国家自然科学基金(39970767)
- 作品数：11 被引量：56H指数：6
- 相关作者：聂青和程勇前周永兴邵彬张亚飞更多>>
- 相关机构：第四军医大学唐都医院第四军医大学更多>>
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- 人滋养层细胞内丙型肝炎病毒样颗粒的免疫电镜形态学研究被引量：6
- 2005年
- 目的:应用免疫电镜技术观察体外培养的人胎盘滋养层细胞感染丙型肝炎病毒(HCV)情况。方法:采用胰蛋白酶消化法及Percoll密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞,以HCVRNA阳性血清对滋养层细胞进行体外感染实验,胶体金免疫电镜检测滋养层细胞内的HCV病毒颗粒,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定性检测滋养层细胞内HCVRNA。结果:体外培养的人胎盘滋养层细胞内可观察到胶体金颗粒吸附的病毒样颗粒,形态及直径符合HCV特点。RT-PCR定性检测结果阳性,进一步证实所观察到的病毒样颗粒为HCV。结论:HCV可感染体外培养的人胎盘滋养层细胞。
- 张亚飞聂青和罗新栋黄晓峰邵彬苟艳子
- 关键词：滋养层细胞宫内感染免疫电镜
- 体外感染丙型肝炎病毒的滋养层细胞超微结构变化被引量：14
- 2003年
- 程勇前聂青和周永兴黄晓峰杨华光
- 关键词：体外感染丙型肝炎病毒滋养层细胞母婴传播超微结构
- Fc受体介导HCV跨膜研究系列报告:——丙型肝炎病毒感染孕妇羊水中HCVRNA定量检测及意义
- 2001年
- 聂青和王平忠程勇前周永兴
- 关键词：HCVRNA感染孕妇FC丙型肝炎病毒
- 丙型肝炎病毒持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨丙型肝炎病毒持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌的影响.方法:应用ELISA方法检测细胞培养上清MMP-2和MMP-9水平,分析感染组和对照组数据间的差异,并用明胶酶谱进一步验证ELISA结果,随后应用RT-PCR法分析感染对细胞proM-MP-2和proMMP-9mRNA表达的影响.结果:感染组细胞分泌MMP-2和MMP-9能力明显下降(MMP-2:t=4.186,P<0.05;MMP-9:t=2.325,P<0.05);RT-PCR结果显示感染组细胞proMMP-2和proMMP-9mRNA表达弱于对照组,但差异不明显(proMMP-2:t=1.196,P>0.05;proMMP-9:t=1.417,P>0.05).结论:丙型肝炎病毒持续感染时体外培养人胎盘合体滋养层细胞MMP-2和MMP-9合成分泌能力下降,为非特异性.
- 张亚飞聂青和邵彬罗新栋王平忠陈朝霞徐辉李军
- 关键词：合体滋养层细胞
- 丙型肝炎病毒感染孕妇羊水中丙型肝炎病毒RNA检测的临床意义被引量：15
- 2002年
- 目的 通过检测丙型肝炎病毒 (HCV)感染孕妇的羊水中HCVRNA ,探讨HCV母婴传播的途径及HCV基因型。方法 应用荧光定量聚合酶链反应 (PCR)和逆转录巢式PCR(RT nPCR)技术 ,检测孕妇血清和羊水中的HCVRNA。对 34例 (研究组 )血清HCVRNA阳性标本采用酶切分型法检测 ,依据限制性片段长度多态 (RFLP)图谱判断HCV基因型。另选 40例正常孕妇 (对照组 )的血清和羊水作为对照。结果 在研究组孕妇羊水中仅有 2例 (5 9% )检测出HCVRNA ,病毒滴度分别为 10 5、10 6拷贝 /ml;对照组孕妇血清和羊水标本中均未检测出HCVRNA。研究组孕妇血清中HCVRNA阳性标本HCV基因分型为 :Ⅱ型 2 7例 (79 4% ) ,Ⅲ型 5例 (14 7% ) ,Ⅱ /Ⅲ混合型 2例 (5 9% )。结论 HCV感染孕妇的羊水中HCVRNA阳性率极低 ,提示羊水不是HCV母婴传播的主要途径。
- 聂青和王平忠周永兴
- 关键词：丙型肝炎羊水HCV
