国家自然科学基金(30070773)
- 作品数：9 被引量：66H指数：5
- 相关作者：刘新平药立波邓艳春张文红韩月恒更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院华山中心医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 发育相关基因ndrg2在胎儿小脑发育早期的表达被引量：8
- 2006年
- 目的为探索新基因ndrg2在胎儿小脑组织中表达分布的特点,进一步研究ndrg2功能提供实验依据。方法收集引产4、5个月胎脑组织标本,分别进行组织石蜡切片和总RNA提取,应用免疫组化方法和逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测ndrg2在蛋白质及mRNA表达水平变化规律。结果免疫组化结果表明,在上述胎儿小脑脑区神经元胞浆均有ndrg2蛋白不同程度的表达。RT-PCR结果显示,ndrg2mRNA在正常胎小脑均有表达,5个月胎儿小脑表达高于4个月胎儿小脑。结论随胎龄增加,ndrg2表达水平增高。
- 侯双兴邓艳春王小木段丽刘新平药立波饶志仁
- 关键词：NDRG2免疫组织化学
- NDRG2在小鼠胚胎脑组织的表达特点被引量：2
- 2011年
- 目的:观察NDRG2 mRNA在小鼠胚胎脑组织的表达与分布。方法:采用胚胎期小鼠E10.5 d、E12.5 d、E16.5d和E18.5 d进行脑切片的原位杂交。结果:NDRG2 m RNA在小鼠胚胎发育各期均有持续性表达,主要定位于端脑、中脑、菱脑、间脑、眼原基、脊髓、小脑原基、海马原基、丘脑、下丘脑和许多神经核团,神经细胞定位主要集中在细胞质中。结论:脑内NDRG2作用贯穿了整个脑的发育阶段,提示该基因在小鼠胚胎组织发育过程中有重要作用。
- 刘丽娟史明侯双兴王莉杨丰邓艳春
- 关键词：NDRG2MRNA原位杂交小鼠
- NDRG2蛋白的毕赤酵母可溶表达与纯化被引量：1
- 2003年
- 目的 :酵母表达并纯化可溶性NDRG2蛋白 .方法 :从 pRSET A ndrg2重组质粒中扩增出 6his ndrg2融合基因 ,克隆入酵母表达载体 pPIC3.5K ;酵母重组表达载体pPIC3.5K 6his ndrg2电转化入毕赤酵母GS115 ,并进行营养缺陷筛选和G4 18抗性筛选 ;对高拷贝整合的重组酵母表达菌株诱导表达 ,可溶性表达产物经Ni NTA亲合层析纯化 .结果 :构建得到酵母融合重组表达载体 pPIC3.5K 6his ndrg2 ;经G4 18浓度梯度筛选得到串联整合 16个重组表达载体以上的重组酵母表达菌株 ;诱导后表达得到 6his NDRG2融合蛋白 ,并成功纯化得到可溶性表达产物 .结论 :表达并纯化得到可溶性NDRG2蛋白 ,为进一步研究NDRG2的结构与功能打下了必要的基础 .
- 张文红刘新平王琰韩月恒药立波
- 关键词：毕赤酵母基因表达
- Ndrg2基因及NDRG2蛋白的生物信息学分析被引量：16
- 2003年
- 目的 :对ndrg2 (n mycdownsreamregulatorgene 2 )基因调控区和NDRG2蛋白序列进行生物信息学分析 ,从结构上预测其功能 .方法 :运用internet网络上的数据库及程序 ,对ndrg2基因的调控区和NDRG2蛋白的二级结构进行生物信息学分析 .结果 :ndrg2基因调控区存在多种转录因子结合位点 ,功能主要涉及组织特异性表达调控 ,细胞生长发育相关基因和应激反应基因的表达调控等 ;NDRG2蛋白的结构属于α/β水解酶类折叠 ,其分类预测表明与细菌环氧化物水解酶的二级结构极为相似 .结论 :生物信息学分析提示NDRG2蛋白具有一定的酶活性 ,可能参与细胞抗氧化应激反应 ,内外源有毒物质的代谢 。
- 张文红刘新平王琰韩月恒药立波
- 关键词：NDRG2基因生物信息学分析
- NDR2蛋白在甲状腺乳头状腺癌及正常甲状腺组织中的表达及意义
- 2003年
- 目的:探讨人正常甲状腺及甲状腺癌组织中NDR2蛋白的表达及临床意义。方法:随机收集正常甲状腺及乳头状甲状腺癌病理标本,采用小鼠抗NDR2单克隆抗体的免疫组织化学ABC法,研究NDR2蛋白在人正常甲状腺及甲状腺乳头状腺癌中的表达,并结合图像分析比较NDR2蛋白在正常甲状腺组织与癌组织中含量的变化。结果:人正常甲状腺滤泡上皮细胞胞浆均呈现较强的阳性NDR2免疫反应,胞核中未见有阳性物质表达。乳头状腺癌细胞胞浆免疫反应阳性很弱,阳性率为23.3％,胞核呈阴性。正常甲状腺组NDR2免疫反应阳性率与甲状腺乳头状腺癌组差异有显著性(P<0.05)。图像分析结果显示,正常甲状腺组NDR2蛋白相对含量与甲状腺乳头状腺癌组差异有显著性(P<0.05)。结论:NDR2在正常甲状腺组织及甲状腺乳头状腺癌中表达差异有极显著性,推测NDR2可能参与了乳头状甲状腺癌的发病机制。进一步研究NDR2蛋白的功能有重要意义。
