浙江省医药卫生科学研究基金(2013KYA144)
- 作品数:3 被引量:8H指数:3
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- 相关机构:浙江大学医学院附属第一医院浙江中医药大学浙江中医药大学附属第一医院更多>>
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- 人肝星形细胞胰高血糖素样肽1受体的表达被引量:3
- 2013年
- 目的证实胰高血糖素样肽1(GLP_1)受体在人肝星形细胞上的表达。方法体外培养人肝星形细胞并进行形态学鉴定。提取肝星形细胞mRNA并逆转录获得eDNA,RT-PCR法测定GLP-1受体mR.NA的表达,免疫印迹法测定GLP-1受体蛋白的表达情况。结果显微镜下可以观察到活化的肝星形细胞为扁平状,胞体大,具有发育良好的应力纤维,胞浆内缺乏脂肪滴。GLP-1受体eDNA片段长度为296bp,与GenBank公布的人GLP-1受体eDNA序列(NM.002062.3)相符度为100%。免疫印迹法表明人肝星形细胞样本GLP-1受体蛋白表达阳性。结论人肝星形细胞上存在GLP-1受体的表达。
- 吴凌康厉有名刘英超施维群吴峰茹清静
- 关键词:肝星形细胞免疫印迹RT-PCR抗肝纤维化
- 高糖诱导下肝星形细胞活化与p38MAPK信号通路的关系被引量:3
- 2015年
- 目的探讨高糖诱导下肝星形细胞(r/sc)活化与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的相互关系。方法体外培养人HSC并进行形态学鉴定,选取60份样本,分为对照组、高糖组和阻断组各20份;对照组常规培养,高糖组在常规培养基础上加入葡萄糖(终浓度25mol/L),阻断组在高糖组基础上加入p38MAPK阻断剂SB203580(终浓度40mol/L)进行培养,培养120h后用链霉亲和素一生物素复合物法(SABC)及Western印迹法检测各样本的α-肌动蛋白(α-SMA)和p-p38MAPK蛋白表达情况。结果经鉴定,培养后的HSC呈扁平状,胞体大,具有发育良好的应力纤维,胞浆内缺乏脂肪滴。SABC法原位检验结果显示:高糖组的α-SMA阳性信号强于对照组,而阻断组的α-SMA阳性信号则近似于对照组。3组HSC的仅.SMA和p-p38MAPK蛋白的相对表达量差异均有统计学意义(F=31.36,78.49,P均〈0.01)。其中,高糖组的α-SMA表达相对量为(34.61±4.07)%,高于对照组和阻断组的(23.90±6.02)%和(26.48±4.41)%,差异均有统计学意义(t=7.20和-5.37,P均〈0.01);高糖组表达相对量高糖组为(22.79±3.80)%,对照组和阻断组分别为(8.13±4.95)%和(10.66±4.15)%,差异均有统计学意义(t=-11.01和.10.41,p均〈0.01)。结论活化程度较高的HSC具有较高的p38MAPK信号强度,而阻断p38MAPK信号通路能够降低HSC的活化程度。
- 吴凌康厉有名刘英超施维群吴峰茹清静史亮亮
- 关键词:肝星状细胞Α-SMAP38MAPK信号通路
- 胰高糖素样肽-1受体激活对肝星状细胞p38MAPK信号通路的影响被引量:3
- 2015年
- 目的 探讨肝星状细胞(HSC)上胰高糖素样肽-1(GLP-1)受体激活对胞内p38MAPK信号通路的影响。 方法 体外培养人HSC并进行形态学鉴定,随机选取样本用Western blot法检测其GLP-1受体蛋白的表达情况;设立对照组和实验组HSC进行体外培养,实验组予以GLP-1受体激动剂-利拉鲁肽,对照组予以等量等渗盐水,细胞培养120 h后用RT-PCR检测各样本的p38MAPK mRNA表达水平,用Western blot检测各样本磷酸化p38MAPK蛋白表达水平。对数据进行两独立样本均数t检验分析。 结果 人HSC上存在GLP-1受体蛋白的表达。实验组和对照组相比,磷酸化p38MAPK蛋白相对表达水平下降,差异具有统计学意义(18.0±2.8与21.2±2.5,t=3.814,P<0.01);p38MAPK mRNA相对表达水平亦下降,差异亦具有统计学意义(37.9±2.4与43.3±4.7,t=4.478,P<0.01)。 结论 HSC上GLP-1受体激活后能够下调HSC内p38MAPK mRNA的表达,也能够降低胞内磷酸化的p38MAPK蛋白水平,起到抑制p38MAPK信号通路的作用。
- 吴凌康厉有名刘英超唐翠兰吴峰史亮亮鲁科达
- 关键词:肝星状细胞信号传导