国家自然科学基金(31071745)
- 作品数：15 被引量：29H指数：3
- 相关作者：关雄黄天培张灵玲邵恩斯苏新华更多>>
- 相关机构：福建农林大学福州市疾病预防控制中心泉州市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 苏云金芽孢杆菌NAD(P)H:醌氧化还原酶基因的克隆和敲除载体的构建被引量：2
- 2012年
- 以苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种(Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki)8010为研究材料,通过PCR技术获得Bt 8010菌株NAD(P)H:醌氧化还原酶基因上下游2个片段,以含有卡那霉素抗性基因的pDG780质粒为中间载体,通过酶切、连接和PCR,构建含待敲除NAD(P)H:醌氧化还原酶基因上下游片段、卡那霉素抗性基因的重组质粒pRN5101DKU,为后续Bt8010菌株NAD(P)H:醌氧化还原酶基因的敲除做准备.
- 李今煜肖水华黄天培
- 关键词：苏云金芽孢杆菌基因敲除载体
- 松材线虫分离及不同真菌对松材线虫繁殖的影响被引量：2
- 2011年
- 主要对松材线虫的取样分离进行探索,并初步研究了以真菌作为食料培养松材线虫。结果表明:取样部位对分离效果有影响,蛀孔及蛹室周围分离到的线虫量明显比枝条及树干其他部位多;不同真菌培养松材线虫效果有差异,主要采用了灰葡萄孢、黄瓜镰刀菌和香蕉镰刀菌3种真菌,通过设计不同影响因素比较培养效果,发现灰葡萄孢培养效果较为稳定且最佳,其次是黄瓜镰刀菌。因此,灰葡萄孢和黄瓜镰刀菌可选用于培养松材线虫。
- 黄响珠林秋秋吴远杰张灵玲关雄
- 关键词：松材线虫真菌
- 鲜水中Bt菌株的分离及其生物学特性分析被引量：2
- 2011年
- 以武夷山和福州森林公园采集获得的30份新鲜水样为材料,分离获得5株苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)野生菌株。为了解这些新菌株的生物学特性,进行了形态学、生理生化、杀虫晶体蛋白等研究,并对白纹伊蚊(Aedes albopictus)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)两类靶标昆虫进行毒力测定,结果显示LLW1对白纹伊蚊有较高的杀虫活性,其较正死亡率可达95.5%。经PCR扩增,发现该菌株含有cyt2基因。但这5个野生菌株对棉铃虫均无活性。
- 张灵玲陈伟生沈建闽黄天培关雄
- 关键词：苏云金芽孢杆菌毒力测定
- 高效杀蚊苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29的发酵优化被引量：3
- 2012年
- 苏云金芽孢杆菌BRC-LLP29为新型高效杀蚊菌株,应用快速有效的数学统计方法对其杀蚊毒力的发酵培养进行优化.通过单因素筛选确定最佳碳源为葡萄糖、麦芽糖、可溶性淀粉,氮源为typetone、大豆蛋白胨、干酪素;最佳金属离子为Mg^(2+)、Al^(3+).采用二水平Placlkett-Burman设计对影响毒力的8因素进行显著性筛选,获得培养基成分中3个重要影响因子:葡萄糖、干酪素和Al_2(SO_4)_3;运用爬坡路径法对这3种因子进行试验,获得3种重要因子的最适浓度范围;通过响应面分析法得到3个重要因子的交互作用和最佳条件,确定BRC-LLP29菌株最佳毒力水平的发酵培养基为:葡萄糖19.8g/L、干酪素28.4g/L、Al_2(SO_4)_31.2g/L、MgSO_4 2g/L、K_2HPO_4 3g/L、CaCO_3 0.5g/L,优化后毒力水平达到致死率61.11%,与响应面数学模型的预测值只有5.91%的误差.发酵条件优化结果表明:发酵温度为31°,发酵初始pH为7.0,摇瓶装量为40mL/250mL三角瓶,每瓶的接种量为3.5%,发酵72h,对致倦库蚊最终致死率达到最高为83.33%.
- 陈宇熹叶舒婷蔡美凤张灵玲关雄
- 关键词：苏云金芽孢杆菌发酵优化致倦库蚊校正死亡率
- 苏云金芽胞杆菌BRC-ZLL5类细菌素的抑菌谱和理化特性被引量：1
- 2014年
- 为提升苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)生物农药产品附加值,通过对其发酵上清液提取细菌素,进一步研究Bt菌株BRC-ZLL5类细菌素(Bacteriocin-like inhibitory substa nces,BLIS)的抑菌谱和理化特性.结果显示:BRC-ZLL5类细菌素对李斯特菌、铜绿假单胞杆菌、粪链球菌具有活性,对4种肠道益生菌及自身无抗菌活性;抑菌活性动态监测表明其活性集中于6-18 h,在12 h达到最大值;分子量(Mr)小于1.43×104;具有较广的pH耐受范围(pH 3-9)和较强的耐热能力(50-90℃时活性极显著提高;121℃高压灭菌15 min仍保持32%活性);脂肪酶Ⅱ可极显著提高其活性(P<0.01),蛋白酶K、α胰凝乳蛋白酶Ⅶ、α胰凝乳蛋白酶Ⅱ使其活性消失(P<0.01).BRC-ZLL5类细菌素可望用于进一步开发,本研究为高效利用Bt发酵上清液提供了依据.
