国家自然科学基金(20775089) 作品数:22 被引量:109 H指数:7 相关作者: 王荣 贾正平 谢华 马骏 辛晓婷 更多>> 相关机构: 兰州军区兰州总医院 兰州大学 西北师范大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 甘肃省自然科学基金 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 生物学 理学 医药卫生 更多>>
高效毛细管电泳用于以聚环氧乙烷为筛分介质分离DNA的机理研究 被引量:4 2010年 用毛细管电泳以聚环氧乙烷(PEO)为筛分介质对pUC19DNA/Msp Ⅰ(HpaⅡ)Marker中的12条DNA片段进行了分离,并尝试用Ogston模型、爬行模型以及线性模型对分离机理进行研究,最终发现26~147bp的小片段,在低电场强度时能很好地符合Ogston模型理论,而190~501bp中等长度的DNA片段电泳迁移率与其尺寸间存在很好的负相关的线性关系,为此,提出一种新的线性模型来进行解释.此外,还探讨了PEO的浓度和电场强度对分离的影响.其结论可更好地从理论上指导对中小片段DNA的分离,对肿瘤基因突变点的分析和PCR扩增产物的分离分析具有重要的意义. 王荣 贾正平 董亚蕾 陈兴国 谢华 马骏 辛晓婷 李文斌 王娟 张强 张军莉关键词:高效毛细管电泳 无胶筛分 DNA分子 聚环氧乙烷 毛细管电泳和聚丙烯酰胺电泳法检测肺癌组织p53基因突变效果分析 被引量:1 2008年 目的筛选检测肺癌组织p53基因突变的优良方法,为临床早期诊断肺癌提供依据。方法分别运用毛细管电泳(CE)与聚丙烯酰胺电泳(PAGE)—限制性片段长度多态性(RFLP)两种方法对38例肺癌及癌旁正常组织p53基因第249位密码子点突变进行检测。结果RFLP-CE可检测到p53基因第249位密码子的野生型26 bp片段,用时<20 m in;RFLP-CE和RFLP-PAGE均能检测到基因突变,对29例非小细胞肺癌组织p53基因第249位密码子检测的突变率分别为31.03%(9/29)、20.69%(6/29),P<0.05。结论RFLP-CE可为大规模进行肺癌的早期诊断提供简便可靠的方法。 辛晓婷 王荣 高岚 贾正平 刘圆圆 刘勇关键词:毛细管电泳 限制性片段长度多态性 P53基因 点突变 非小细胞肺癌中EGFR基因突变及靶向药物治疗研究进展 被引量:31 2013年 报道在非小细胞肺癌(NSCLC)中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变与非小细胞肺癌发生的相关性,尤其在东方人群、女性、非吸烟者、腺癌的患者中突变率更高的现状。分别对EGFR基因突变与临床病理特征的关系、相关靶向药物治疗、检测方法等方面进展进行了综述,EGFR基因突变检测将会成为今后研究EGFR靶向药物治疗的热点。 王荣 石冬琴 谢华 李文斌 田薇 贾正平关键词:非小细胞肺癌 表皮生长因子 受体 基因突变 靶向治疗 影响毛细管电泳分离生物大分子的因素 被引量:2 2009年 目前毛细管电泳在分离方面的应用越来越广泛,但重复性一直是制约其应用的主要问题。随着毛细管电泳技术的发展,影响毛细管电泳结果的因素也发生着变化。本文对影响毛细管电泳分离生物大分子的因素进行综述,希望对使用毛细管电泳的使用者者有所帮助。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华关键词:毛细管电泳 影响因素 毛细管电泳法检测癌基因C-myc胃癌中基因点突变 被引量:4 2011年 癌基因C-myc激活和突变在胃癌形成过程中起着重要作用。通过毛细管电泳(CE)方法检测50例胃癌患者中C-myc基因突变,建立一种准确、快速诊断早期胃癌的方法。