烟台市科学技术发展计划项目(2004221)
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 相关作者：初永丽李爱敏孙永玉邱红玉姜学强更多>>
- 相关机构：烟台毓璜顶医院青岛大学华中科技大学更多>>
- 发文基金：烟台市科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 干扰素-γ加强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抑制神经母细胞瘤细胞的作用被引量：3
- 2006年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人神经母细胞瘤的作用及干扰素-γ(IFN-γ)对新型凋亡分子TRAIL抗瘤活性的影响,并探讨其影响机制。方法应用MTT分析和流式细胞仪研究TRAIL对人神经母细胞瘤细胞的抑制作用及IFN-γ对TRAIL抗瘤活性的影响。用RT-PCR方法检测IFN-γ作用48h后,Caspase-8-mRNA的表达。结果TRAIL(10,50,100μg/L)单独作用、IFN-γ(1000U/mL)单独作用后,对SY5Y细胞的增殖抑制率分别为(4·38±0·89)%、(3·54±1·66)%、(5·03±1·26)%、(5·33±2·06)%;凋亡率分別为(5·18±3·33)%、(5·26±3·64)%、(5·00±2·88)%、(8·14±7·35)%。IFN-γ(1000U/mL)与TRAIL(100μg/L)联合作用后,对SY5Y细胞的增殖抑制率为(41·22±7·09)%;凋亡率为(21·29±6·20)%。RT-PCR方法发现IFN-γ作用48h后Caspase-8-mRNA的表达明显上调。结论神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y对TRAIL不敏感,IFN-γ可以明显提高TRAIL对神经母细胞瘤细胞的敏感性,其发生机制可能是通过IFN-γ上调Caspase-8-mRNA的表达而实现的。
- 李爱敏李春艳于惠芹初青孙洪亮
- 关键词：神经母细胞瘤IFN-Γ
- 5-氮杂胞苷增强阿霉素对神经母细胞瘤细胞的抗瘤活性被引量：2
- 2007年
- 目的许多神经母细胞瘤细胞系及肿瘤组织标本中caspase-8表达缺失,caspase-8基因沉寂的主要原因是其启动子区域高度甲基化。该文探讨去甲基化药物5-氮杂胞苷对caspase-8表达及对化疗药阿霉素抗人神经母细胞瘤细胞作用的影响及其影响机制。方法应用RT-PCR方法检测5-氮杂胞苷作用前后SH-SY5Y细胞中caspase-8 mRNA水平变化。MTT分析研究5-氮杂胞苷与化疗药阿霉素联合应用前后人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的存活率,以及加入caspase-8活性抑制剂后存活率的变化。结果RT-PCR方法发现SH-SY5Y细胞株不表达caspase-8 mRNA,5-氮杂胞苷作用3d后可检测到caspase-8 mRNA表达,5d后表达较第3天增加;5-氮杂胞苷与不同浓度阿霉素(0.05,0.1,0.25,0.5μg/mL)联合应用后SH-SY5Y细胞存活率为(77.61±7.30)%,(57.35±6.64)%,(46.25±4.46)%,(35.59±5.12)%,同一浓度单独应用阿霉素组细胞存活率为(94.89±4.15)%,(80.60±8.50)%,(64.48±4.92)%,(52.32±6.71)%,5-氮杂胞苷与阿霉素联用组细胞存活率明显低于单用阿霉素组,差异均有显著性。caspase-8抑制剂组与同一浓度的5-氮杂胞苷+阿霉素组比较,细胞存活率明显增加,依次为(92.95±3.48)%,(78.39±4.28)%,(62.31±6.50)%,(49.92±5.77)%,差异均有显著性。结论阿霉素对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y具有增殖抑制作用,5-氮杂胞苷可以增强阿霉素的抗瘤活性。其发生机制可能是通过上调caspase-8 mRNA的表达而实现的。
- 刘建秋李爱敏张继红
- 关键词：神经母细胞瘤CASPASE-85-氮杂胞苷阿霉素
