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致病菌碳源代谢与毒力调控的关联性被引量：5: 2012年; 在自然环境中,细菌需要应对生长环境的不断变化。细菌发展了一些机制以适应这些环境的变化。其中,对可用碳源的适应性机制是其中的重要方面。碳源是细菌对复杂环境作出适应反应的信号之一,某种特定碳源的出现也许使细菌感受到正处于感染相关的机体组织或细胞中,从而促使毒力基因表达。本文简述了细菌对可用碳源的适应性机制,并就致病菌碳源代谢与毒力调控的关联性进行了综述。这些致病菌主要包括了硬壁菌门的链球菌、单增李斯特菌、产气夹膜杆菌;变形菌门的牛种布鲁氏杆菌、脑膜炎奈瑟氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、霍乱弧菌、根瘤菌;以及放线菌门的结核分枝杆菌,它们的碳源代谢通过多种途径,如HprK/P及PTS蛋白、CRP-cAMP、ABC转运系统、双组分系统等,影响其毒力表达。; 周妍妍阚飙; 关键词：毒力致病菌

调控子fur影响霍乱弧菌生物膜的形成(英文)被引量：2: 2013年; 目的:铁摄取调节蛋白Fur,其在细菌体内维持铁代谢稳态中担任着抑制剂和激活剂的双重角色,已有研究证实Fur还是霍乱弧菌的毒力调控子。研究证实生物膜的形成和游动性与霍乱弧菌的毒力相关,因此我们通过一系列表型实验分析Fur蛋白对霍乱弧菌生物膜形成影响,并预测依赖Fur与霍乱弧菌致病相关的基因,为后续研究做准备。方法:基于自杀质粒缺失霍乱弧菌的Fur基因,并构建相应回补株及蛋白表达株;通过表型实验,比较霍乱弧菌野生株和fur突变株在细菌运动能力、生物膜形成。结果:成功构建霍乱弧菌fur缺失株,回补株和蛋白表达株,His-Fur蛋白在上清液表达。表型实验表明fur突变株的菌株游动性降低,生物膜形成能力增强。结论:因此我们得出Fur可能与其它调控子一起,调控霍乱弧菌的表多糖,TCP和鞭毛蛋白的合成,从而抑制霍乱弧菌生物膜的合成。转录调控子Fur直接或间接调控一些与环境生存和致病相关的基因,对霍乱弧菌的传播、侵染、定殖等过程发挥作用奠定了基础。; 陈秀琴蔡红艳张卫闫梅英高鹤段国贤闫志勇; 关键词：霍乱弧菌 FUR 生物膜形成

Hfq对霍乱弧菌环境适应能力的影响及相关基因的转录调控被引量：2: 2013年; 目的通过表型实验分析Hfq蛋白对霍乱弧菌环境适应能力的影响，并通过分子实验验证Hfq对环境生存及致病相关基因转录的调控。方法基于自杀质粒缺失霍乱弧菌的hfq基因，并构建相应回补株；通过表型实验，比较霍乱弧菌野生株和hfq突变株在细菌运动能力、生物膜形成、外膜抗性和氧化应激能力上的差异；应用逆转录荧光定量PCR（RT-qPCR）技术对Hfq可能调控的相关基因的转录水平进行比较。结果成功构建霍乱弧菌hfq缺失株及回补株，表型实验表明hfq突变株的菌株游动性降低，生物膜形成能力增强，对十二烷基磺酸钠（SDS）和庆大霉素的耐受性显著下降，并且与野生株相比，hfq突变株对H2O2刺激更为敏感。RT-qPCR实验证明Hfq对霍乱弧菌鞭毛合成、胞外多糖合成、外膜蛋白以及氧化应激相关基因的转录有调控作用。结论Hfq蛋白作为RNA伴侣分子，能够通过调控一些生存及致病相关基因的转录进而影响霍乱弧菌的生物膜形成、氧化应激反应、抗生素抗性等能力，表明Hfq可能与其他调控子一起，在霍乱弧菌的生存、代谢以及致病因子转录的协调控制上起关键作用。; 陈秀琴闫志勇李杰王瑞白闫梅英阚飙高鹤; 关键词：霍乱弧菌 HFQ 环境适应转录调控

霍乱弧菌中调控aphB的基因筛选及其功能被引量：1: 2012年; 【目的】筛选霍乱弧菌C6706-中调控LysR家族蛋白AphB表达的基因。【方法】将霍乱弧菌埃尔托型菌株C6706-aphB启动子区克隆到2个报告质粒pBBRLux和pKP302上,并将其导入霍乱弧菌C6706-中,以此作为出发菌株。利用出发菌株与转座子pSC123接合构建LZV630-302转座子随机突变文库,通过测定化学发光强度检测aphB启动子的表达水平,筛选aphB表达受影响的突变株。利用随机PCR方法检测转座子插入位点,并测序比对分析基因。【结果】从7个转座子库中(共约4万个突变株)得到能影响aphB表达(均导致下降)的2株突变株T1和T2。测序比对发现T1中转座子插入在vc1585读码框内,T2中转座子插入在距vc1602基因末端7 bp处。【结论】获得aphB表达改变的突变株,基因vc1585和vc1602可能直接或间接影响aphB表达,为进一步研究aphB表达调控影响因素奠定了基础。; 陈海丽朱召芹钟增涛朱军阚飙; 关键词：霍乱弧菌基因调控

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国家自然科学基金(30830008)