国家自然科学基金(81060145)
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 相关作者：田晓滨李波胡如印孙立韩伟更多>>
- 相关机构：贵州省人民医院贵阳医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技攻关计划贵州省优秀科技教育人才省长资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 可重复使用的双腔骨生长检测盒的动物体内实验被引量：1
- 2012年
- 目的探讨可重复使用的双腔骨生长枪测盒置入贵州小型猪体内检测人工骨成骨能力的可行性．方法以2只贵州小型猪的舣侧眩骨和股骨近侧干骺端为实验检测部位。第1次手术2只动物双侧肱骨和股骨近侧干骺端均置入不填充任何材料的双腔骨盒作为空白对照组（n=8），第2次手术动物肱骨和股骨近侧于骺端置入的双腔骨盒一侧内腔填充重组合异种骨，另一侧内腔不填充任何材料作为实验组1（n=8）。第3次手术动物肱骨和股骨近侧干骺端置入的双腔骨盒一侧内腔填充重组合异种骨，另一侧内腔填充明胶海绵作为实验组2（n=8）。每次手术间隔2个月，更换骨盒内芯，对内芯填充物行肉眼观察和组织学观察，比较填充物的成骨情况、结果实验组骨盒一侧填充重组合异种骨内芯见灰白间红色组织，质地硬：空腔或填充明胶海绵内芯见褐色组织，质地软．光镜下．实验组填充重组合异种骨内芯见成骨材料周围有新生骨组织生成，另一侧空腔或填充明胶海棉侧内芯为纤维组织。结论可重复使用的骨生长检测盒可用于观察成骨材料促进骨组织生长能力。
- 孙立田晓滨田家亮胡如印薛建华昌磊伍旭林
- 关键词：动物
- pIRES-骨形态发生蛋白2质粒转染大鼠骨髓间充质干细胞后的持续表达被引量：8
- 2012年
- 背景:重组人骨形态发生蛋白2已被广泛应用于骨组织工程治疗骨缺损或骨不连,但是直接应用外源性骨形态发生蛋白2修复骨缺损效果不理想。目的:观察转染pIRES-骨形态发生蛋白2的大鼠骨髓间充质干细胞持续合成并分泌骨形态发生蛋白2的情况。方法:全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,脂质体介导下将真核表达质粒pIRES-骨形态发生蛋白2导入大鼠骨髓间充质干细胞。结果与结论:ELISA结果显示,随着pIRES-骨形态发生蛋白2转染时间的延长,大鼠骨髓间充质干细胞分泌的骨形态发生蛋白2逐渐增多,至转染后10～12d达高峰,转染后15d,仍可见较多骨形态发生蛋白2的表达。说明转染pIRES-骨形态发生蛋白2的大鼠骨髓间充质干细胞可持续稳定分泌骨形态发生蛋白2。
- 孙立田晓滨胡如印王远政田家亮韩伟李波袁军聂瑛洁
- 关键词：骨形态发生蛋白2骨髓间充质干细胞细胞转染干细胞
- miRNA-206介导BMSCs分化为软骨细胞及对骨关节炎模型的影响被引量：6
- 2019年
- 目的探讨miRNA-206介导骨髓间充质干细胞(BMSCs)分化为软骨细胞及其在骨关节炎(OA)模型中的可能作用。方法2017年1月至2018年7月,分离大鼠BMSCs,流式细胞术检测CD90、CD45,鉴定BMSCs的纯度。使用慢病毒载体将miRNA-206或miRNA-206抑制剂转染到BMSCs,地塞米松诱导14 d,阿利新蓝染色和II型胶原免疫染色检测成软骨分化的能力。MTT法检测BMSCs的增殖能力,Western blot检测成软骨细胞中标志蛋白Aggrecan、Col II、Sox9、Runx2的表达水平。RT-PCR检测成软骨细胞中标志基因Sox9 mRNA的表达水平。在OA大鼠模型中尾静脉注射慢病毒载体转染miRNA-206或miRNA-206抑制剂,Western blot检测软骨形成的标志蛋白Aggrecan、Col II、Sox9、Runx2。结果分离的BMSCs的纯度为(80.7±3.9)%;miRNA-206转染BMSCs可以促进细胞增殖能力,增加其成软骨分化;Western blot结果表明miRNA-206转染组可以增加软骨细胞中标志性蛋白Aggrecan、Col II、Sox9的表达,下调Runx2的表达。同时RT-PCR结果表明miRNA-206上调BMSCs成软骨细胞标志基因Sox9 mRNA的表达。与OA组比较,miRNA-206可以增加软骨组织中信号蛋白Aggrecan、Col II、Sox9的表达(P<0.05),下调Runx2的表达水平(P<0.05)。结论miRNA-206可以正调控BMSCs分化为软骨细胞,增加细胞增殖能力,上调软骨标志蛋白Aggrecan、Col II、Sox9的表达,下调Runx2,并可能增加OA大鼠模型中成软骨能力。
- 杨震佘荣峰李博李洋陈彪陈克州李波田晓滨