- 周洁刘新平姬秋和张文红
- 关键词：甲状腺乳头状癌甲状腺肿瘤免疫组织化学
- 人NDRG1的融合表达、纯化及抗体制备被引量：4
- 2003年
- NDRG1是在N myc缺陷的小鼠胚胎组织中发现的一异常高表达的新基因 .在研究高同型半胱氨酸血症引起动脉粥样硬化的机制时 ,在培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)中发现了人NDRG1 .为了研究人NDRG1的功能以及结构与功能之间的关系 ,用RT PCR技术 ,从人脑总RNA中克隆NDRG1cDNA ,进行序列测定后 ,将NDRG1插入pPROEXHTb表达载体中 ,转化E .coliDH5α感受态细胞 ,并在LB培养基中获得高效可溶表达 .表达的 6His NDRG1融合蛋白经Ni2 + NTA偶联的琼脂糖珠纯化 ,通过圆二色性分析其二级结构 ,结果为 :α螺旋 :2 3 6 ,β片层 :1 8 6 ,转角 :2 5 7,无规卷曲 :32 0 .用此融合表达的蛋白免疫家兔 ,制备得到高效价的抗体 ,利用固定于硝酸纤维素膜上的NDRG1抗原亲和吸附纯化抗血清提高了抗体的特异性 。
- 张健刘新平张伟吴国强沈岚王立峰苏金张万会药立波
- 关键词：圆二色性免疫血清抗体制备NDRG1基因
- ndrg2在人胎前脑发育期的表达特点被引量：11
- 2006年
- 目的系统分析ndrg2在胎前脑组织中表达分布的时空特点,以期明确ndrg2在胎前脑脑功能区的组织分布、细胞定位及表达趋势,为进一步研究其功能提供实验依据。方法收集引产4￣7月胎脑组织标本,分别进行组织石蜡切片和总RNA提取,应用免疫组化方法和RT-PCR技术检测ndrg2在蛋白质及mRNA表达水平变化规律。结果免疫组化结果表明,在上述胎前脑脑区神经元细胞胞浆中均有ndrg2蛋白不同程度的表达。RT-PCR结果显示,ndrg2mRNA在正常胎脑各脑区均有表达;随脑组织发育成熟,ndrg2表达水平增高,4月胎脑中海马ndrg2表达水平较高,而到7月额叶、顶叶则表达增强。以上结果表明,ndrg2基因在不同脑功能区广泛表达,但不同时期、不同胎脑功能区域表达有明显区别。结论在脑发育的过程中,ndrg2表达呈一定时空特点,ndrg2可能对神经细胞发育成熟有一定影响。
- 侯双兴邓艳春王小木段丽曹荣刘新平药立波饶志仁
- 关键词：NDRG2胎脑
- Ndrg2基因表达对胃癌细胞增殖调控及其机理的研究被引量：27
- 2003年
- 为研究Ndrg2基因在人类肿瘤发生发展中的作用 ,以不表达Ndrg2基因的胃癌细胞系HGC 2 7和表达Ndrg2基因的胃癌细胞系SGC 790 1作为对比材料 ,以Ndrg2基因转染HGC 2 7胃癌细胞系 ,以及用Ndrg2的反义寡核苷酸封闭SGC 790 1胃癌细胞系中Ndrg2基因的表达 .发现Ndrg2可以抑制HGC 2 7胃癌细胞的软琼脂集落形成 ,有一定诱导细胞凋亡的作用 ,对细胞周期蛋白E的表达有明显下调作用 .当封闭了SGC 790 1胃癌细胞中Ndrg2基因表达的软琼脂集落形成受到抑制 ,流式细胞仪检测发现此时的SGC 790 1细胞周期被阻滞在G1期 ,细胞周期蛋白D1和E表达下调 .Ndrg2基因对两种肿瘤细胞中的细胞外信号调节激酶 (ERK)和P38的表达也有不同的影响 .
- 刘新平邓艳春韩炯李剑王吉村李莹药立波
- 关键词：NDRG2基因胃癌细胞增殖细胞周期蛋白
- 兔抗人NDR2高效价抗血清的制备、纯化及鉴定被引量：15
- 2002年
- 目的 制备高效价的 NDR2抗体 .方法 构建p Rset- A- ndr2 ,p GEX- 4 T- 1- ndr2 - a和 p GEX- 4 T- 1- ndr2 - b三种重组表达质粒 ,并分别在大肠杆菌中诱导表达相应的融合蛋白 ;用全长 GST- NDR2蛋白免疫兔 ,然后用 GST- NDR2 - A和 GST- NDR2 - B片段加强免疫 ;对包涵体形式表达的 6 His-NDR2进行初步的纯化 ;利用固定于硝酸纤维素膜上的 NDR2抗原亲和吸附纯化抗血清 .结果 经免疫得到了高效价的兔抗人 NDR2多克隆抗血清 ,亲和纯化提高了 NDR2抗体的特异性 ;免疫组化表明 NDR2是一种胞浆蛋白 .结论 用全长NDR2蛋白免疫兔 ,再用片段加强免疫 ,可以提高蛋白的抗原性 ,制备得到高效价的抗体 .纯化后的特异性 NDR2抗体 ,为进一步研究
- 张文红刘新平王吉村韩月恒邓艳春周洁药立波
- 关键词：纯化免疫血清易感性特异性
