卫生部卫生公益性行业科研专项(361200802003)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李柏峰张佳林程颖刘永锋王本刚更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰技术抑制诱导型一氧化氮合酶基因表达对大鼠胰岛细胞凋亡和功能的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）基因在大鼠胰岛细胞培养过程中对胰岛细胞凋亡和胰岛素分泌的影响及其机制。方法从30只Wistar大鼠获得胰岛，随机分为5组。大鼠胰岛体外培养中，使用针对iNOS的siRNA转染胰岛。根据RNA干扰（RNAi）条件以及培养液中是否加入细胞因子TNF-α和IL-1β将胰岛分为5组：空白对照组、细胞因子组、阴性对照组、RNAi组以及RNAi＋细胞因子组。通过RT—PCR和Western blot检测RNAi效果，RT-PCR和TUNNEL法检测胰岛凋亡情况，胰岛素释放实验检测胰岛功能。结果每只大鼠可获得500～600IEQ胰岛。RNAi可以沉默大鼠胰岛组织iNOS基因，抑制iNOS生成。胰岛经细胞因子IL—1β和TNF—β．处理后，促凋亡基因Bax和Fas表达明显升高，胰岛素释放减少。经RNAi抑制iNOS基因后，胰岛与细胞因子IL-1β和TNF—α共同培养时，促凋亡基因表达明显下降，凋亡细胞减少，胰岛素释放增加。结论RNAi技术抑制胰岛iNOS基因表达后，可减少胰岛细胞凋亡，改善胰岛的存活和功能。
- 李柏峰刘永锋程颖张佳林王本刚
- 关键词：胰岛移植细胞凋亡一氧化氮合酶RNA干扰
- 诱导型一氧化氮合酶对大鼠胰岛细胞凋亡的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨细胞因子和诱导型一氧化氮合酶(iN-OS)对体外培养的大鼠胰岛细胞凋亡和功能的影响及其机制。方法:大鼠胰岛细胞体外培养,随机分组,培养液中分别加入细胞因子IL-1β、TNF-α和/或iNOS抑制剂氨基胍,分为空白对照组、细胞因子组、氨基胍组、氨基胍+细胞因子组。检测指标包括:培养液NO水平和组织iNOS、结构型NOS活性,RT-PCR检测胰岛组织中iNOS基因和凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达情况,AO/EB染色检测胰岛存活,胰岛素释放实验检测胰岛功能。结果:与细胞因子IL-1β和TNF-α共同培养后,大鼠胰岛组织中iNOS的表达增强,活性显著提高(38.93±4.72)U/mL,NO水平上升(313.0±35.4)mol/L,而结构型NOS没有变化;同时胰岛促凋亡基因表达上调,抗凋亡基因表达下降,细胞的存活率下降,胰岛素分泌大大减少。加入氨基胍后,随着胰岛组织中iNOS的活性明显受到抑制,胰岛的凋亡程度减轻,存活和胰岛素分泌情况都明显改善。结论:iNOS在细胞因子诱导的胰岛细胞凋亡中起到十分关键的作用,而氨基胍通过抑制iNOS活性,减轻了细胞因子的损害,降低了胰岛凋亡水平,改善胰岛的存活与功能。
- 李柏峰刘永锋程颖张佳林
- 关键词：胰岛移植凋亡诱导型一氧化氮合酶氨基胍
