国家自然科学基金(31101676) 作品数:5 被引量:21 H指数:2 相关作者: 曹传旺 孙丽丽 王志英 张健 豆晓洁 更多>> 相关机构: 东北林业大学 国家林业局 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中央高校基本科研业务费专项资金 黑龙江省科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
转LdOA1基因果蝇品系GSTs基因表达及对溴氰菊酯胁迫响应 被引量:1 2016年 舞毒蛾是重要林业食叶害虫,揭示其G蛋白偶联受体介导G蛋白对GSTs的调控,这对于挖掘分子靶标开发新型杀虫剂具有重要意义。本文构建转LdOA1基因果蝇载体,获得表达LdOA1基因果蝇品系,分析了转基因果蝇GSTs基因表达量及对溴氰菊酯胁迫的响应,为明确昆虫OA1基因功能提供理论依据。通过传统的酶切-连接方法构建重组载体pUAST-att B-LdOA1,采用转基因技术构建表达LdOA1基因的纯合果蝇品系;利用PCR技术验证转基因果蝇品系;并运用实时荧光定量RT-PCR技术测定转基因果蝇GSTs Delta家族基因表达量及低浓度溴氰菊酯胁迫对GSTs基因表达量的影响。PCR扩增条带显示转LdOA1基因果蝇品系均能检测到453 bp目的基因条带。与非转基因果蝇相比,转LdOA1基因果蝇品系中GSTs Delta家族基因(除GSTd4和GSTd7)均上调表达,为非转基因组1.01-3.27倍。低浓度溴氰菊酯胁迫6 h,非转基因果蝇GSTd6和GSTd10基因被显著诱导激活,而其他GSTs基因被显著抑制,抑制率为6.48%-95.84%;胁迫12-72 h,GSTs基因(除GSTd1和GSTd10外)均被显著抑制。低浓度溴氰菊酯胁迫转基因果蝇GSTs表达量变化趋势与非转基因果蝇基本一致,但转基因果蝇品系GSTs表达量显著高于非转基因果蝇品系(除12-48 h GSTd1和GSTd10),且胁迫6 h表达量最大。这些结果表明LdOA1基因可能介导G蛋白信号通路调控下游GSTs Delta亚家族基因表达响应溴氰菊酯胁迫。 孙丽丽 刘鹏 王志英 梁斌 曹传旺关键词:舞毒蛾 GSTS 苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂研制及杀虫毒力测定 被引量:14 2014年 以苏云金杆菌和白僵菌为有效成分制成混配菌剂,采用高效小型粉碎机将筛选的助剂及原药混匀,在测定助剂对微生物活体的生物活性、制剂性能影响的基础上,进行混配菌剂助剂的筛选。通过生物测定筛选获得最佳混配比例,并将其加工成可湿性粉剂。结果表明:苏云金杆菌库斯塔克亚种和球孢白僵菌最佳混配质量比为3∶1,润湿分散剂为1%Morwet EFW、3%SDS、9%Morwet D425、9%TERSPERSE 2020;紫外保护剂为0.3%黄原胶,以凹凸棒土为载体补足100%。以此配方制备的混配菌剂的质量悬浮率72.73%,孢子悬浮率75.13%,润湿时间<1min,平均粒度为13.76μm。苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂中各指标符合商品制剂的标准,对黄褐天幕毛虫毒力分别高于苏云金杆菌和白僵菌可湿性粉剂单剂,是一种具有高杀虫活性、持效期长、环境友好型绿色农药。 王志英 孙丽丽 张健 曹传旺关键词:苏云金杆菌 白僵菌 可湿性粉剂 甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫多功能氧化酶和羧基酰胺酶活性的影响 被引量:2 2013年 甲氧虫酰肼是昆虫蜕皮激素类似物,能干扰昆虫新表皮的形成。为了研究甲氧虫酰肼对舞毒蛾(Ly-mantria dispar)杀虫活性以及与其代谢相关酶的活性,采用叶片药膜法测定了甲氧虫酰肼对舞毒蛾2、3龄幼虫毒力及对其多功能氧化酶(MFOs)和羧基酰胺酶活性的影响。结果表明:甲氧虫酰肼对舞毒蛾2、3龄幼虫,48 h LC50分别为14.004、24.105 mol.L-1;48 h LC5分别为1.573、2.090 mol.L-1;48 h LC20分别为4.575、6.898 mol.L-1。用甲氧虫酰肼亚致死剂量48 h LC5和48 h LC20处理舞毒蛾幼虫后,2龄幼虫MFOs活性表现出先激活再抑制再激活;3龄幼虫则表现出先抑制再激活再抑制的作用;2~3龄幼虫羧基酰胺酶活性均表现出先激活再抑制再激活再抑制。可见,甲氧虫酰肼作为非甾醇类蜕皮激素竞争物中的新型化合物,对舞毒蛾幼虫有较高的生物活性,对舞毒蛾幼虫体内MFOs和羧基酰胺酶活性具有明显干扰作用。 钟华 曹传旺 薛煜 严善春关键词:舞毒蛾 甲氧虫酰肼 多功能氧化酶 4种植物源杀虫剂对落叶松毛虫幼虫室内药效试验 2012年 测定了4种植物源杀虫剂对落叶松毛虫Dendrolimus superans(Butler)幼虫室内毒力,结果表明0.4%蛇麻子素、1%苦皮藤素、0.3%印楝素乳油稀释1 000倍、1 500倍、2 000倍液对落叶松毛虫2龄幼虫72 h校正死亡率为20.53%~92.84%,其中1 000倍液校正死亡率为80.12%~92.84%;对4龄幼虫的校正死亡率为30.01%~80.22%,其中1 000倍液校正死亡率为68.16%~80.22%。2%烟碱.苦参碱乳油500,1 000,1 500倍液对2龄和4龄幼虫72 h校正死亡率分别为42.34%~93.82%和41.16%~85.49%。4种植物源杀虫剂1 000倍液对2龄和4龄落叶松毛虫的毒力均存在差异性。 孙丽丽 曹传旺 方国飞 王志英关键词:落叶松毛虫 植物源杀虫剂 药效测定 舞毒蛾LdOA1基因克隆分析及对3种杀虫剂胁迫的响应 被引量:5 2014年 G蛋白偶联受体(GPCRs)是生物体内重要膜受体,通过激活三聚体G蛋白参与各种细胞内信号转导,在药物研发中具有重要的作用。从舞毒蛾无参照全转录本文库中鉴定获得GPCR家族中眼白化I型全长基因(命名为LdOA1),该基因全长453 bp,编码150个氨基酸,分子质量为17.54 kDa,理论等电点(pI)为9.76。进化树分析表明LdOA1蛋白与帝王蝶的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析表明舞毒蛾3龄幼虫在溴氰菊酯、甲萘威和氧化乐果胁迫下LdOA1的表达均表现为显著抑制。 曹传旺 孙丽丽 问荣荣 豆晓洁 王志英关键词:舞毒蛾 基因 杀虫剂 基因表达