山东省自然科学基金(ZR2009CQ033)
- 作品数：3 被引量：11H指数：3
- 相关作者：李有杰高宗华谢书阳张帅孙强更多>>
- 相关机构：滨州医学院滨州市中心医院山东大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家自然科学基金烟台市科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 顺铂致A549细胞miR-16与bcl-2表达的变化被引量：5
- 2011年
- 目的研究顺铂作用于A549细胞后,miR-16和bcl-2的表达变化,并探讨两者的相关性。方法采用MTT法测定顺铂对A549细胞的抑制率、锥虫蓝拒染法检测细胞凋亡率,倒置显微镜观察细胞形态,确定合适的药物浓度;然后提取细胞中的miRNA,用实时定量PCR技术定量分析miR-16在对照组细胞和加药组细胞中的表达变化;通过microRNA_org等分析软件预测miR-16的下游调控基因;采用Western blot方法分析细胞中bcl-2蛋白的表达变化。结果在顺铂诱导作用下,A549细胞凋亡率明显增加;miR-16在顺铂作用后的细胞中表达显著升高,而bcl-2蛋白显著低表达。结论顺铂可以促使肺癌A549细胞凋亡;miR-16具有抑癌基因活性,能负调控bcl-2蛋白的表达,参与顺铂致A549细胞死亡的作用。
- 李有杰孙强岳真郝青高宗华张丽霞谢书阳
- 关键词：BCL-2顺铂肺癌
- 去甲斑蝥素致凋亡白血病细胞基因表达的变化被引量：3
- 2010年
- 目的研究去甲斑蝥素(DMC)对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞凋亡的影响,探讨DMC致细胞凋亡后基因表达的变化。方法 20 mg.L-1DMC作用细胞36 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;提取细胞DNA,琼脂糖凝胶电泳检测凋亡细胞DNA改变;提取细胞总RNA,基因芯片技术检测基因表达谱变化;通过反转录(RT)-PCR、ELISA验证芯片部分基因表达变化。采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果 DMC处理K562细胞后,倒置显微镜下可见细胞状态变差,活细胞数目明显减少;DNA电泳后可见明显的阶梯状变化;在利用基因芯片技术检测的21 522个基因转录本中,共筛选出差异表达基因约2 300个,其中超过500个基因的表达明显升高,有350个基因表达显著降低;RT-PCR和ELISA结果显示,Bcl-2、E2F1和E2F3基因表达显著降低,RB1和P53表达显著增高,均与芯片结果一致。结论 DMC可致K562细胞凋亡,并可引起凋亡细胞相关基因表达变化。
- 李有杰张帅王萍玉高宗华王秀文谢书阳
- 关键词：去甲斑蝥素白血病细胞凋亡基因表达
- 反义核酸抑制miR-20、miR-106表达对293T细胞增殖的影响被引量：3
- 2010年
- 目的:通过反义核酸技术抑制miR-20、miR-106的表达,检测对293T细胞增殖的影响。方法:应用特异性针对miR-20、miR-106的反义核酸转染293T细胞,用形态学、流式细胞技术研究反义核酸对细胞增殖的抑制作用,用定量PCR和ELISA研究miRNA和相关靶基因的表达。结果:研究发现反义核酸可有效抑制miR-20和miR-106的表达,并明显抑制293T细胞的增殖;研究还表明反义miR-106可明显上调抑癌基因Rb的表达。结论:反义核酸通过抑制miRNA表达,上调抑癌基因Rb的表达,能明显抑制293T细胞增殖。
- 李有杰张帅高宗华张文娟谢书阳张鹏举姜安丽
- 关键词：MIRNA293T细胞细胞增殖基因表达
