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GA2ox8基因过量表达诱导蓝光下拟南芥光形态建成被引量：8: 2008年; 检测不同光照强度蓝光下,过量表达GA2ox8基因的转基因植株光形态建成表型的结果表明,突变体比各自的母本的下胚轴短,茎尖角度和子叶张开度较大,花青素和叶绿素的含量较高,并且其差异与GA2ox8基因的表达量呈正相关。RT-PCR检测光调节基因表达水平的结果显示,暗培养条件下其突变体幼苗中的水平比各自的母本高,蓝光下35S::GFP- GA2ox8-1、35S::GFP-GA2ox8-8与母本col-4之间差异不明显,但scc7-D中的水平比母本crylcry2高。这似乎说明,GA2ox8基因过量表达可诱导蓝光下拟南芥幼苗光形态建成。; 李妍赵小英郭明李旭黄绿红唐冬英郭新红刘选明; 关键词：蓝光拟南芥光形态建成

拟南芥CIPK1基因的功能初步分析被引量：9: 2007年; 以模式植物拟南芥为材料,采用RT-PCR分析、基因克隆、转化等方法对CIPK1基因功能进行了研究.结果发现,CIPK1(CBL-interacting protein kinase 1)基因在拟南芥茎和花中表达量最高,在叶中表达量最低;ABA能迅速诱导CIPK1基因的表达,GA则抑制该基因的表达,但2,4-D和6-BA对该基因的表达无明显影响;通过对CIPK1基因转基因突变体进行ABA处理,发现转基因拟南芥种子的萌发率明显高于野生型.以上结果表明CIPK1基因的表达具有组织特异性,并且该基因参与ABA和GA信号传导,尤其在ABA促进种子休眠的信号传导途径中具有非常重要的作用.; 刘实赵小英唐冬英郭新红刘选明; 关键词：拟南芥基因表达 RT-PCR 种子萌发

钙传感蛋白互作激酶CIPK14参与拟南芥盐和ABA胁迫应答调节被引量：5: 2008年; 钙和蛋白激酶在植物胁迫应答过程中起重要作用.本研究以拟南芥蛋白激酶CIPK14的T-DNA插入突变体为材料,系统研究了CIPK14基因在不同组织与生长发育期的表达情况,和CIPK14基因的钙调节属性及其在胁迫应答过程中的作用.研究发现CIPK14基因在拟南芥根、茎、叶、花各组织器官中都有所表达,其中花器官和根部表达量较为显著;不同阶段比较发现CIPK14在幼苗期具有较高的转录水平.研究同时发现,ABA和盐胁迫能激活CIPK14基因的转录;CIPK14T-DNA插入突变体中一系列胁迫应答基因的转录水平全都不同程度地降低或表达滞后,说明CIPK14基因在胁迫应答中起作用.另外,CIPK14突变体的种子萌发和根伸长对各种渗透胁迫敏感,并且ABA合成抑制剂哒草伏(Norflurazon)能部分恢复突变体对ABA,盐等的敏感表型.进一步证明CIPK14是胁迫应答相关基因.研究还发现,CIPK14的转录受到极端浓度下外源钙离子的激活,另外在一定胁迫条件下,突变体中RD29A基因的表达对外源钙离子浓度变化不敏感,说明CIPK14基因功能缺失降低了受钙调节的胁迫相关基因对外源钙的敏感性.相应的表型分析发现,突变体种子萌发和根伸长与野生型相比对外源钙敏感性下降,进一步证明CIPK14基因接受钙信号调节,并作用于拟南芥ABA和盐胁迫应答信号途径,激活胁迫相关转录因子.; 秦玉芝李旭郭明邓克勤林建中唐冬英郭新红刘选明; 关键词：钙胁迫应答种子萌发

拟南芥AKIN11基因的过表达及其功能分析: 2007年; 将蔗糖非发酵基因相关蛋白激酶AKIN11克隆到植物表达载体pEGAD的35S启动子下游与GFP融合,基因枪法导入洋葱表皮细胞进行瞬时表达,发现集中在细胞核内表达.农杆菌介导花序浸泡法转化拟南芥,Basta筛选和RT-PCR鉴定得到两个遗传稳定的T3代转基因株系.突变体和野生型的表型没有明显差异,但突变体叶片中淀粉含量较野生型增加.RT-PCR分析淀粉合成途径关键酶的mRNA水平,发现突变体中腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶表达量增加,而α-淀粉酶却没有变化.表明AKIN11基因可能在拟南芥淀粉积累途径中起着重要的调节作用.; 马毅唐冬英赵小英秦玉芝郭新红刘选明; 关键词：拟南芥腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶 Α-淀粉酶

拟南芥蛋白质组研究中双向电泳技术条件的优化被引量：9: 2008年; 双向电泳技术是蛋白质组学研究中的关键技术,是目前分辨率最高的工具之一。而提高双向电泳图蛋白质点的数目和分辨率,可以提高蛋白质组技术平台的信息完整性。通过对拟南芥双向电泳技术过程中的适当改进,如蛋白质的提取与溶解方法、上样量和聚丙烯酰胺凝胶浓度,加入硫脲,硫代硫酸钠等,对拟南芥双向电泳技术进行了优化,提高了双向电泳图谱的蛋白质点数目与分辨率。; 罗泽宇杨粤军刘选明; 关键词：双向电泳硫脲硫代硫酸钠固相PH梯度

