深圳市科技计划项目(201002162)
- 作品数:2 被引量:31H指数:1
- 相关作者:王文敬郑欣李活熊文叶贤林更多>>
- 相关机构:深圳市血液中心南方医科大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 无偿献血者隐匿性乙型肝炎病毒Pre-S/S区变异的研究被引量:31
- 2011年
- 目的调查无偿献血人群的隐匿性乙型肝炎病毒感染(OB I)流行率情况与分析Pre-S/S区变异特征。方法使用EIA/NAT方法筛查深圳地区15 338人份无偿献血者血标本,经跟踪检测,获得1例HBV窗口期感染毒株和5例OB I毒株,采用荧光定量聚合酶链反应(QPCR)测定OB I病毒载量,应用巢式聚合酶链反应(Nested-PCR)技术从5例OB I样品中获得3例Pre-S/S基因片段并测定序列,进行基因分型,与对应基因型HBsAg阳性野毒株序列比对。结果深圳市无偿献血者隐匿性乙型肝炎病毒感染(OB I)的流行率为1∶3 068。5例OB I样品其病毒载量为〈1 IU/m l(不能定量)~121.8 IU/m l(中位数为54.6 IU/m l)。3例OB I样本为基因C型,在Pre-S/S蛋白区出现随机变异,OB I样品Pre-S/S区氨基酸置换率显著高于对应基因型野毒株(P〈0.01),其中在Pre-S/S区的免疫表位区氨基酸置换率亦显著高于野毒株(P〈0.01),但在高频变异的主要亲水区(MHR)却是高度保守,只有1例OB I出现改变基因亚型的I126S变异。结论乙肝病毒的Pre-S/S蛋白区变异,特别是Pre-S/S蛋白免疫表位区的变异,可能是OB I发生机制之一。
- 容莹郑欣叶贤林曾劲峰熊文李活王文敬
- 关键词:无偿献血者流行率
- HCV及HIV二联病毒核酸荧光PCR检测方法的建立
- 2013年
- 目的建立多联病毒核酸荧光PCR检测方法,为我国核酸检测技术的应用前景提供技术支持。方法使用逆转录实时荧光PCR定量方法(QRT-PCR)检测HCV、HIV病毒,在成功扩增定量单一病毒的基础上,通过主要调整Mg(2+)离子、dNTPs、Taq的浓度等优化反应体系,建立同时检测两种病毒核酸的逆转录实时荧光PCR定量检测方法(一步法双检),并分析双检体系的扩增灵敏度。结果通过优化筛选反应条件,使用QRT-PCR方法成功扩增双模板HCV/HIV RNA,且检测特异性好,灵敏度较高,能达到HCV RNA 20IU/ml与HIV RNA 80IU/ml的检测灵敏度。结论本试验成功建立能同时检测两种病毒核酸的QRT-PCR方法,为后续研究HBV、HCV、HIV多联荧光病毒核酸检测系统提供了理论依据与技术支持。
- 容莹王文敬黎诚耀沈磁石郑欣
- 关键词:HCVHIV血液筛查