您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(31101463)

作品数:3 被引量:6H指数:1
相关作者:张学尧张建珍马恩波刘娇吴海花更多>>
相关机构:山西大学山西省农业科学院更多>>
发文基金:山西省自然科学基金国家自然科学基金山西省青年科技研究基金更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 2篇飞蝗
  • 1篇原核表达
  • 1篇真核
  • 1篇真核表达
  • 1篇杀虫
  • 1篇杀虫剂
  • 1篇羧酸酯酶
  • 1篇酯酶
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞色素
  • 1篇细胞色素P4...
  • 1篇细胞色素P4...
  • 1篇解毒
  • 1篇核表达
  • 1篇PCR
  • 1篇REAL
  • 1篇RNA干扰

机构

  • 2篇山西大学
  • 1篇山西省农业科...

作者

  • 2篇马恩波
  • 2篇张学尧
  • 2篇张建珍
  • 1篇张建琴
  • 1篇朱文雅
  • 1篇王建新
  • 1篇吴海花
  • 1篇郭亚平
  • 1篇刘娇

传媒

  • 1篇昆虫学报
  • 1篇应用昆虫学报

年份

  • 1篇2017
  • 1篇2013
3 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
飞蝗羧酸酯酶基因LmCarE25的体外重组表达
2013年
羧酸酯酶(Carboxylesterase,CarE)是一类在生物中广泛分布的多功能家族酶系,在昆虫抗药性形成机制中发挥重要作用。为探讨飞蝗Locusta migratoria(Meyen)羧酸酯酶基因LmCarE25的生物学功能,本文采用荧光实时定量PCR技术进行研究,发现其在飞蝗成虫各组织部位均有表达,其中胃盲囊、翅和肌肉中表达量较低,中肠、马氏管和脂肪体表达量较高。本文尝试在大肠杆菌和昆虫细胞体外重组表达该酶,构建重组表达载体pET32a-LmCarE25,SDS-PAGE结果显示,LmCarE25可在大肠杆菌BL21(DE3)和JM109中表达,蛋白分子量约为60 ku,但为包涵体;将LmCarE25基因插入真核表达载体pFastBacHTA中,借助Bac-to-Bac体系获得重组Bacmid,以sf9细胞系作为宿主细胞表达目的蛋白,Western-Blot检测结果显示,LmCarE25获得可溶性表达。上述结果为进一步深入研究飞蝗羧酸酯酶家族功能提供了基础资料。
王建新张学尧张建琴张建珍郭亚平马恩波
关键词:飞蝗羧酸酯酶PCR原核表达真核表达
飞蝗细胞色素P450基因LmCYP6FD3的表达及其在杀虫剂解毒中的作用被引量:5
2017年
【目的】研究飞蝗Locusta migratoria细胞色素P450基因的分子特性和生物学功能。【方法】搜索飞蝗转录组数据库,获得细胞色素P450基因cDNA序列,采用RT-PCR技术克隆目的基因cDNA全长序列。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术测定其在飞蝗5龄若虫不同组织(胃盲囊、前肠、中肠、后肠、体壁、精巢、卵巢、肌肉、血淋巴、脂肪体和马氏管)中及不同发育阶段(卵、1-5龄若虫及成虫)的表达水平。采用RNA干扰(RNAi)技术沉默飞蝗2龄若虫细胞色素P450基因,检测基因的沉默效率,并研究该基因干扰后,2龄若虫对杀虫剂马拉硫磷、西维因和溴氰菊酯3种杀虫剂的敏感性。【结果】克隆获得飞蝗细胞色素P450基因的cDNA全长序列(Gen Bank登录号:KT316378),将其命名为LmCYP6FD3,其核苷酸序列全长为1 563 bp,编码521个氨基酸。研究发现该基因在飞蝗5龄若虫马氏管中高表达,其次是后肠和脂肪体中,在其他组织中的表达量相对较低;对LmCYP6FD3在飞蝗不同发育阶段的表达进行检测,发现该基因在飞蝗整个发育阶段均有表达,在若虫期表达量较高。RNA干扰结合杀虫剂生物测定结果表明,LmCYP6FD3在RNA干扰24 h时的沉默效率最高;2龄若虫点滴接触西维因,RNAi处理组(dsLmCYP6FD3注射组)与对照组(ds GFP注射组)相比,死亡率提高了32%。【结论】克隆获得飞蝗LmCYP6FD3的cDNA全长序列,该基因在飞蝗马氏管中高表达,并可能参与西维因在飞蝗体内的解毒代谢。
朱文雅吴海花张学尧刘娇张建珍马恩波
关键词:细胞色素P450飞蝗RNA干扰杀虫剂
共1页<1>
聚类工具0