国家自然科学基金(31071813)
- 作品数：12 被引量：169H指数：7
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- 绿叶挥发物代谢调控及分子机理研究进展被引量：27
- 2012年
- 植物处于复杂的自然环境中,常受到植食性昆虫、病原菌及机械损伤等生物或非生物的侵害并造成植物的局部伤害,从而启动复杂的防御反应。释放绿叶挥发物(green leaf volatiles,GLVs)是植物防御性反应之一。绿叶挥发物是植物不饱和脂肪酸经过Oxylinpins生化途径中的脂氧合酶(LOX)和脂氢过氧化物裂解酶(HPL)催化而形成的一类C6和C9醛、醇及其相应的酯类。作为启动植物防御机制的信号分子,这类挥发性物质通过长距离的气态传输在植物与病原菌、植物与植食性昆虫、植物自身和相邻的植物之间起作用,从而介导防御性反应。研究其生化途径及其调节机理,对探索其对病虫害的直接、间接防御、改善作物风味品质及抗病新种质创制起着非常重要的作用,且对园艺植物甚至农林生态系统中作物病虫害综合治理策略的制定具有重要的指导意义。该文综述了绿叶挥发物合成的生化途径及其作为信号转导物质的作用机制,并阐述了绿叶挥发物在植物抗逆方面的生理作用及其应用前景。
- 陈书霞陈巧王聪颖郝丽宁房玉林
- 关键词：脂氧合酶防御机制
- AM真菌和根结线虫互作对黄瓜生长及生理特征的影响被引量：12
- 2012年
- 通过盆栽试验研究了丛枝菌根真菌Arbuscular mycorrhiza(AM)和南方根结线虫Meloidogyneincognita互作对黄瓜幼苗生长及生理特征的影响。结果表明,预先接种地表球囊霉Glomus versi-forme再接种线虫处理的鲜、干重较只接种线虫的处理显著增加;预先接种AM真菌再接种线虫处理的根结线虫病情指数、AM真菌侵染率较只接种线虫的处理明显降低;接种线虫使黄瓜植株的过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)及苯丙氨酸解氨酶(PAL)、总酚含量有不同程度提高,其中预先接种根内球囊霉G.intraradices对黄瓜植株起到了较好的保护作用;与对照相比,只接种线虫处理的叶片磷含量降低了25.26%,预先接种AM真菌再接种线虫处理的叶片磷含量较只接种根结线虫的含量高。
- 陈书霞姜永华刘宏久程智慧
- 关键词：黄瓜AM真菌根结线虫生理特征
- 大蒜种质产量和品质性状主成分聚类分析与综合评价被引量：54
- 2012年
- 以40个大蒜品种为供试材料,依据数值分类学的性状选择原则,分别于大蒜生长期和采收后进行农艺性状指标的采集。估算40个大蒜品种16个农艺性状及4个品质指标的主成分,并以前3个主成分和遗传相似性系数为基础,分别作二维散点图和系统聚类分析。40份大蒜品种前7个主成分累计贡献率达85%。根据品种性状主成分表现,评选出性状优良的大蒜品种共10个。在聚类图中,在0.14的遗传相似性水平上可以把40份品种分成4类,即由5份种质组成的类群Ⅰ;由28份种质聚成的类群Ⅱ;由改良蒜等4份种质组成的类群Ⅲ,及苏联蒜等3份种质组成的类群Ⅳ。全部种质的遗传相似性系数在0.07～0.64之间,很好地揭示了品种类群间存在的亲缘关系。
- 陈书霞周静申晓青常燕霞杜俊娜孟焕文程智慧
- 关键词：大蒜主成分聚类分析
- 黄瓜高频再生体系的建立被引量：3
- 2014年
- 【目的】建立黄瓜的高频再生体系,为黄瓜种质的遗传转化奠定基础。【方法】分别以华北型黄瓜种质26号、欧洲型黄瓜种质14-1为材料,研究不同激素组合、AgNO3质量浓度、苗龄、子叶切割方式及外植体接种方式对黄瓜子叶节不定芽诱导的影响。【结果】华北型黄瓜种质26号再生的最适激素组合为4.0mg/L 6-BA+0.3mg/L IAA+1.0mg/L AgNO3,再生率与再生系数分别可达85.00%和2.51;欧洲型黄瓜种质14-1再生的最适激素组合为3.0mg/L 6-BA+2.0mg/L ABA+1.0mg/L AgNO3,再生率与再生系数分别可达86.70%和2.77;5d苗龄的黄瓜子叶作为外植体时诱导不定芽的状态最佳;切除子叶端部2/3且基部附带有1mm子叶柄、以叶背向下子叶柄微插入的方式进行接种再生效率最高。【结论】建立了黄瓜种质14-1和26号材料的高频再生体系,再生率均可达85%以上。
