广东省科技计划工业攻关项目(2002C30303)
- 作品数：5 被引量：48H指数：4
- 相关作者：周祥福温机灵高新张涛黄文涛更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院同济大学附属东方医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 抑癌基因RUNX3在膀胱癌T24细胞株中的表达以及对凋亡的影响被引量：4
- 2008年
- 目的明确RUNX3抑癌基因在正常膀胱组织和膀胱癌T24细胞株的甲基化状态,并将野生型RUNX3基因转染T24细胞,探讨RUNX3基因恢复表达后对膀胱癌细胞凋亡的影响。方法应用RT-PCR、甲基化特异性PCR和非甲基化PCR检测正常膀胱组织、膀胱癌T24细胞中RUNX3基因的表达以及基因启动子区域CpG岛的甲基化状态。构建真核载体的RUNX3-EGFP-pDest质粒,在LipefectamineTM 2000介导下转染膀胱癌T24细胞,转染实验设立3组:空白对照组、空质粒EGFP-pDest转染组以及RUNX3-EGFP-pDest转染组。Western blot检测RUNX3蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果正常膀胱组织RT-PCR可检测出1248bp的RUNX3基因条带,而膀胱癌T24细胞中无法检测出RUNX3基因的表达。正常膀胱组织RUNX3基因甲基化PCR检测阴性,非甲基化PCR阳性;T24细胞反之。正常膀胱粘膜组和RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组Western blot检测,均表达RUNX3蛋白,而膀胱癌T24细胞未表达RUNX3蛋白。流式细胞仪检测,空白对照组的凋亡率为(3.1±0.46)%,而EGFP-pDest转染组和RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组的凋亡率分别为(10.1±1.62)%、(41.20±1.53)%,应用方差分析的LSD法和SNK法进行均数的多重两两比较,RUNX3-EGFP-pDest质粒转染组与EGFP-pDest转染组、空白对照组凋亡率之间的差异均具有显著性,P<0.01。结论正常膀胱组织RUNX3基因正常表达,未发生启动子区域CpG岛甲基化,而膀胱癌T24细胞可能因RUNX3基因启动子区域CpG岛发生甲基化,致RUNX3基因无法表达。转染野生型RUNX3抑癌基因后促进了膀胱癌T24细胞的凋亡。
- 温机灵周祥福温机智周琦王林
- 关键词：膀胱肿瘤抑癌基因T24细胞甲基化
- 膀胱癌术前活检分级低估现象分析被引量：18
- 2006年
- 目的探讨膀胱癌术前膀胱镜活检低估病理分级现象的可能原因,为治疗方案选择提供更可靠的依据。方法采用WHO/ISUP 1998病理分级标准,对82例术前膀胱镜活检诊断为膀胱癌、术后病理检查资料完整的患者分级情况进行对比分析。结果82例术前活检标本病理分级为G_1 35例、G_2 28例、G_3 19例,术后标本为G_1 22例、G_2 32例、G_3 28例。活检标本与术后标本病理分级一致54例(65．8%),活检低分级24例(29．3%),高分级4例(4．9%)。低估原因可能与活检钳取部位、组织量以及病理判断上的保守等相关。结论膀胱癌术前活检病理分级较术后低估比例达29．3%,在决定膀胱癌治疗方案时,应充分重视膀胱镜活检存在病理分级低估现象。
- 温机灵周祥福高新黄文涛张涛蔡育彬邱剑光苏祖兰
- 关键词：病理分级
- 经尿道电切术加膀胱灌注治疗表浅膀胱癌被引量：9
- 2008年
- 目的评价经尿道电切术加膀胱灌注治疗表浅膀胱癌的疗效，探讨减少术后肿瘤复发的方法。方法41例患者手术前1～2h应用丝裂霉素C40mg＋注射用水40ml进行膀胱灌注化疗。经尿道电切术后立即用丝裂霉素C40mg＋注射用水40ml行灌注化疗1—2h。全部患者术后定期行膀胱灌注化疗，方案为：鸳裂霉素C或吡柔比星40mg，1次／周，共8次，再改为每个月1次，持续1年。结果本组41例均顺利完成手术，术中术后未出现膀胱穿孔、尿路感染、膀胱破裂等并发症。膀胱灌注化疗后未出现发热、白细胞下降等不良反应。所有患者均获得随访，随访时间5～94个月，平均14．6个月，复发8例，复发率为19．5％。结论经尿道膀胱肿瘤电切术加膀胱灌注化疗是治疗表浅膀胱癌的理想方法。
- 张涛周祥福王林周琦高新
- 关键词：膀胱肿瘤经尿道电切术复发率
- p53、p21、Ki-67和VEGF与膀胱癌分级、分期以及预后的关系被引量：16
- 2007年
- 目的:探讨p53、p21、Ki-67和VEGF的表达与膀胱癌的病理分级、分期以及预后是否相关。方法:应用免疫组织化学染色的方法,对40例手术证实的膀胱移行细胞癌患者的病理切片进行p53、p21、Ki-67和VEGF的化学染色。将免疫组化结果与病理分级、分期以及预后情况进行分析。结果:在40个肿瘤标本中,p53、p21、Ki-67和VEGF的表达有改变的分别有31个(77.5%),22个(55.0%),16个(40.0%),17个(42.5%);其中至少1个标记物表达异常35例(87.5%),而4个标记物均表达异常者有7例(17.5%)。患者平均随访51个月。除了Ki-67、VEGF与病理分级以及Ki-67与分期之间无统计学意义外,4个标记物多少都与膀胱癌的病理分级、分期相关。p53(+)/p21(-)以及4个标记物同时异常是与疾病相关死亡率有关的独立因素(P<0.05,P<0.01)。而Ki-67、VEGF均不是膀胱癌相关死亡率的独立因素(P>0.05)。越多标记物表达异常,则膀胱癌的死亡率增加。结论:p53、p21、Ki-67和VEGF多少都与膀胱癌的病理分级、分期相关。联合检测p53、p21、Ki-67和VEGF可以更加准确地预测膀胱癌的预后。
- 温机灵周祥福冯智英黄文涛张涛蔡育彬高新
- 关键词：膀胱肿瘤预后
- RUNX3抑癌基因真核表达载体的构建以及在膀胱癌T24细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 【目的】构建真核表达载体pIRES2-EGFP-RUNX3,并在膀胱癌T24细胞株中表达。【方法】RT-PCR从人正常膀胱组织中获取RUNX3基因并测序,将RUNX3基因克隆进pIRES2-EGFP载体,构建真核表达载体pIRES2-EGFP-RUNX3,并进行EcoRⅠ和XhoⅠ酶切验证。脂质体介导下转染人膀胱癌T24细胞,荧光显微镜检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达。【结果】成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-RUNX3,用脂质体转染人膀胱癌T24细胞后,在荧光显微镜下观察到带绿色荧光的人膀胱癌T24细胞。【结论】成功构建RUNX3基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-RUNX3并在膀胱癌T24细胞中表达,为进一步研究RUNX3与膀胱癌的关系奠定基础。
- 温机灵周祥福温机智
- 关键词：RUNX3基因T24细胞
