江苏省高校自然科学研究项目(05KJB180105) 作品数:10 被引量:29 H指数:4 相关作者: 吕广明 吴辉群 季达峰 韩笑 栗卓 更多>> 相关机构: 南通大学 北京市朝阳区第二医院 江苏省神经再生研究重点实验室 更多>> 发文基金: 江苏省高校自然科学研究项目 南通市科技局社会发展科技计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 自动化与计算机技术 更多>>
大鼠皮质脊髓束Luxol Fast Blue染色 被引量:10 2008年 目的:探讨显示大鼠皮质脊髓束的特殊染色方法。方法:选用正常成年SD大鼠延髓和脊髓冰冻切片,应用Luxol Fast Blue染色法进行染色。结果:Luxol Fast Blue染色后,在延髓和脊髓切片中可见灰质呈淡红色,白质呈蓝色,延髓锥体染成深蓝色。锥体中Luxol Fast Blue标记的深蓝色阳性纤维,经锥体交叉后至脊髓灰质后连合背侧,沿脊髓后索腹侧深层下行,至荐段后逐渐消失。在延髓锥体和脊髓颈、胸、腰段后索中,深蓝色的Luxol Fast Blue阳性纤维边界清晰,与周围结构区分明显。结论:运用Luxol Fast Blue染色可清楚显示大鼠皮质脊髓束在脊髓内的定位,是一种简便可靠的皮质脊髓束形态学研究方法。 吕广明 吴辉群 栗卓 刘苏 韩笑 季达峰关键词:皮质脊髓束 FAST BLUE 大鼠皮质脊髓束选择性横断损伤模型的建立 2008年 目的建立一种稳定可靠且简便实用的皮质脊髓束选择性横断损伤动物模型。方法选择在延髓锥体切断左侧锥体束,制作大鼠皮质脊髓束选择性横断损伤模型。采用Rivlin斜板实验评价模型的运动功能,运用Luxolfast blue(LFB)染色法、生物素化葡聚糖胺(BDA)神经示踪法和蛋白激酶Cγ(PKCγ)免疫组织化学染色法观察皮质脊髓束的形态学变化。结果皮质脊髓束损伤组大鼠术后右侧前后肢瘫痪,运动功能受限,Rivlin试验显示倾斜平面临界角度明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);损伤区未见LFB阳性神经纤维束通过;在延髓锥体交叉平面,仅见一束BDA或PKCγ阳性纤维束经右侧锥体交叉至脊髓后索,在左侧脊髓后索最深层,紧邻脊髓灰质后连合背侧下行至骶段,而在损伤平面以下,未见有BDA或PKCγ阳性纤维束经左侧锥体交叉至右侧,在整个脊髓后索的右侧半未见有BDA或PKCγ阳性纤维束。结论选择在延髓切断一侧锥体束,建立皮质脊髓束选择性横断损伤模型,方法简便实用,结果稳定可靠,是研究皮质脊髓束的可塑性和神经轴突再生的理想动物模型。 吕广明 刘苏 栗卓 吴辉群 韩笑 季达峰 秦建兵关键词:皮质脊髓束 脊髓损伤 蛋白激酶CΓ 免疫组织化学 采用Photoshop软件对成年SD大鼠脊髓中皮质脊髓束三维重建的研究 被引量:2 2008年 目的利用大鼠脊髓连续切片,结合三维重建工具软件对正常大鼠皮质脊髓束进行三维重建。方法制作正常成年SD大鼠脊髓连续横断切片,进行Luxol快蓝(LFB)染色并摄片,获得大鼠脊髓皮质脊髓束连续切片图像。在Photoshop软件环境下完成切片图像的配准、分割、灰度化。利用3D-DOCTOR软件进行阈值分割并对大鼠脊髓、脊髓灰质、双侧皮质脊髓束结构进行三维重建,在普通台式机(PC)上对重建结构进行任意角度的观察、切割和测量。