国家自然科学基金(30900498)
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- rTFF3、rIgGFcBp和rMuc2在大鼠肠道黏液层中的分布
- 2010年
- 目的探索3种杯状细胞来源分子rTFF3、rMuc2和rIgGFcBp在结肠黏液层中的分布特点。方法雄性SD大鼠5只,采用Carnoy固定液固定结肠黏膜,AB-PAS染色验证不同黏液层的组织结构。通过轻吸、轻刮分别收集疏松层、致密层黏液和底层黏膜标本,加入不含DTT的2×SDS-PAGE上样缓冲液沸水浴提取全部蛋白。冷却至室温后,统一可溶性蛋白提取液体积,将不同黏液层等份样品进行还原或非还原SDS-PAGE,并对rTFF3、rMuc2和rIgGFcBp进行蛋白质印迹分析。结果两层肠道黏液均含rTFF3的250kD复合物和6kD单体,以疏松层明显;在疏松层和致密层黏液中未检测到55kD复合物。rIgGFcBp连续分布于黏液层,在非还原情况下,其分子量为214kD以上;在还原情况下,其分子量分别为258kD、214kD和140kD。rMuc2的分布模式与rIgGFcBp相似,以214kD以上的多聚体分布于黏液层,还原后转变为278kD和164kD的亚单位。结论rTFF3以单体和复合物的形式分布于疏松层和致密层黏液,其复合物可能与黏液的结构和功能相关;rIgGFcBp、rMuc2均以复合物形式分布于黏膜全层,推测两者均为黏液的结构性成分。
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- 关键词：黏蛋白类黏液
