达质粒pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞HeLa中表达与鉴定。【方法】采用聚合酶链反应从载体pORF-hGM-CSF中,扩增出hGM-CSF基因,克隆到双顺反子真核表达载体pIRES的多克隆位点B(MCSB)中,构建pIGM-CSF真核表达载体。然后采用脂质体转染法将其转染HeLa细胞,用RT-PCR在RNA水平和ELISA在蛋白水平检测其在真核细胞中的表达。【结果】所克隆hGM-CSF基因片段经测序完全正确;重组质粒转染Hela细胞后,检测有hGM-CSF表达。【结论】成功构建含基因佐剂真核表达载体pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞中能有效表达,为继续克隆目的抗原从而构建双顺反子真核表达质粒奠定了基础。
卢燕茹
江振友
关键词:
真核表达载体
HGM-CSF
基因佐剂
双顺反子
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