国家自然科学基金(81260619)
- 作品数：4 被引量：12H指数：3
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- 罗汉果GAPDH基因的克隆及其在基因表达分析中的应用被引量：3
- 2014年
- 目的克隆罗汉果甘油酸-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH,EC 1.2.1.12)基因,分析其在基因表达定量研究中其作为内部参照基因的可行性。方法采用同源克隆和cDNA末端快速克隆技术,以罗汉果cDNA为模板扩增GAPDH基因的保守区片段。结果获得了罗汉果GAPDH保守区序列cDNA,命名为SgGAPDH(GenBank注册号:KC410810),序列长度为627 bp,编码209个氨基酸的多肽。系统发育分析表明,SgGAPDH属于植物甘油酸-3-磷酸脱氢酶家族。半定量PCR分析表明罗汉果GAPDH基因在不同组织中表达很稳定。以其作为内部参照基因,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)研究了异戊烯基焦磷酸异构酶(Isopentenyl-diphosphate delta isomerase)的组织表达规律。结果显示SgGAPDH具有良好的扩增效果和重现性。结论首次克隆了罗汉果GAPDH基因,明确了该序列在基因表达分析中的内参照作用,为罗汉果甜苷生物合成基因的研究提供了条件。
- 余汇蒋向军覃宇燕王骏韩艺璇吴琼
- 关键词：内参基因实时荧光定量PCR
- 西洋参环氧角鲨烯环化酶基因的克隆、分布与分析被引量：3
- 2013年
- 目的克隆西洋参皂苷合成下游途径关键酶-环氧角鲨烯环化酶(oxidosqualene cyclases,OSC,EC 4.2.1.B2),分析基因功能及其在不同组织中的表达。方法采用大规模ESTs测序和cDNA末端扩增(RACE)技术,对西洋参中参与达玛烷皂苷合成的环氧角鲨烯环化酶基因(OSC)进行克隆和研究。结果获得了西洋参环氧角鲨烯环化酶(OSC)基因全长cDNA,命名为PqDS(GenBank注册号:GU997679),其核苷酸序列长度为2 310 bp,含有1个开放阅读框编码769个氨基酸的蛋白。保守结构域搜索显示PqDS含有环氧角鲨烯环化酶(OSC)共有的活性位点和保守基序。信号肽分析(Singal P3.0)表明西洋参PqDS属于非分泌型蛋白。采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)研究了PqDS基因在各个器官中的表达,结果显示在花中高表达,根、叶和茎中表达量相对较低。结论首次克隆了西洋参环氧角鲨烯环化酶(PqDS)基因全长序列,为研究该酶在植物体内的表达、功能与作用机制奠定了基础。
- 吴琼韩艺璇张建清
- 关键词：西洋参分子克隆实时荧光定量PCR
- 项目驱动教学在药用植物学教学中的研究与应用被引量：4
- 2014年
- 针对传统药学人才培养模式下学生实践能力薄弱的状况,开展了药用植物学教学中项目驱动教学的实践。结合教学实践,阐述了项目驱动教学模式的理论基础、内容框架、主要特点和应用方法,指出了不足和解决办法。
- 吴琼韩艺璇
- 关键词：项目驱动教学药用植物学教学改革
- 《药用植物学》实践教学改革的探索被引量：2
- 2014年
- 针对传统药学人才培养模式下学生实践能力薄弱的状况,开展了药用植物学实践教学改革。通过强化药学本科生基本功训练,加强药用植物学与生药学的内在联系,建立项目驱动教学模式,鼓励参加社会实践,探索培养更多适合时代发展需要的药学专业人才。
- 吴琼吴卫马新业
- 关键词：药用植物学实践教学教学改革