- γ干扰素与阿霉素联用对成神经细胞瘤细胞生长及凋亡的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨γ干扰素(IFN-γ)对阿霉素抗人成神经细胞瘤细胞作用的影响,并探讨其影响机制。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)分析和流式细胞仪,研究IFN-γ与化疗药阿霉素联合应用前后人成神经细胞瘤细胞SH-SY5Y的存活率及凋亡率;免疫组化方法检测IFN-γ作用前后半胱氨酸蛋白酶-8(caspase-8)蛋白的表达。结果阿霉素(0.03,0.10,0.30μg/ml)单独作用24h后,SY5Y细胞的存活率分别为(95.62±13.03)%,(82.62±7.94)%和(64.84±9.19)%,各组间差异显著。IFN-γ(10,100,1000U/ml)单独作用48h后,SY5Y细胞的存活率分别为(98.37±11.25)%,(97.15±5.36)%和(98.84±7.41)%,各组间差异无显著性。IFN-γ(1000U/ml)与不同浓度的阿霉素(0.03,0.10,0.30μg/ml)联合作用后,SY5Y细胞的存活率同单独应用阿霉素组比较明显下降,差异有显著性;阿霉素(0.30μg/ml)单独作用24h,SH-SY5Y的凋亡率为(22.00±6.55)%,IFN-γ(1000U/ml)单独作用48h,凋亡率为(8.22.±4.00)%。二者联合作用后,凋亡率较单用阿霉素组比较明显升高,差异有显著性;免疫组化方法发现SH-SY5Y细胞株不表达caspase-8,IFN-γ作用48h后caspase-8表达阳性。结论阿霉素对成神经细胞瘤细胞SH-SY5Y具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,IFN-γ可以使其作用明显增强。其发生机制可能是通过IFN-γ上调caspase-8蛋白的表达而实现的。
- 李爱敏于惠芹初青孙洪亮
- 关键词：神经母细胞瘤多柔比星
- PCOS患者IRS-2及酪氨酸磷酸化的表达被引量：1
- 2007年
- 目的研究多囊卵巢综合征患者脂肪组织胰岛素受体底物-2蛋白的表达及其酪氨酸磷酸化,探讨其在多囊卵巢综合征产生胰岛素抵抗中的作用。方法采用放射免疫法检测多囊卵巢综合征胰岛素抵抗组(24例)、多囊卵巢综合征非胰岛素抵抗组(15例)及对照组(20例)血清空腹胰岛素的浓度;葡萄糖氧化酶法测定血浆空腹血糖;稳态模型计算胰岛素抵抗指数;Western blot方法检测胰岛素受体底物-2蛋白的表达,应用免疫沉淀及增强化学发光法检测酪氨酸磷酸化程度。结果①多囊卵巢综合征胰岛素抵抗组患者血清空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数均显著高于多囊卵巢综合征非胰岛素抵抗组与对照组(F=66.25,P<0.01;F=97.31,P<0.01);多囊卵巢综合征非胰岛素抵抗组患者血清空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数亦显著高于对照组(均P<0.05);②多囊卵巢综合征胰岛素抵抗组、多囊卵巢综合征非胰岛素抵抗组及对照组3组相比较,胰岛素受体底物-2蛋白表达无显著性差别;③多囊卵巢综合征胰岛素抵抗组胰岛素受体底物-2蛋白质酪氨酸磷酸化程度显著降低(F=48.12,P<0.05)。结论多囊卵巢综合征患者脂肪组织胰岛素受体底物-2蛋白质酪氨酸磷酸化程度降低,可能是其产生胰岛素抵抗的机制之一。
- 崔青初永丽冯桂娇姜学强
- 关键词：脂肪组织胰岛素受体底物-2免疫沉淀
- IRS-1 IRS-2蛋白质在PCOS患者脂肪组织中的表达被引量：4
- 2007年
- 目的研究多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者脂肪组织胰岛素受体底物-1(Insulin receptor substeate-1,IRS-1)及胰岛素受体底物-2(Insulin receptor substeate-2,IRS-2)蛋白的表达,探讨PCOS产生胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)的分子机制。方法采用放射免疫法检测PCOSIR组(20例)、PCOS非IR组(15例)及对照组(20例)血清空腹胰岛素(Fasting insulin,FIN)的浓度;采用葡萄糖氧化酶法测定血浆空腹血糖(Fasting plasma glucose,FPG);采用HOMA(Homeostasis model assessment,HOMA)模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用Western blot方法检测IRS-1及IRS-2蛋白的表达。结果(1)PCOS IR组患者血清FIN及HOMA-IR均显著高于PCOS非IR组与对照组(均P<0.05);PCOS非IR组患者血清FIN及HOMA-IR亦显著高于对照组(均P<05);(2)PCOSIR组与PCOS非IR组及对照组相比,IRS-1蛋白表达量明显下降(P<0.05),而IRS-2蛋白表达无显著性差别。结论PCOS患者脂肪组织IRS-1蛋白表达的下降所导致的受体后信号转导障碍可能是其产生胰岛素抵抗的机制之一。
- 初永丽邱红玉姜学强孙永玉
- 去甲基药5-氮杂胞苷对Caspase-8缺乏的神经母细胞瘤细胞化疗敏感性的影响
- 2010年
