中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010TS16)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：王江勇姜敬哲韩焘张远张彬彬更多>>
- 相关机构：中国水产科学研究院南海水产研究所上海海洋大学华南农业大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家现代农业产业技术体系建设项目广东省海洋渔业科技推广专项项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 杂色鲍血淋巴双向电泳与质谱分析被引量：1
- 2013年
- 以杂色鲍(Haliotisdiversicolor)血淋巴为材料进行了双向电泳研究。首先,确定了以丙酮沉淀法和RC DC蛋白定量试剂盒为基础的蛋白制备与定量方法;其次,对样品前处理方法进行了摸索,通过500 r/min的低速离心方法分离了血细胞和血浆组分,通过35 000 r/min超速离心2 h除掉了部分高丰度的血蓝蛋白,降低了高分子量区域的血蓝蛋白背景;进一步使用18 cm pH 3-10非线性胶条和标准化的电泳程序,对不同上样量的电泳银染结果进行了比较,获得了良好的双向电泳图谱;最终选取肌动蛋白、原肌球蛋白、胶原蛋白和血蓝蛋白4个蛋白点成功进行了质谱鉴定。
- 韩焘姜敬哲王江勇
- 关键词：杂色鲍血淋巴血浆双向电泳蛋白质组
- 杂色鲍血蓝蛋白免疫功能肽段的研究
- 血蓝蛋白(Hemocyanin)是节肢、软体等低等动物体内的一种多功能蛋白,除氧气运输外,还在金属离子转运、蛋白质储存、渗透压调节、蜕皮激素载体、表皮固化等方面发挥作用。尤其重要的是,近年越来越多的证据表明它还在免疫反应...
- 姜敬哲韩焘彭文王江勇
- 关键词：杂色鲍血蓝蛋白
- 文献传递
- 杂色鲍Fosmid基因组文库构建与血蓝蛋白基因筛选被引量：2
- 2012年
- 以杂色鲍Haliotis diversicolor肌肉组织为材料,按照CopyControlTM Fosmid Library Production Kit中方法构建了杂色鲍Fosmid全基因组文库.从文库中随机挑取50个克隆进行NotⅠ酶切鉴定发现,阳性率达到100%,插入片段大小分布在32～48 kb之间,平均长度约37.6 kb.随机挑取8个克隆进行正、反向末端测序,获得了全部16个测序结果,其中8条序列确定为鲍来源基因序列.进一步根据杂色鲍血蓝蛋白(Hemocyanin)基因3'端序列设计特异引物,用PCR方法对基因组文库进行筛选,获得一个阳性克隆,经Primer-Walking测序、Blast比对和进化分析证实,该序列为杂色鲍血蓝蛋白Ⅱ型基因克隆.
- 姜敬哲张彬彬张远苏友禄王江勇
- 关键词：杂色鲍FOSMID基因组文库血蓝蛋白文库筛选
- 杂色鲍血蓝蛋白多克隆抗体的制备与血蓝蛋白35kDa片段鉴定被引量：1
- 2012年
- 以杂色鲍(Haliotis diversicolor Reeve)为研究对象,通过密度梯度离心方法纯化得到高纯度血蓝蛋白,以其作为抗原皮下注射免疫新西兰大白兔,从而获得高效价的兔源多克隆抗血清。进一步通过Protein A抗原亲和纯化的方法对该抗血清纯化,最终获得效价更高、检测特异性更好的血蓝蛋白多克隆抗体。应用该抗体进行Western检测发现,鲍血淋巴中存在着多样的血蓝蛋白衍生产物;进一步结合质谱技术对其中35 kDa条带进行鉴定发现,其来源于血蓝蛋白I型亚基的H结构域。
- 姜敬哲韩焘王江勇杨慧英刘金叶
- 关键词：血蓝蛋白多克隆抗体