结果重建出的大鼠脊髓、脊髓灰质、双侧皮质脊髓束具有立体感,大鼠皮质脊髓束于大鼠颈1节段(C1)~骶4节段(S4)走行于大鼠脊髓后索腹侧,紧贴灰质中间带背侧,呈逐渐变细的类圆柱状形态。在PC机中进行切割后可以对切割后剩余结构进行表面积和体积的数据测量。结论利用大鼠脊髓的连续LFB染色切片,结合计算机三维重建技术,能够进行大鼠皮质脊髓束的三维重建,并提供测量数据。 吕广明 吴辉群 汤乐民 韩笑 季达峰 顾晓松关键词:皮质脊髓束 连续切片 三维重建 PKCγ免疫反应定位小鼠皮质脊髓束的实验研究 2008年 目的探讨显示皮质脊髓束在成年小鼠脑和脊髓中定位分布的简便有效方法。方法运用蛋白激酶Cγ(PKCγ)免疫组织化学染色法,观察成年ICR小鼠脑和脊髓中皮质脊髓束的定位和分布情况。结果PKCγ免疫阳性产物分布于大脑运动皮层第V层锥体细胞胞体和轴突中,锥体细胞的阳性纤维经内囊、中脑大脑脚底、脑桥基底部、下行至延髓锥体中。在延髓下段,PKCγ阳性纤维经锥体交叉后进入对侧脊髓灰质后联合背侧,形成背侧皮质脊髓束,在脊髓白质的后索腹侧深层下行,至骶髓3-4节段以下逐渐消失。在整个脊髓前索和外侧索中未见有PKCγ阳性纤维。结论PKCγ特异地表达于脊髓后索皮质脊髓束中,提示PKCγ免疫组织化学法是一种显示和观察皮质脊髓束精确定位的有效方法。 吕广明 栗卓 吴辉群 韩笑 季达峰 刘苏关键词:皮质脊髓束 蛋白激酶CΓ 脊髓 免疫组织化学 小鼠 丽春红2R-亮绿染色法显示大鼠皮质脊髓束的实验研究 被引量:2 2006年 目的:探索显示和区分皮质脊髓束在大鼠脑干和脊髓内定位的染色方法。方法:通过丽春红2R-亮绿双重染色法对正常SD大鼠延髓、脊髓(颈5、胸10、腰3、骶2节段)组织切片进行染色。结果:丽春红2R-亮绿染色后,延髓和脊髓白质中神经纤维束轴索、髓鞘呈橙红色,灰质背景呈淡绿色,其中神经元呈绿色。在延髓锥体、锥体交叉中及在脊髓颈、胸段后索腹侧最深层可见皮质脊髓束染成橙红色,着色略深,与其背侧的薄束和腹侧的灰质界限分明、对比清晰。结论:丽春红2R-亮绿染色法可以清楚地显示成年大鼠皮质脊髓束在脑干和脊髓内的位置,为中枢神经损伤与修复研究提供一种简便、快速、可靠的神经纤维束定位染色方法。 栗卓 吕广明 吴辉群 刘苏 韩笑 季达峰关键词:神经髓鞘 皮质脊髓束 脊髓 冷冻连续切片重建数字人腰髓 被引量:1 2008年 目的:探讨数字人脊髓数字化问题,建立一种实用的脊髓三维重建方法。方法:对人腰髓节段的连续冷冻切片直接贴片,进行Luxol Fast Blue染色,采集切片图像并进行图像拼接,Photoshop 7·0软件对图像进行"图像灰度化"、"反相"、"对比度调整"、"图像缩小"等后处理,3D-DOCTOR 4·0软件进行表面重建和体重建。结果:重建出人腰髓节段及其内部的灰质结构具有立体感,并可在计算机上进行自由观察和测量。结论:利用人腰髓连续切片可以进行人体脊髓的三维重建。 吕广明 吴辉群 汤乐民 韩笑 季达峰 顾晓松关键词:虚拟人 连续切片 FAST BLUE 蛋白激酶Cγ在成年大鼠延髓和脊髓白质中的分布 被引量:4 2007年 目的观察蛋白激酶Cγ亚型(PKCγ)在成年大鼠延髓和脊髓白质内的分布。方法免疫组织化学ABC法显示PKCγ免疫阳性物质在延髓和脊髓颈、胸、腰、骶段白质内的表达和分布。