拟南芥磷酸酶基因亚细胞定位与组织表达被引量：9: 2009年; 通过克隆拟南芥磷酸酶PP2C家族基因At3g51370,构建了绿色荧光蛋白融合表达载体,用基因枪将构建好的载体轰击洋葱表皮细胞进行瞬时表达分析,发现该At3g51370基因表达蛋白定位在细胞核中;用实时定量PCR方法分析At3g51370基因的组织表达特性,发现该基因在花器官中的表达量明显高于其它组织.进一步构建了含At3g51370基因的启动子和GUS报告基因的植物表达载体,经农杆菌介导转化拟南芥,对转基因拟南芥进行GUS组织化学染色,分析该启动子在不同生长时期与不同组织中的转录活性,结果发现,在幼苗期At3g51370基因主要集中在根尖分生组织和顶端分生组织表达,在成年植株中则集中在生殖器官如花和果荚柄等部位表达,在光照和黑暗条件下,At3g51370基因的表达特性没有明显差异.研究表明,At3g51370可能与其它核定位的PP2C磷酸酶一样参与了基因表达的调控,可能在拟南芥早期发育阶段的细胞增值分裂相关信号转导途径中发挥功能,并在花器官的发育过程中行使功能,且不参与光信号转导.; 邓克勤郭新红汪启明刘选明; 关键词：拟南芥磷酸酶亚细胞定位启动子

拟南芥钙依赖蛋白激酶参与植物激素信号转导(英文)被引量：3: 2007年; 在植物信号通路中,涉及到钙应答的蛋白激酶大多是钙依赖蛋白激酶。钙依赖蛋白激酶作为钙信号转导因子,参与了包括激素信号转导途径在内的很多传递过程。本工作在前人研究的基础上,对拟南芥AtCPK30基因的功能进行了深入的研究。RT-PCR分析结果表明:AtCPK30在植物根中的表达量很高,其在幼苗中的转录水平分别受ABA、IAA、2,4-D、GA_3和6-BA等激素的诱导调节。AtCPK30基因过表达的转基因株系幼苗的主根比野生型的长,同时发现转基因植株幼苗的根在缺钙的MS培养基上生长较野生型植株长,表明缺钙对转基因幼苗影响较小。用ABA、IAA、GA_3和BA处理时,转基因植株幼苗的根对激素更敏感。当野生型和转基因植株生长在含有生长素抑制剂NPA的MS培养基上时,NPA对转基因植株侧根的抑制比对野生型弱。GFP-CPK30融合蛋白的亚细胞定位研究结果表明:CPK30蛋白定位在细胞壁和细胞膜上。这些研究结果说明了AtCPK30作为钙信号转导因子,参与了多种激素调节植物根生长的过程。; 袁昕邓克勤赵小英伍贤进秦玉芝唐冬英刘选明; 关键词：拟南芥蛋白激酶激素

蓝光对拟南芥种子萌发的影响: 2008年; 通过检测分析不同蓝光条件下,拟南芥野生型和蓝光受体突变体的种子萌发率发现,蓝光诱导拟南芥种子萌发,隐花素主要介导蓝光诱导拟南芥种子的早期(蓝光培养1～3 d)萌发,并且与光照强度有关。施用GA生物合成抑制剂多效唑或嘧啶醇的研究结果表明,相同浓度的抑制剂对cry1cry2突变体种子萌发的抑制作用比野生型强,并且解除抑制剂对cry1cry2突变体种子萌发所需的外源有生物活性的GA_3量也较野生型多。这些实验结果初步证实了隐花素介导蓝光诱导种子萌发,并且可能与蓝光下种子萌发过程中有生物活性的GA合成增加有关。; 赵小英唐冬英向静曾建新刘选明; 关键词：蓝光拟南芥种子萌发赤霉素

利用蛋白质组学技术研究拟南芥隐色素突变体cry1的差异表达蛋白被引量：1: 2007年; 隐色素是一类蓝光受体蛋白,在动植物中调节各种光反应.在拟南芥中隐色素是核蛋白,通过蓝光调节控制下胚轴的伸长,子叶的延展,光周期诱导开花以及生物钟.拟南芥隐色1(CRY1)是一种蓝光受体,主要调节下胚轴的伸长,但CRY1下游的光化学反应仍然不清楚.拟南芥隐色素突变体cry1-304和野生型col-4在蓝光条件下,经过7 d的生长,cry1-304的下胚轴的长度比野生型col-4的下胚轴长.为了弄清楚拟南芥蓝光受体隐色素在调节植物生长发育中的机制,采用双向电泳这种蛋白质组学的方法来分离对比cry1-304和野生型col-4在蛋白水平的表达变化.选取了15个差异蛋白质点,采用MALDI-TOF-TOF-MS进行肽质谱指纹图分析,其中10个蛋白质点得到鉴定和分析,它们包括一些普通酶、氧化还原酶、转录因子、结合蛋白、热休克蛋白等.; 杨粤军李彦唐冬英刘选明; 关键词：拟南芥双向电泳

拟南芥光周期开花突变体的筛选和基因的鉴定被引量：1: 2008年; 以双子叶模式植物拟南芥(Arabidopsis thaliana)突变体cry1cry2为实验材料,用含有激活标记质粒pSKI015的农杆菌浸花进行转化,构建了拟南芥T-DNA插入突变体库.通过筛选和观察分析,获得了一些开花时间比cry1cry2明显延迟或明显提早的突变体.采用IPCR(inverse PCR)和TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)等方法,鉴定了这些突变体T-DNA插入位点的基因组旁邻序列,并采用半定量RT-PCR对插入位点两侧基因的mRNA水平进行了分析,初步鉴定了与开花相关的候选基因,为进一步研究其功能,深入研究隐花素调节光周期开花的作用机制奠定了基础.; 黄绿红萧小鹃秦玉芝赵小英李妍唐冬英郭新红刘选明; 关键词：拟南芥 T-DNA 光周期 TAIL-PCR

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