国家质检总局科技计划项目(ZK200512)
- 作品数：4 被引量：24H指数：3
- 相关作者：吴姗梁月荣吴蓉更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院东京农工大学浙江大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 普通PCR法、荧光定量PCR法及微流控芯片法检测大豆产品中外源基因灵敏度的比较被引量：10
- 2009年
- 目的:为提高食品中转基因成分检测的灵敏度,将微流控芯片仪应用到转基因检测中。方法:将微流控芯片法与普通PCR法、荧光定量PCR法进行灵敏度比较;检测高温、高压处理过的转基因大豆粉。结果:荧光定量PCR法的灵敏度明显高于普通PCR法,但在较极端高温、高压处理(高压灭菌121℃/30 min)及转基因成分含量较低(1%)的情况下,采用荧光定量PCR法未能检测到外源基因,而微流控芯片法能检测到相应的峰值,前提是在未添加内标(Marker)的情况下。若添加内标,在内标峰和目的峰区分开的条件下,有损检测灵敏度。结论:微流控芯片在转基因检测中具有高效率、高灵敏度的特点,但该方法有待完善。
- 吴姗吴志毅张晓峰黎昊雁
- 关键词：转基因检测荧光定量PCR微流控芯片
- 大豆深加工产品中外源基因检测灵敏度的研究被引量：1
- 2008年
- 为了提高大豆深加工食品中外源基因的检测灵敏度,改良了普通PCR反应的引物,并设计了NEST-PCR反应程序。模拟食品加工中高温、高压等处理方法,将转基因大豆研磨成粉状,在高压灭菌锅内进行高温、高压处理。应用新设计的引物35SCP142、CPNOS165进行外源基因检测,通过对引物的调整,检测灵敏度得到了明显的提高,可以检测到的转基因大豆含量仅为1%,且为经过121℃/30min处理的样品中的外源基因。应用NEST-PCR的高灵敏度的特性,设计了NEST-PCR的两对引物35SCP318和35SCP114,并检测到外源基因的片段。将普通PCR的检测灵敏度和荧光定量PCR的灵敏度作比较,若引物设计合理,且PCR条件适合,普通PCR的检测灵敏度可以和荧光定量PCR的相媲美。
- 吴姗吴蓉林晓佳吴志毅
- 关键词：转基因检测荧光定量PCR
- 一组柑橘嫁接嵌合体及其嫁接亲本的形态学、遗传学研究被引量：6
- 2007年
- 对一组柑橘周缘嵌合体(Ekuliku)及其嫁接亲本(Nankan和Hamlin)的叶片和果实进行了形态学、生理学及遗传学分析。一般柑橘嵌合体的不同部位由不同亲本特定的组织层发育而来。实验结果表明,嵌合体果实的特性并不与其同层亲本的特性完全一致,嵌合体叶片横截面的结构也与亲本存在较大差异,说明在细胞层间存在着一定的相互作用。用127种随机引物和1对STS特异性引物对嵌合体和嫁接亲本作遗传学分析,其中8种引物能得到特异性条带,即只在嵌合体和其中的1个亲本中检测到;并且这8个引物都有很高的重现性。随即,对这些特异性条带作了克隆、测序和同源性比较分析。
- 吴姗黎昊雁梁月荣平田丰
- 关键词：遗传学分析形态分析
- 大豆、油菜籽及大豆油中外源基因检测的灵敏度、准确度研究被引量：7
- 2008年
- 本研究针对转基因产品中转入的目的基因以及启动子、终止子,设计了相应引物35SCP142、CPNOS165。通过对引物的调整,使PCR扩增产物的大小控制在100～170bp,从而提高了检测灵敏度。在25μl的PCR反应体系中,可以检测到0.01ng的外源DNA。为了检测以大豆为原料的油脂类产品中的外源基因,我们又设计了NEST-PCR的两对引物35SCP318和35SCP114,并检测到了外源基因的片断。对新设计的引物进行准确度分析,即在不同的样品(包括转基因或非转基因产品)中进行检测,并经测序验证,新设计的引物35SCP142,CPNOS165及NEST-PCR的引物都有高特异性,可用于含有相应外源基因的产品检测。
- 吴姗鲍晓霞张晓峰黎昊雁董强
- 关键词：转基因检测灵敏度引物