- 关键词：骨髓间充质干细胞骨关节炎成软骨分化
- 骨生长定量检测动物模型的可行性研究被引量：1
- 2013年
- 目的自制骨生长定量检测盒检测人工成骨材料的成骨效能，探讨骨生长定量检测动物模型的可行性。方法取贵州小型猪8头，将自制的可重复使用的骨生长定量检测盒植入四肢骨骼中。第1次手术植入骨生长定量检测盒建模，骨生长定量检测盒双腔内芯均不填充任何材料；第2次手术更换骨生长定量检测盒内芯，一侧腔室填充重组合异种骨为实验组，另一侧腔室空置为对照组；第3次手术更换骨生长定量检测盒内芯，两侧腔室填充同第2次手术；第4次手术处死动物，取出骨生长定量检测盒。每次手术间隔12周。对第3、4次手术取出的骨生长定量检测盒内芯中的实验组及对照组标本行组织学检测（新生骨骨小梁宽度和骨小梁面积百分数）与生物力学检测（抗压极限强度及杨氏模量）。结果实验组内芯有灰白色组织生长，镜下可见骨组织形成；对照组空腔内有褐色组织生长，镜下仅有纤维组织生成。实验组骨小梁宽度为（128．15±39．96）mm、骨小梁面积百分数为31.38％±2．67％，与对照组的差异有统计学意义。不同动物个体间、前肢与后肢、左侧肢与右侧肢的骨小梁宽度、骨小梁面积百分数、抗压极限强度及杨氏模量的差异均无统计学意义。结论骨生长定量检测盒内的人工成骨材料具有成骨诱导作用；可重复使用的骨生长定量检测盒动物模型可用于人工成骨材料诱导成骨效能的定量检测；动物模型的不同个体及不同实验部位对人工成骨材料的诱导成骨效能无明显影响。
- 孙立伍旭林田晓滨田家亮胡如印韩伟李波李建扬杨先腾
- 关键词：骨形态发生蛋白质类
- BMP2、VEGF165双基因修饰的小鼠BMSCs复合人工骨的体内诱导成骨被引量：1
- 2014年
- 目的观察BMP2、VEGF165双基因转染的小鼠BMSCs复合自固化磷酸钙人工骨后的异位诱导成骨能力。方法脂质体介导下将含BMP2、VEGF165双基因的真核表达质粒pIRES转染小鼠BMSCs，转染空白质粒作阴性对照。用免疫组织化学和Western blot方法观察BMP2和VEGF165双基因在小鼠BMSCs内的表达；以自固化磷酸钙人工骨为支架，建立真核表达质粒pIRES—BMP2-VEGF165双基因修饰的组织工程骨植入小鼠右侧股骨肌袋内；将复合转染空白质粒小鼠BMSCs的自固化磷酸钙人工骨植入小鼠左侧股骨肌袋内。于术后第3天、第2，4，6周进行X线摄影对比后处死小鼠，取肌袋内组织行病理切片染色，观察成骨情况。结果小鼠BMSCs在转染BMP2、VEGF165基因后相关蛋白显著表达，由真核表达质粒pIRES—BMP2-VEGF165双基因修饰的组织工程骨在x线和病理学检查中相对于复合转染空白质粒小鼠BMSCs的组织工程骨具有更明显的异位成骨能力。结论由BMP2、VEGF165双基因质粒构建的组织工程骨有明显的异位成骨能力。
- 孙立姜小峰田晓滨田家亮杨先腾胡如印张一韩伟陈涛聂英洁袁军
- 关键词：血管内皮生长因子类异位成骨
- 双基因活化纳米骨浆的体内成骨被引量：3
- 2014年
- 背景:前期实验构建了骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子双基因活化纳米骨浆。目的:观察骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子双基因活化纳米骨浆在动物体内成骨的基因表达和骨形成效果。方法:取昆明小鼠24只,在其中12只右侧大腿后群肌袋内注入骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子+纳米骨浆,左侧大腿后群肌袋内注入空白质粒+纳米骨浆或纳米骨浆;在剩余12只小鼠右侧大腿后群肌袋内注入骨形态发生蛋白2+纳米骨浆,左侧大腿后群肌袋内注入空白质粒+纳米骨浆或纳米骨浆。术后2,4周取材作影像学检查、组织学观察和分子生物学检测。结果与结论:术后各时间点骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子+纳米骨浆组、骨形态发生蛋白2+纳米骨浆组均有骨样组织形成;骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子+纳米骨浆组局部有明显骨形态发生蛋白2和血管内皮生长因子的mRNA表达,并且碱性磷酸酶水平、成骨速度及新生骨量明显优于骨形态发生蛋白2+纳米骨浆组(P<0.05);空白质粒+纳米骨浆组、纳米骨浆组无明显成骨表现。表明纳米骨浆经骨形态发生蛋白2/血管内皮生长因子质粒或骨形态发生蛋白2质粒活化后,在体内具有了一定的成骨能力,且前者在成骨速度和质量方面较后者明显增强。
- 张一孙立简月奎胡如印田晓滨李波韩伟
- 关键词：生物材料骨缺损骨形态发生蛋白2血管内皮生长因子国家自然科学基金
