国家自然科学基金(30672464)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：刘景晶朱爱华金亮吴洁李泰明更多>>
- 相关机构：中国药科大学徐州师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 热休克蛋白保守性B细胞表位黏膜免疫可增强免疫应答(英文)
- 2008年
- 目的:通过分枝杆菌热休克蛋白保守性B细胞表位多次免疫小鼠,研究热休克蛋白65(HSP65)与动脉粥样硬化之间的关系。方法:PCR技术扩增出HSP65上与动脉粥样硬化密切相关的6个B细胞表位基因。将这6个表位的基因分成两组,分别与CTB基因相融合并在大肠杆菌中表达。两种蛋白表达产物经过分离、纯化、混合复性,复性后的蛋白经GM1-ELISA证明可在体外自组装成5聚体。用复性后的重组蛋白小剂量多次滴鼻免疫ICR小鼠,然后用大量的HSP65蛋白经皮下免疫,采集血样,ELISA检测小鼠血清中抗HSP65的抗体。结果:重组蛋白预免疫ICR小鼠后,可以使免疫组较对照组对随后的大量HSP65刺激产生更加强烈的免疫反应。结论:分枝杆菌热休克蛋白保守性B细胞表位经鼻黏膜的反复预免疫强化了小鼠对随后攻击性免疫的反应。
- 贾绍辉邓双玲熊祺琰张宇刘景晶曹荣月
- 关键词：热休克蛋白65B细胞表位
- 融合蛋白HSP65-6×P277在NOD鼠中降糖作用的机制研究(英文)
- 2009年
- 目的:探讨融合蛋白HSP65 -6×P277在NOD鼠中的降糖作用机制。方法:融合蛋白HSP65 -6×P277通过鼻腔给药方式,在不添加任何佐剂的情况下3次免疫4周龄雌性NOD小鼠。观察该融合蛋白对NOD小鼠血糖,细胞因子水平,抗体类型和胰腺炎严重程度的影响。结果:融合蛋白HSP65 -6×P277免疫组动物血清中含有高水平的IL-4和低水平的IL-2 ,P277特异性抗体类型主要为IgGl和IgG2b,IgG2a水平较低;T细胞增殖实验的培养上清中含有较高水平的IL-10和较低水平的IFN-γ;胰腺炎的严重程度和1型糖尿病的发病率显著降低。结论:诱导了Th2免疫反应可能是HSP65-6×P277预防1型糖尿病发生的作用机制之一。
- 金亮王宇朱爱华刘景晶
- 关键词：热休克蛋白65TH1/TH2细胞
- P277多肽融合热休克蛋白65提高抗1型糖尿病的作用被引量：4
- 2008年
- 为了提高P277肽抗1型糖尿病的作用,把P277肽融合在卡介苗热休克蛋白65的C端,构建了pET28a- HSP65-P277高效表达载体,在大肠杆菌中高效可溶性表达。利用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换柱层析分离纯化了融合蛋白HSP65-P277。使用HSP65-P277在没有任何佐剂存在的情况下免疫非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠,通过三次腹腔注射,每月收集被免疫动物的血清,血糖浓度用自动生化分析仪测定。结果显示HSP65-P277免疫组小鼠血糖平均值及糖尿病的累积发病率和其余组相比均有显著差异(P<0.01),融合蛋白HSP65-P277抗NOD小鼠糖尿病的作用显著高于单独的P277和HSP65。为进一步开发能用于临床的1型糖尿病疫苗提供了良好的设计思路,HSP65-P277极有可能进一步发展成为新的抗Ⅰ型糖尿病的疫苗。
- 朱爱华鲁勇金亮吴洁李泰明刘景晶
- 关键词：热休克蛋白1型糖尿病融合蛋白血糖
- L-天冬酰胺酶表面呈现对P277肽免疫原性及抗NOD小鼠糖尿病作用的影响(英文)
- 2007年
- 将P277多肽融合在L-天冬酰胺酶的C端,中间引入破伤毒素肽(TTP),重组嵌合酶AnsB-TTP-P277能以可溶性蛋白的形式表达于大肠杆菌周质内,且能保持大约80%的天然酶催化活力.用纯化的嵌合酶腹腔注射非肥胖性(NOD)小鼠,可成功诱导小鼠体内产生高水平抗P277抗体.研究表明,P277肽可呈现于L-天冬酰胺酶表面,有效地克服单独P277的弱免疫原性,激发机体产生较强烈的免疫反应.小鼠胰腺病理学切片也显示:重组嵌合酶AnsB-TTP-P277和单纯P277肽相比,能更有效地抑制NOD小鼠糖尿病的发生.
- 朱爱华刘文涛龙军吴洁刘景晶李泰明
- 关键词：L-天冬酰胺酶胰岛素依赖型糖尿病血糖