- 黄天培吴小凤潘洁茹蒋捷肖颖张灵玲关雄
- 关键词：细菌素苏云金芽胞杆菌抑菌谱理化特性
- 与水稻褐飞虱中肠刷状缘膜囊泡(BBMV)相结合的活性短肽筛选被引量：1
- 2013年
- 参照鳞翅目和双翅目昆虫中肠刷状缘膜囊泡(BBMV)的提取方法,成功提取了水稻褐飞虱中肠BBMV蛋白,利用噬菌体短肽文库展示技术,筛选到2个能够与水稻褐飞虱中肠BBMV结合的短肽P1Z和P2Z.以EGFP蛋白为标签通过Pull down和Western blot方法对短肽P1Z、P2Z与褐飞虱中肠BBMV的结合活性进行了验证.结果表明,利用噬菌体短肽文库展示技术,以褐飞虱中肠BBMV作为底物,经过3轮淘洗筛选到的短肽蛋白与褐飞虱中肠BBMV上的潜在受体具有较强的结合能力.通过对短肽结构域的分析发现,短肽结构α两亲区与β两亲区的分布情况是影响短肽与褐飞虱中肠BBMV结合的一个潜在因素.本研究成功筛选并验证了能够与褐飞虱中肠BBMV结合的短肽.
- 邵恩斯庄浩瀚关雄
- 关键词：水稻褐飞虱BBMV中肠短肽
- 褐飞虱中肠内膜结合短肽P2S的筛选
- 2013年
- 【目的】筛选与褐飞虱Nilaparvata lugens中肠内膜相结合的短肽,探索能阻断褐飞虱传播水稻病毒的新方法。【方法】通过改良的膜饲喂法和噬菌体短肽文库展示技术,模拟褐飞虱正常取食的行为,筛选能够与其中肠内膜结合的短肽。将筛选到的短肽与加强绿色荧光蛋白进行融合表达,经纯化后,将融合蛋白饲喂给褐飞虱若虫,通过荧光显微镜观察饲喂后若虫的中肠。【结果】使用改良的膜饲喂法,16h后褐飞虱若虫的取食率达到91%,24h后达到95%。经形态学验证,确定了一种短肽与褐飞虱中肠内膜具有结合活性,并将其命名为P2S。【结论】改良了针对褐飞虱的膜饲喂法,筛选并验证了能够与褐飞虱中肠内膜结合的活性短肽P2S。研究结果为阻断相关的水稻病毒与褐飞虱中肠内膜间的相互作用研究提供了科学依据,也为褐飞虱新型膜穿孔毒素蛋白的研究提供了理论基础。
- 邵恩斯林立金关雄
- 关键词：褐飞虱噬菌体展示技术中肠短肽
- 苏云金芽胞杆菌生物活性成分研究进展被引量：5
- 2013年
- 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是目前应用广泛且有效的一种微生物杀虫剂。人们已从苏云金芽胞杆菌中分离鉴定了许多的生物活性成分,包括杀虫晶体蛋白、营养期杀虫蛋白、几丁质酶、自身诱导物抑制蛋白、免疫因子A等。这些生物活性成分在不同程度上能直接或间接地促进了Bt的杀虫活性。本文就苏云金芽胞杆菌的一些生物活性成分进行了综述和展望。
- 洪钦阳肖水华邹情雅刘红关雄
- 关键词：苏云金芽胞杆菌生物活性成分基因蛋白质
- 高效还原铬的苏云金芽胞杆菌菌株筛选被引量：8
- 2010年
- 在1%接种量、初始铬(VI)浓度50 mg L-1、pH 7、30℃及180 r/min条件下,从源自水样、土壤、植物、动物粪便、食品、昆虫及饲料的76个苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)菌株中筛选出2株具有高效铬(VI)还原能力的菌株BRC-HZM7和BRC-XQ15,在24 h之内可使50 mg L-1铬(VI)低于0.5 mg L-1,达到我国铬(VI)废水排放标准.另有34株菌株最少只需36～72 h(36 h时6株菌株、48 h时4株菌株、60 h时13株菌株、72 h时11株菌株)就可使50 mg L-1铬(VI)达到我国铬(VI)废水排放标准.Bt具有对环境和人安全的优点,在快速净化含铬(VI)废水方面具有广阔的应用前景.
- 黄天培张巧铃潘洁茹苏新华肖颖赖小华郭杨菁杨晓伟康榕关雄
- 关键词：苏云金芽胞杆菌铬(VI)废水处理
- 苏云金芽胞杆菌cry基因研究进展
- 2012年
- 从cry基因的分类、鉴定、遗传特性以及应用概况等4个方面综述了苏云金芽胞杆菌cry基因的研究进展,并对cry基因的研究进行展望。
- 郑琦唐玉明关雄
- 关键词：苏云金芽胞杆菌CRY基因