本实验采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中C-myc基因第二外显子易发突变的部位基因序列,扩增样品分别经96℃变性和EcoRⅤ酶切处理,以PAGE-SSCP,CE-SSCP,CE-RFLP分别对其突变情况进行检测。优化的CE检测条件:筛分介质PEO浓度3.0%,pH 8.2,电压15 kV,温度15℃;荧光检测:λex=488 nm,λem=520 nm。检测结果:C-myc基因总突变率为20.0%(10/50)。测序分析结果显示C-myc基因第二外显子第53密码子存在点突变,碱基A变为碱基T(GAT→GTT),碱基的改变使氨基酸由亮氨酸替代为谷氨酰胺。本研究数据证实C-myc基因突变与胃癌的形成紧密相关,CE检测C-myc突变基因可作为胃癌早期诊断的简便可靠的方法。 谢希晖 王荣 贾正平 谢华 张爱梅 徐娟 王晓莉 王先华关键词:胃癌 突变 毛细管电泳 单链构象多态性 限制性片段长度多态性 毛细管电色谱法在生物大分子中的应用 2008年 辛晓婷 王荣关键词:毛细管电色谱柱 生物大分子 含有金纳米粒子的筛分介质对不同长度DNA片段的毛细管电泳分离 被引量:1 2009年 探讨了含有金纳米粒子(GNPs)的筛分介质在毛细管电泳(CE)中对不同长度DNA片段的分离。以聚环氧乙烷(PEO)-金纳米粒子(GNPs)-TBE为CE筛分介质,用涂层的毛细管柱(37 cm×75μm,有效长度27 cm)分离DNAMarker D和1 kbp DNALadder Marker标准DNA片段,考察了CE过程中各参数(如筛分介质质量浓度、分离电压、温度和筛分介质pH值)对不同长度DNA片段分离的影响。对比了新型筛分介质与不含GNPs的PEO-TBE筛分介质的分离效果,并将新型筛分介质用于实际样品的检测。结果表明,在筛分介质中添加GNPs后能够改进CE的分离效果,且分离时间短。方法较适于分离较宽范围的DNA片段。 刘勇 刘勇 王荣 高岚 贾正平 辛晓婷 谢华关键词:毛细管电泳 金纳米粒子 DNA片段 限进填料及其在生物样品分析中的应用 1前言进行复杂生物基质混合体系样品(如血清、血浆、尿液等)分析时,由于样品基质复杂、被测物浓度低,在进行分析前必须对样品进行前处理,使得待测物得以分离和纯化。样品的前处理直接影响分析结果的准确度和精密度,是整个生物样品分... 贾正平 杨沛 王荣 马骏 谢华 郭志强文献传递 毛细管电泳-单链构象多态分析检测胃癌中p16基因突变 被引量:1 2011年 目的:建立快速高效检测胃癌患者胃癌组织及癌旁正常组织中p16基因突变的方法。方法:采用PCR扩增p16基因第二外显子易发生突变片段,扩增样品纯化后经95℃变性;以毛细管电泳(CE)分析法结合单链构象多态性(SSCP)对60例胃癌患者p16基因突变情况进行分析。结果:分析结果表明只有3例低分化腺癌患者存在基因突变,测序表明p16基因第二外显子碱基序列AGAC发生碱基A丢失。结论:p16基因突变可能导致胃癌的发生,但不起主导作用;CE-SSCP分析方法具有快速、灵敏、准确的特点,可用于胃癌组织中p16基因的突变分析。 谢希晖 王荣 贾正平 谢华 张爱梅关键词:P16基因 基因突变 毛细管电泳 单链构象多态性 胃癌 毛细管电泳快速检测结直肠癌组织hMLH1基因第12外显子的突变 目的建立一种以毛细管电泳-激光诱导荧光(CE-LIF)技术结合单链构象多态性(SSCP)快速检测结直肠癌组织hMLH1基因第12外显子基因突变的方法。方法将hMLH1基因第12外显子易发生突变片段进行PCR扩增,扩增产物... 石冬琴 向大伟 王荣 谢华 田薇 贾正平 谢希晖关键词:毛细管电泳 单链构象多态性 结直肠癌组织 HMLH1 文献传递