辽宁省教育厅高等学校科学研究项目(L2013304)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：刘彤陈思蕾李洋李丰李丹妮更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家自然科学基金辽宁省大学生创新创业训练计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 野生型和失活型PAK1基因自我抑制域的GST标签真核表达载体的构建及表达
- 2014年
- 目的:构建不同活性的人p21活化激酶1(hPAK1)自我抑制域(AID)谷胱甘肽(GST)标签真核表达载体并鉴定其融合蛋白表达,以探讨PAK1AID的功能及肿瘤治疗的靶向意义。方法:以pcDNA3.1HisC-PAK1全长质粒为模板,利用PCR扩增野生型(WT)PAK1AID片段,再以此片段为模板采用大引物法扩增其突变体L107F片段,双酶切克隆至GST融合的真核表达载体pEBG。将质粒转染至工具细胞HEK293中,并经免疫印迹鉴定GST融合蛋白的表达。结果:PCR扩增出约200bp大小的野生型和失活型PAK1AID片段,双酶切得到与预期大小相符的载体与PAK1AID片段,野生型与失活型pEBG-PAK1在工具细胞HEK293中表达,蛋白的相对分子质量均为33 000。结论:成功构建野生型和失活型PAK1基因AID的GST标签真核表达载体,并表达出不同活性的GST-PAK1AID的融合蛋白。
- 刘彤李丹妮李洋李丰
- 关键词：真核表达
- PAK6对前列腺癌的双向调控作用被引量：2
- 2016年
- 前列腺癌为一类男性患病率较高的癌症,对该癌症机制的认识以及治疗手段非常有限,在西欧和美洲男性中是一类致死率较高的癌症。随着科学研究的不断进展,p21活化激酶（PAK）蛋白家族在癌症中发挥的作用开始进入人们的视野。p21活化激酶6（PAK6）最初是以雄激素受体的配体结合域（LBD）上的氨基酸序列629~919,通过酵母双杂交识别出来的雄激素受体相关蛋白。而雄激素与雄激素受体在前列腺癌的发生与发展中发挥了十分重要的作用,因此PAK6蛋白作为前列腺癌治疗的靶向蛋白被不断研究。本文主要介绍PAK6在前列腺癌中的双向调节作用,包括通过磷酸化雄激素受体抑制雄激素受体向核内转移的抑癌作用,和通过抑制BAD凋亡通路、影响前列腺癌细胞生长周期以及促进前列腺癌细胞从细胞集落中脱离的促癌作用。同时PAK6的表达水平和激酶活性的调节对PAK6在前列腺癌中发挥作用具有十分重要的意义。激素与生长因素和内质网应激可能是提高PAK6表达水平和激酶活性的两条途径。PAK6在前列腺癌中发挥的作用与其表达水平和激酶活性的调节机制对前列腺癌的治疗手段以及其治疗药物的靶向目标具有十分重要的意义。
- 唐诣超陈思蕾刘彤
- 关键词：前列腺癌雄激素受体BADHGF内质网应激P38-MAPK