结果PKCγ免疫阳性物质分布于锥体、锥体交叉及脊髓颈、胸、腰、骶段后索腹侧中;延髓和脊髓背角神经元中也有PKCγ免疫阳性物质存在。结论PKCγ免疫阳性反应产物广泛分布于成年大鼠延髓和脊髓白质内的皮质脊髓束中。PKCγ免疫阳性反应产物在延髓锥体和脊髓后索内的定位与大鼠皮质脊髓束的位置和走行一致,提示其在运动神经传导通路中可能起着重要作用。 刘苏 吕广明 栗卓关键词:蛋白激酶CΓ 皮质脊髓束 脊髓 免疫组织化学 丽春红2R-亮绿法在中枢神经纤维束髓鞘染色中的应用 被引量:5 2006年 目的:探索一种中枢神经纤维束髓鞘的染色方法。方法:应用丽春红2R-亮绿双重染色法,对正常SD大鼠脊髓组织进行染色。结果:丽春红2R-亮绿染色后,脊髓白质中神经纤维束轴索、髓鞘呈橙红色,灰质背景呈淡绿色,其中神经元呈绿色。结论:丽春红2R-亮绿法是显示中枢神经纤维束的一种简便、迅速、可靠染色法。 栗卓 吕广明 刘苏 吴辉群 韩笑 季达峰关键词:神经髓鞘 神经纤维束 脊髓 生物素化葡聚糖胺顺行追踪标记大鼠皮质脊髓束 被引量:3 2008年 目的:探讨生物素化葡聚糖胺(BDA)对皮质脊髓束(CST)示踪的应用价值。方法:采用成年SD大鼠40只,随机分为单侧锥体束损伤组(n=24)、假损伤组(n=8)和正常组(n=8)。在锥体交叉上方选择性切断左侧锥体建立单侧锥体束横断损伤模型。运用Rivlin斜板试验进行运动功能检测。在双侧感觉运动皮层多点分层立体定位注射BDA,BDA注射14天后取脑和脊髓切片进行ABC免疫组织化学染色显示BDA标记信号,观察皮质脊髓束的走行。结果:Rivlin斜板试验显示单侧锥体束横断损伤组倾斜平面临界角度变化明显小于正常对照组和假损伤组(P<0.05)。正常组和假损伤组大鼠BDA示踪显示BDA标记阳性细胞定位于双侧感觉运动皮层的锥体细胞,锥体细胞发出的BDA阳性纤维束对称分布于双侧皮层、内囊、大脑脚、脑桥基底部、延髓锥体中的皮质脊髓束内,继而经锥体交叉到脊髓后索,在双侧后索最深层、灰质后连合背侧下行至脊髓骶段。锥体束横断损伤大鼠在损伤部位以上可见双侧对称的BDA阳性纤维束,损伤平面以下在右侧延髓锥体和左侧脊髓后索中见有BDA阳性纤维束,损伤侧锥体和右侧脊髓后索中未见有BDA阳性纤维束。结论:BDA顺行示踪技术可以清楚地显示皮质脊髓束,对皮质脊髓束损伤与修复的形态学研究具有较好的应用价值。 季达峰 吕广明 刘苏 栗卓 吴辉群 韩笑 秦建兵关键词:皮质脊髓束 一种基于大鼠颈髓连续切片的计算机三维重建方法 被引量:5 2008年 目的以个人计算机(PC)为平台,探讨一种基于大鼠颈髓切片进行脊髓三维重建方法。方法制作正常SD大鼠颈髓节段包埋蜡块,于颈髓标本四周进行外定位标记,Leica石蜡切片机进行连续横断切片,每切3张,用CANON数码相机对蜡块中的颈髓标本及其外定位标记进行摄片,获得连续切片图像。所得图像进行排序,裁切,转换为灰度图像并进行背景不均匀校正后,利用3D-DOCTOR软件对每张图像上的颈髓、颈髓灰质及定位孔进行边缘提取,利用定位孔对连续图像进行自动配准,三维表面重建后在PC机上进行任意角度观察、切割和测量。结果利用大鼠颈髓连续切面图像重建得到大鼠颈髓白质和灰质,并对其进行测量,获得了表面积和体积等数据。结论利用石蜡包埋和"硬"定位技术可以获得颈髓节段连续横断切面图像,进行三维重建并对重建结构进行自由观察和测量。 吴辉群 吕广明 汤乐民 季达峰 顾晓松关键词:脊髓 石蜡切片 三维重建