安徽省自然科学基金(99044312)
- 作品数：22 被引量：81H指数：6
- 相关作者：汪渊周青桂淑玉张素梅朱华庆更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽医科大学第一附属医院蚌埠医学院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 真核细胞基因组DNA的制备被引量：3
- 2004年
- 汪渊胡若磊朱光能张素梅左莉卜丽佳朱华庆周青桂淑玉
- 关键词：真核细胞基因组DNA提纯
- 膀胱癌细胞p16抑癌基因失活的研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨膀胱癌中 p16基因失活情况。 方法 采用PCR、PCR SSCP和DNA甲基化分析技术等方法对 2 5例膀胱癌组织中 p16基因进行检测。 结果 2 5例膀胱癌标本中有 6例存在 p16基因纯合性缺失 ,缺失率为 2 4 % ;无 1例出现点突变 ;16例出现异常甲基化 ,检出率为 6 9.6 % (16 /2 3)。结论 外显子 2的纯合性缺失在安徽区域发生的膀胱癌中可能不是一个较频繁发生的事件 ;通过CpG岛异常甲基化失活可能是膀胱癌 p16基因失活的主要机制。
- 鲁文胜于德新周青方卫华汪渊
- 关键词：膀胱癌P16基因抑癌基因基因失活PCR
- 人非肌肉肌球蛋白轻链激酶N端表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2002年
- 目的 构建人非肌肉肌球蛋白轻链激酶 (hnmML CK)N端表达载体及其体外表达与表达产物的纯化。方法 用PCR方法扩增hnmMLCK的N端cDNA ,插入质粒 pBK cmv中构建成表达载体 ,转化入大肠杆菌XL1 blue ,经IPTG诱导表达 ,表达产物用电洗脱的方法初步纯化。结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为hnmMLCK重组质粒 ,SDS PAGE证实获得分子量为 2 1ku的融合蛋白 ,表达量约占菌体总蛋白的 2 1%。结论 成功构建了重组hnmMLCK表达载体 ,并在大肠杆菌中获得表达 。
- 胡若磊朱华庆周青桂淑玉汪渊
- 关键词：肌球蛋白轻链激酶聚合酶链反应大肠杆菌
- p16基因甲基化特异检测方法的建立及其初步应用被引量：12
- 2002年
- 目的 建立 p16基因中CpG岛的甲基化分析方法 ,即甲基化特异的PCR(methylation specificpolymerasechainreaction ,MSP)方法及其初步应用。方法 用亚硫酸氢钠修饰变性后的被测DNA ,随之进行甲基化、非甲基化特异的PCR扩增。应用MSP法分析白血病患者的白细胞 p16基因5′CpG岛的甲基化变异情况。结果 用加热法变性DNA ,亚硫酸氢盐修饰DNA ,WizardDNA纯化树脂除盐、纯化修饰后的DNA都获得了成功 ,并建立了MSP分析p16基因甲基化的方法。白血病患者的白细胞 p16基因的 5′CpG岛有一定比例的甲基化变异。结论 MSP是一种较为简便。
- 刘晓颖汪惠园鲁云霞周青桂淑玉夏瑞祥袁凌云汪渊
- 关键词：P16基因甲基化
- 多聚酶链反应-单链构象多态性分析基因点突变
- 2004年
- 汪渊朱光能左莉储兵卜丽佳周青桂淑玉
- 关键词：多聚酶链反应单链构象多态性分析基因点突变P53突变
- 瘦素在大鼠学习记忆中枢的分布被引量：3
- 2005年
- 目的 观察瘦素在大鼠中枢神经系统的分布。方法 采用HE和免疫组化SABC染色方法。结果 在SD大鼠的大脑皮质、海马、下丘脑、杏仁体、丘脑、胼胝体、缰核和内囊等处可观察到瘦素免疫反应阳性细胞。结论 瘦素广泛存在于大鼠大脑皮质、海马及杏仁体等与学习记忆密切相关部位。提示瘦素可能参与学习记忆活动。
- 王盛花贾雪梅柯红林吴学平陈晓蓉
- 关键词：瘦素大脑皮质阳性细胞杏仁体下丘脑胼胝体
- 急性淋巴细胞白血病p16基因纯合性缺失、点突变及启动子甲基化变异被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者p16基因的失活机制。方法 从29例患者外周血提取白细胞基因组DNA,采用PCR、PCR SSCP、MSP分析方法,对p16基因第二外显子的纯合性缺失、点突变及启动子区CpG岛的甲基化变异进行分析。结果 p16基因第二外显子的缺失率为27. 6% (8 /29),未见其点突变;p16基因启动子区CpG岛的甲基化率为13. 8% (4 /29)。结论 p16基因的失活和ALL的发生发展有一定的关系。
- 刘晓颖汪惠园周青袁凌云汪渊
- 关键词：基因P16基因缺失外显子
- 人内皮细胞特异性分子-1表达载体的构建、体外表达及初步纯化被引量：16
- 2002年
- 目的 探讨人内皮细胞特异性分子 1(hESM 1)表达载体的构建、体外表达及表达产物的初步纯化。方法 从人脐静脉内皮细胞中提取总RNA ,用反转录 PCR扩增出hESM 1的cDNA。插入质粒 pET 2 8b中构建成表达载体 ,转化入大肠杆菌BL 2 1,经IPTG诱导表达 ,表达产物用电洗脱的方法初步纯化。结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为含hESM 1的重组质粒 ,经SDS PAGE分析证实获得产物为分子量 2 3 80 8u的融合蛋白 ,表达量约占菌体总蛋白的 2 4%。结论 成功构建了重组hESM 1表达载体 ,并在大肠杆菌中获得表达 ,为进一步研究及临床应用奠定了良好基础。
- 张素梅王雪胡若磊朱华庆熊江霞周青桂淑玉汪渊
- 关键词：聚合酶链反应体外表达
- 人骨桥蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2002年
- 目的 构建人骨桥蛋白 (hOPN)表达载体 ,体外表达及表达产物的纯化。方法 培养人脐静脉内皮细胞 ,提取总RNA ,反转录合成cDNA第一链 ,以此cDNA为模板经PCR合成插入片段 ,连接至载体 pGEX 6P 1,转化到XL1 blue中进行诱导表达。表达产物经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳后 ,切下目的蛋白进行洗脱纯化。结果 构建的表达载体经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA测序 ,证明所构建的质粒是 pGEX 6P OPN。SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳发现该重组质粒经IPTG诱导后表达一种新的蛋白 (表达量为 16 7% ) ,这种蛋白不存在于诱导后的pGEX 6P 1表达产物中 ,纯化后蛋白纯度为 99%。结论 成功构建了hOPN表达载体 ,并进行体外表达。
- 王雪桂淑玉张素梅胡若磊朱华庆熊江霞周青汪渊
- 关键词：大肠杆菌聚合酶链反应基因表达骨桥蛋白
- 重组质粒在原核细胞中的转化被引量：4
- 2003年
- 汪渊王雪张素梅陈厚早朱华庆熊江霞储兵卜丽佳周青桂淑玉
- 关键词：重组质粒原核细胞生物转化转化率基因重组技术