- 丙型肝炎病毒持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞生物学性状的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)持续感染对体外培养人胎盘合体滋养层细胞生物学性状的影响。方法:分别采用M atrigel人工重建基膜侵袭实验、MTT法细胞黏附实验、细胞移动实验,研究HCV RNA阳性患者血清感染体外培养的人胎盘滋养层细胞侵袭力以及与侵袭力相关的黏附、移动能力的改变;检测培养上清中人绒毛膜促性腺激素(HCG)浓度以评估感染对细胞激素合成、分泌功能的影响。结果:感染组细胞侵袭、黏附、移动以及激素合成分泌功能较对照组均有显著下降(P<0.05)。结论:HCV持续感染可抑制体外培养人胎盘合体滋养层细胞包括侵袭力和激素合成、分泌功能在内的多种生物学功能。
- 张亚飞聂青和邵彬赵甫涛王春雨李军徐辉
- 关键词：丙型肝炎病毒合体滋养层细胞生物学性状
- 人胎盘滋养层细胞的分离培养及IgG FcγRⅢ在滋养层细胞的表达被引量：37
- 2002年
- 目的 :体外分离培养人胎盘滋养层细胞 ,观察其生物学特性 ,研究IgGFcγRⅢ (CD16)在人胎盘组织中的定位及体外培养的滋养层细胞是否存在CD16,从而为HCV母婴传播机制的研究提供细胞学实验基础。 方法 :采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织 ,以 3 5 %、4 5 %两个Percoll密度梯度进行分离纯化。用ABC免疫组化染色法对足月分娩后的胎盘组织石蜡包埋切片及体外分离培养的胎盘滋养层细胞进行染色。 结果 :胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性 ,血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性 ,经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者(滋养层细胞 )占 90 %以上 ,胎盘组织切片的滋养层细胞及体外分离培养的滋养层细胞抗CD16染色阳性 ,阳性信号定位于胞质 ,未见胞核着色。 结论 :改进后的分离方法可以得到较高纯度的滋养层细胞 ,胎盘组织的滋养层细胞和体外分离培养的滋养层细胞均有CD16表达。
- 程勇前聂青和周永兴杜德伟杨华光
- 关键词：滋养层细胞FC受体体外实验
- 体外培养人胎盘滋养层细胞内吞丙型肝炎病毒过程的电镜观察被引量：8
- 2005年
- 目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染体外分离培养人胎盘滋养层细胞的可能机制,观察 HCV 感染滋养层细胞后在细胞内的具体定位。方法采用胰蛋白酶消化法及 Percoll 密度梯度分离法分离培养人胎盘组织中滋养层细胞后,以 HCV RNA 阳性血清对滋养层细胞进行体外感染实验,不同时间终止实验.制备电镜标本,透射电镜观察。结果 HCV 感染滋养层细胞的过程中有吞噬小泡形成,形态学上符合被覆小凹的特点;感染后 HCV 病毒样颗粒多定位于粗面内质网附近。结论 HCV 可以感染滋养层细胞.其感染过程可能是被覆小凹介导的内吞过程。本研究提供了 HCV体外感染人胎盘滋养层细胞具体方式的形态学资料,对 HCV 宫内传播机制的进一步研究奠定了实验基础。
- 聂青和张亚飞罗新栋黄晓峰程勇前邵彬
- 关键词：滋养层肝炎病毒
- Fc受体介导HCV跨膜研究系列报告:——丙型肝炎病毒定量及与基因型的关系
- 2001年
- 王平忠聂青和周永兴白雪帆程勇前
- 关键词：基因型HCV受体介导FC
- 人胎盘滋养层细胞的分离培养及HCV体外感染试验被引量：21
- 2002年
- 目的 体外分离培养较高纯度的胎盘滋养层细胞 ,观察其生物学特性 ,探讨丙型肝炎病毒 (HCV)经胎盘母婴传播的具体途径 .方法 采用胰蛋白酶消化法消化人足月胎盘组织 ,以 35 % ,4 5 %两个 Percoll密度梯度进行分离纯化 .并用免疫组化及透射电镜等技术对其生物学特性进行观察 .HCV阳性血清感染体外分离培养的胎盘滋养层细胞 ,通过逆转录聚合酶链反应及扩增敏感试验对培养上清进行定性、定量检测 ,以观察 HCV的感染及复制情况 .结果 胎盘组织中滋养层细胞角蛋白染色阳性 ,血管内皮细胞及基质成分波形蛋白染色阳性 ,经该法分离纯化的细胞角蛋白染色阳性者 (滋养层细胞 )占 90 %以上 ,电镜下滋养层细胞可观察到成熟型、中间型、未成熟型三种形态 .HCV感染细胞培养 16 d内培养上清中可间断检测出 HCV RNA.结论 改进后的分离方法可以得到较高纯度的滋养层细胞 ,HCV感染胎盘滋养层细胞可能是 HCV宫内母婴传播的途径之一 .
- 程勇前聂青和周永兴杨华光李谨革
- 关键词：滋养层细胞细胞培养丙型肝炎病毒母婴传播