- 万旭花陈书霞申晓青陈为峰张然然成思琼
- 关键词：黄瓜6-BAIAA
- 番茄果实不同发育阶段香气成分组成及变化被引量：19
- 2010年
- 以陕西杨凌地区主栽的番茄品种‘金棚1号’为试验材料,通过固相微萃取和GC/MS联用技术,对番茄果实不同成熟阶段的香气成分及其组成变化进行了研究。结果表明,‘金棚1号’番茄果实共检测到54种香气成分,主要成分为醛类、酸类、醇类、酮类、酯类、酚类等。在果实的不同发育阶段,香味组分及其含量差异较大。醛类物质在绿熟期相对含量较高,为45.87%,在半熟期、硬熟期、完熟期的相对含量分别为12.65%、16.62%、17.15%,其中C6醛在绿熟期占43.7%,完熟期占15.27%,为醛类物质的主要成分;酸类物质含量在4个发育时期中先上升后下降,在半熟期含量达到最高,为15.2%,在完熟期酸类物质含量下降,为6.93%;酮类物质在完熟期含量达到最大,为18.27%;在绿熟期检测到4种重要的番茄特征香气物质,半熟期检测到5种番茄特征香气物质,硬熟期和完熟期各检测到6种番茄特征香气物质。说明随着果实的成熟,特征香气物质种类增多。
- 陈书霞林海军
- 关键词：番茄果实发育芳香成分
- 利用Gateway技术构建黄瓜HPL基因的RNA干扰载体被引量：4
- 2013年
- 为探讨黄瓜脂氢过氧化物裂解酶基因(HPL)下调表达对黄瓜果实挥发性醛类物质合成的影响,设计1对特异引物,以黄瓜pDONR201-HPL质粒为模板,通过PCR扩增出323bp的片段。利用基于同源重组原理的Gateway技术,将扩增的片段通过BP反应连接到入门载体pDONR201中。对扩增出的323bp的片段进行测序,测序结果显示该序列与原序列同源性为100%。在此基础上,通过LR反应将目的片段插入过表达的植物RNA干涉载体pHellsgate8,构建黄瓜HPL基因的RNAi表达载体pHellsgate8-HPLi,分别经限制性内切酶XhoⅠ、XbaⅠ酶切后获得323bp的片段,与预期结果一致。采用热击法将pHellsgate8-HPLi转化农杆菌GV3101,经菌液PCR扩增获得323bp的目的条带,表明RNAi表达载体pHellsgate8-HPLi已成功转入农杆菌中。
- 王聪颖陈书霞陈巧郝丽宁孟焕文万旭花申晓青程智慧
- 关键词：黄瓜克隆载体GATEWAY技术
- 不同基因型黄瓜果实香气组成的主成分分析和聚类分析被引量：15
- 2013年
- 采用气相色谱和质谱联用(GC-MS)技术对12个不同基因型黄瓜果实的香气物质进行测定,并应用主成分分析和聚类分析评价黄瓜果实的香气物质组成,旨在研究不同基因型黄瓜果实风味的组成及特征,并依据果实主要香味物质含量对不同基因型黄瓜进行划分,为品质育种提供参考。结果表明,1-戊烯-3-醇、樟醇、1-戊醇、(Z)-3-壬烯-1-醇、乙醛、1-壬醇、(Z)-2-庚烯醛、丙醛、(E)-2-戊烯醛、(E,Z)-2,6-壬二烯醛、(E)-2-壬烯醛、(E)-4-壬烯醛、壬醛、石竹烯等23种物质为黄瓜果实香气的主要组成成分;其次,12个不同基因型黄瓜果实按风味特征分为4大类型:第1类包括基因型Q23、24-6、6、27、29、3、14-1,黄瓜味、清香味淡;第2类包括基因型16、4、26;第3类包括基因型1-2,黄瓜味、清香味浓;10-1自成一类,为第4类,果实果香味浓,清香味淡。可见,不同基因型黄瓜香气物质种类、含量的差异导致不同基因型黄瓜果实的风味存在差异。
- 郝丽宁陈书霞刘拉平陈巧孟焕文王聪颖
- 关键词：黄瓜香气成分聚类分析主成分分析
- 黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的克隆及表达分析被引量：7
- 2013年