- 目的探讨去甲基药5-氮杂胞苷能否恢复神经母细胞瘤(NB)细胞中Caspase-8的表达水平,从而提高NB细胞SY5Y对常用化疗药物依托泊苷的敏感性。方法采用反转录-PCR(RT-PCR)技术检测5-氮杂胞苷作用前后Caspase-8mRNA的表达。Elivi-sion二步法检测5-氮杂胞苷作用前后SY5Y细胞中Caspase-8蛋白的表达。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Caspase-8缺乏的NB细胞中加入化疗药依托泊苷后细胞存活率,比较加入5-氮杂胞苷后再加入依托泊苷后细胞存活率的变化。结果 RT-PCR方法未检测到SY5Y细胞中Caspase-8mRNA表达,5-氮杂胞苷单独作用3d可以检测到Caspase-8mRNA表达,5d组Caspase-8mRNA表达较3d组明显增强,且Caspase-8mRNA表达水平随5-氮杂胞苷水平增高而增高。Elivision二步法检测SY5Y细胞中Caspase-8蛋白表达阴性,5-氮杂胞苷作用3d后Caspase-8蛋白表达呈阳性。MTT法检测发现不同质量浓度的依托泊苷(0.1、0.3、1.0、2.5)mg.L-1单独作用24h组细胞存活率分别为94.16%±5.89%、76.46%±5.83%、44.31%±5.05%、36.15%±5.71%;5-氮杂胞苷+同质量浓度依托泊苷组细胞存活率分别为84.23%±6.95%,61.00%±4.98%,31.64%±3.84%,23.75%±1.89%,联合作用组细胞存活率较单独作用组细胞存活率明显下降,其差异均有统计学意义(Pa<0.01)。结论 SY5Y细胞不表达Caspase-8mRNA及蛋白,5-氮杂胞苷可诱导SY5Y细胞Caspase-8mRNA及蛋白表达,且随时间延长,Caspase-8mRNA表达随之增加。依托泊苷对NB细胞SY5Y具有增殖抑制作用,5-氮杂胞苷可增强其对SY5Y的增殖抑制作用,并提高化疗的敏感性。
- 周广玉李爱敏初清王晓莉
- 关键词：神经母细胞瘤5-氮杂胞苷
- PCOS患者脂肪组织IRS-1、IRS-2蛋白表达及其酪氨酸磷酸化的研究被引量：4
- 2007年
- 目的:研究多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者脂肪组织胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)及胰岛素受体底物-2(insulin recep-tor substrate-2,IRS-2)蛋白的表达及其酪氨酸磷酸化,探讨PCOS产生胰岛素抵抗(insulinresistance,IR)的分子机制。方法:用放射免疫法检测各实验组血清促黄体生成素(luteini-zing hormone,LH)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)、睾酮(testosterone,T)、血清空腹胰岛素(fasting insulin,FIN)的水平;用葡萄糖氧化酶法测定血浆空腹血糖(fast-ing plasma glucose,FPG);用HOMA(homeostasis model assessment,HOMA)模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);用Western blot检测IRS-1及IRS-2蛋白的表达,应用免疫沉淀及增强化学发光法检测二者的酪氨酸磷酸化程度。结果:(1)PCOS IR组患者血清LH、LH/FSH、T、FIN及HOMA-IR均显著高于PCOS非IR组与对照组(均P(0.05);(2)PCOSIR组与PCOS非IR组及对照组相比,IRS-1蛋白表达量明显下降(P(0.05),IRS-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);(3)PCOS IR组IRS-1及IRS-2蛋白质酪氨酸磷酸化程度显著降低(均P(0.05)。结论:PCOS患者脂肪组织IRS-1蛋白表达下降,IRS-1及IRS-2蛋白质酪氨酸磷酸化程度降低,由此导致的受体后信号转导障碍可能是产生胰岛素抵抗的机制之一。
- 初永丽邱红玉孙永玉李旻李红发
- 关键词：胰岛素抗药性胰岛素受体底物-1酪氨酸
- PCOS患者血浆抵抗素与胰岛素抵抗的关系被引量：1
- 2006年
- 目的探讨血浆抵抗素水平与多囊卵巢综合征(PCO S)患者胰岛素抵抗(IR)的关系。方法对35例PCO S患者及40例健康者(对照组)采用EL ISA方法检测血浆抵抗素,放免法检测促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)及空腹胰岛素(F IN),氧化酶法检测空腹血糖(FPG),计算胰岛素抵抗指数(HOM A-IR)。结果PCO S组血浆抵抗素、LH、LH/FSH、F IN、HOM A-IR显著高于对照组(P均<0.05);PCO S组血浆抵抗素与FPG、F IN、HOM A-IR、LH及LH/FSH呈显著正相关(P均<0.05)。结论抵抗素参与PCO S患者的IR发生过程,可作为一种新的敏感指标评价PCO S患者的IR程度。
- 宋志云初永丽
- 关键词：抵抗素空腹血糖空腹胰岛素胰岛素抵抗
