国家科技重大专项(2008zx10003011)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 相关作者：张建华陈凌郭盛郝春莉马辉更多>>
- 相关机构：复旦大学上海交通大学附属第六人民医院更多>>
- 发文基金：上海市青年科技启明星计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小鼠白细胞介素17A的原核表达及对RAW264.7细胞分泌炎症因子的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 在大肠杆菌中高效表达与纯化小鼠白细胞介素17A（mIL-17A）,并研究其对巨噬细胞分泌炎症因子的影响.方法 以活化的脾细胞为模板,通过RT-PCR法扩增小鼠IL-17a基因的编码序列,构建重组表达质粒pET28a/mIL-17a,并在大肠杆菌（E.coli）中诱导表达,经亲和层析获得纯化的mIL-17A蛋白.以mIL-17A蛋白刺激体外培养的鼠巨噬细胞RAW264.7,72 h后应用realtime PCR法分析IL-6、巨噬细胞炎症蛋白1（Ccl3）、巨噬细胞炎症蛋白2（Cxcl3）、β防御素2（defensinβ2）的mRNA表达量,并用ELISA法检测培养上清中Ccl3、Cxcl3、IFN-γ、IL-4及IL-6的蛋白质表达水平.结果 在E.coli中成功高效表达了有生物活性的IL-17A蛋白,可促进体外培养的RAW264.7细胞IL-6、Cxcl3、defensin β2 mRNA的表达,并能促进Ccl3、Cxcl3、IFN-γ、IL-4以及IL-6蛋白的表达.结论 成功表达并制备了具备生物学活性的mIL-17A,该蛋白具有刺激巨噬细胞表达趋化因子、防御素及细胞因子的能力.
- 郭盛范小勇郝春莉马辉陈凌张建华
- 关键词：巨噬细胞炎症蛋白抗感染免疫Β防御素
