哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目(2006RFLXS021)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：凌虹李妍杜海涛张志龙周海舟更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 来自同一供者的不同HIV-1感染者体内病毒包膜序列变异性分析被引量：1
- 2009年
- 目的调查同一供体来源HIV-1病毒包膜序列变异情况,为进一步进行表型特征、病毒感染能力以及抗病毒免疫研究奠定基础。方法从6例同一来源HIV-1感染者外周血单个核细胞中提取DNA,设计跨病毒包膜的保守引物,进行PCR扩增,将扩增产物克隆至质粒载体,筛选阳性克隆进行序列测定。采用生物信息学方法对其进行系统发育特征以及编码氨基酸的变异性进行了分析。结果共获得6个有完整开放读码框的包膜克隆。在6个克隆中,包膜糖蛋白gp120内变异程度大的区域分别为信号肽区、可变区V1/V2区、恒定区C2区内近V3区部分、V4区和V5区。变异包括点突变、氨基酸插入或缺失等。系统树分析发现所获得病毒克隆与中国分离株BCNB03聚集成一束。结论构建并鉴定了6个HIV-1包膜克隆。同一来源的HIV包膜糖蛋白在不同受者体内发生了较大变异。
- 张志龙周海舟杜海涛李妍王福祥凌虹
- 关键词：包膜系统发育分析
- HIV-1 ADA株gp140真核表达载体的构建与鉴定
- 2007年
- 目的构建Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)ADA株包膜蛋白(gp140)真核表达载体。方法分别设计包膜蛋白和突变点两端的两对引物,采用重叠延伸剪接法,构建HIV-1ADA株包膜蛋白gp140突变体。获得的PCR产物与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌后筛选阳性克隆进行测序,鉴定正确后经EcoRⅠ和NheⅠ双酶切,与pcDNA6/myc-HisA载体连接,构建包膜蛋白gp140的真核表达载体(pcDNA6-ADAgp140),转化大肠杆菌后筛选阳性克隆,经PCR及酶切进行鉴定。结果获得HIV-1ADAgp140的PCR产物,构建了其真核表达载体pcDNA6-ADAgp140,经转化和筛选获得了重组菌,经PCR、酶切及基因测序结果显示序列正确,为预期目的片段。结论成功构建了ADAgp140包膜蛋白的真核表达载体。此结果为深入研究HIV包膜蛋白生物学特性及进行HIV疫苗研究提供了良好的物质基础。
- 李玉雪王甲业李庆海李妍凌虹
