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国家自然科学基金(31240008)
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战飞翔
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2013
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大肠杆菌K12植酸酶热稳定性突变体在毕赤酵母中的高效表达和性质研究(英文)
2013年
植酸酶广泛用作工业饲料添加剂。通过基因优化和两步法基因合成了E.coli K12植酸酶的耐热突变体AppA NR,将其克隆到毕赤酵母表达载体pHBM905A上,然后将构建好的质粒转入毕赤酵母GS115中表达。经过筛选得到了一株高表达毕赤酵母工程菌GS115/AppA NR,产量达到10mg·mL-1,活力为980U·mL-1。该重组酶在95℃加热10min,仍保留90%的活力,相比野生型植酸酶,更能抵抗高温。同时,该酶具有较宽的pH值范围和抗胃酶水解的能力。所有这些性质的改善表明该重组酶比较适合用作工业饲料添加剂。
周玉玲
邹由
付玲
江维
战飞翔
康立新
马向东
马立新
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基因合成
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