- 【目的】以华北型黄瓜种质26号为材料克隆黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的cDNA全长并分析其序列特征,在此基础上研究该基因在果实发育进程中的表达模式、酶活性变化及相应的C6醛类物质含量,为研究脂氧合酶基因在黄瓜果实醛类香气物质形成中的作用机制奠定基础。【方法】以华北型黄瓜种质26号为材料,通过RT-PCR和RACE技术克隆黄瓜的脂氧合酶基因CsLOX2的cDNA全长并分析其生物信息学特征,对CsLOX2在果实发育进程中的表达模式进行Real-time PCR检测,通过气质联用(GC-MS)技术测定相应的C6醛类香气物质的含量并利用分光光度法测定LOX酶活性。【结果】华北型黄瓜种质26号的CsLOX2基因cDNA全长2 878 bp,ORF区为2 640 bp,编码879个氨基酸,推导的蛋白质分子量为99.39 kD,等电点为6.28。通过氨基酸序列比对发现,该基因编码的氨基酸序列具有脂氧合酶家族的3个重要特征区域及植物LOX中皆具有的6个高度保守的组氨酸,该序列与其它物种的脂氧合酶氨基酸序列具有较高的同源性。根据其N端序列特征推测CsLOX2属于I类LOX,具有13-LOX活性。Real time-PCR分析结果表明,该基因在花后3 d表达量最高,此后下降,至花后15 d最低;脂氧合酶的活性自开花当天逐渐上升,至花后12 d达到最高,此后下降;C6醛类香气含量在果实发育始期较高,随果实发育进程逐渐下降,至花后12 d最低。【结论】利用RACE技术克隆了华北型黄瓜种质26号脂氧合酶基因CsLOX2的cDNA全长,序列分析表明该基因具有植物LOXs的特征结构域。CsLOX2基因表达高峰先于脂氧合酶活性高峰的出现,C6醛类香气含量在果实发育始期较高,随果实发育进程逐渐下降。该研究结果将为进一步探讨脂氧合酶基因在黄瓜果实醛类香气物质形成中的作用机制奠定基础。
- 陈巧陈书霞王聪颖郝丽宁孟焕文万旭花申晓青程智慧
- 关键词：黄瓜脂氧合酶荧光实时定量PCR
- 黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的原核表达载体的构建及表达分析
- 2013年
- 以先前克隆到的黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2全长的cDNA为模板,用含有特异性酶切位点的Yh1、Yh2为引物,通过PCR方法将黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的ORF区构建到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1上获得原核表达载体p4t-LOX2,将该表达载体p4t-LOX2转化到大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,获得相应的重组工程菌。在IPTG诱导下,通过SDS-PAGE电泳,得到一条约115kD的融合蛋白条带,除去pGEX-4T-1自身诱导的约26kD大小的GST标签蛋白后,CsLOX2编码一个约89kD的蛋白。经过融合蛋白表达体系的优化分析,表明该融合蛋白在37℃,0.80mmol·L-1IPTG诱导表达10.5h,可获得融合蛋白的最大表达量。
- 陈巧陈书霞王聪颖郝丽宁万旭花申晓青程智慧
- 关键词：黄瓜脂氧合酶原核表达
- 不同基因型黄瓜果实芳香物质组成及含量差异研究被引量：13
- 2013年
- 【目的】研究不同基因型黄瓜果实芳香物质主要组成成分及含量的差异,为黄瓜的品质育种及其栽培提供依据。【方法】以11个不同基因型黄瓜果实为材料,采取固相微萃取结合气相色谱-质谱联用仪(GC-MS),对黄瓜果实的香气物质组成进行分析,并根据其香气值确定黄瓜果实的特征香气成分。【结果】从11个不同基因型黄瓜果实中共检测到78种芳香物质,主要包括醛类、醇类、酮类、烃类及酯类,其中醛类和醇类物质的相对含量最高,分别占芳香物质总量的56.30%～83.95%及7.78%～21.33%,表明醛类和醇类是黄瓜果实芳香物质的主体香气成分;烃类芳香物质1,4-辛二烯在黄瓜中属首次检出。【结论】根据检出芳香物质的香气值,确定(E,Z)-2,6-壬二烯醛、(E)-6-壬烯醛、(E)-2-壬烯醛、己醛、壬醛、(Z)-2-庚烯醛等16种化合物为黄瓜果实的特征香气成分,其中9种特征香气成分为不同基因型黄瓜所共有。
- 郝丽宁陈书霞王聪颖陈巧万旭花申晓青程智慧孟焕文
- 关键词：黄瓜基因型芳香物质
