国家自然科学基金(30000198)
- 作品数：10 被引量：40H指数：4
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- 石蜡切片中BCL-6抗原失活机制及修复
- 2001年
- 目的 探讨石蜡切片中BCL 6抗原失活机制及修复的最佳方法 .方法 淋巴组织反应性增生 11例石蜡切片分别用二乙胺四乙酸 (EDTA)、柠檬酸、碳酸钠及去离子水 4种与钙离子结合力不同的修复液 ,结合高压、微波和煮沸 3种不同方法修复后 ,比较检出的BCL 6阳性率及强度 .结果 BCL 6阳性率由高至低依次为 :EDTA 0 .73>柠檬酸 0 .45 (P<0 .0 1) >碳酸钠 0 .12 (P <0 .0 1) ,去离子水组无 1例阳性 .高压修复阳性率 0 .5 5 >微波修复 0 .2 8和煮沸修复 0 .12 (P <0 .0 5 ) .不同修复液与高压结合修复检出BCL 6阳性率及强度 :EDTA与柠檬酸阳性率分别为 1,0 .82 (P >0 .0 5 ) ,高于碳酸钠组 (0 .36 )和去离子水组 (0 ) (P <0 .0 1) .EDTA组强阳性占 0 .82 ,显著高于其他各组 (P <0 .0 1) .结论 EDTA结合高压是修复BCL 6抗原的理想方法 ,钙离子的参与可能是甲醛固定后BCL
- 张永清黄高昇赵一岭王哲闫庆国郭英
- 关键词：抗原修复BCL-6淋巴细胞增生
- 2-(3羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖对人胃癌细胞系(SGC-7901)的诱导凋亡作用被引量：4
- 2004年
- 目的 观察2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COADG)体外诱导人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用,探讨其可能作用机理。方法 采用MTT法,筛选药物作用最佳浓度。用流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳分析诱导凋亡前后的细胞DNA含量分析诱导凋亡前后的细胞DNA含量,透射电镜观察凋亡细胞的超微结构。结果2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖能明显抑制胃癌细胞的增长,MTT法显示抑制程度具有时间和剂量效应关系,统计组间比较差异有显著性;流式细胞仪分析可见亚二倍体(Sub-G1)凋亡峰;电镜观察到凋亡小体。结论2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖有诱导人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用。
- 周芸吴静路红王玉玲王爱勤薛群基
- 关键词：SGC-7901诱导凋亡细胞DNA含量剂量效应关系凋亡小体
- 白血病分化相关基因dif14的原核表达
- 2003年
- 目的 :构建 pGEX dif14原核表达载体 ,在大肠杆菌中表达dif14蛋白片段以获得其抗原 .方法 :采用N末端融合谷胱甘肽巯基转移酶 (GST)的 pGEX 4T 1载体 ,根据dif14基因开放读框N端 5 2氨基酸序列设计引物PCR扩增并购建原核表达载体 ,测序证实 .在大肠杆菌DH5α中进行表达 .结果 :测序证实dif14原核表达载体构建正确 ,含 pGEX dif14表达质粒的大肠杆菌经异丙基硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导后能够表达约Mr35× 10 3 的融合蛋白 .结论 :成功地构建了原核表达质粒 pGEX dif14 ,并在大肠杆菌得到表达 。
- 王哲黄高升叶菁陈广生张永清冯骥良
- 关键词：原核表达白血病大肠杆菌细胞分化
- 氨基葡萄糖硫酸盐抑制白血病细胞HL60增殖并诱导其分化被引量：11
- 2004年
- 目的 :研究氨基葡萄糖硫酸盐 (GS)对白血病细胞HL6 0的增殖和分化的影响 .方法 :采用台盼蓝活细胞计数法检测不同浓度的GS对HL6 0细胞增殖的影响 ;细胞化学染色法观察药物作用后细胞形态的变化 ;流式细胞仪检测药物对HL6 0细胞周期的影响及细胞表面分化抗原CD1 1b ,CD1 4 ,CD1 3和CD33表达的影响 .结果 :GS能明显抑制HL6 0的增殖 ;经 5mmol/LGS处理 5d后 ,HL6 0细胞体积缩小 ,核浆比例降低 ,核仁减少甚至消失 ,核染色质趋向致密 ,核形态扭曲折叠或分叶 ;5mmol/LGS处理 4 8h后 ,G1期细胞由 37.8%增加至 4 7.9% ,S期由 4 6 .8%减低至 4 0 .6 % ,G2期峰轻度减低 ,未发现亚二倍体峰 .经 1mmol/L ,5mmol/LGS分别处理 1 2 0h后 ,CD1 1b和CD1 4的表达分别由 2 .3% ,0 .5 %升高至 2 3.0 % ,1 1 .9%和 1 5 .8% ,4 .3% ,CD33及CD1 3的表达未见明显变化 .结论 :GS能抑制白血病细胞HL6 0的增殖 ,并诱导其向成熟单核。
- 董宝侠王哲梁蓉陈协群黄高升乔岩王爱勤
- 关键词：HL60细胞增殖分化
- 2-(3羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖对人胃癌细胞系(SGC-7901)的诱导凋亡作用
- 2005年
- 目的观察2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(COADG)体外诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的作用,探讨其可能的作用机理。方法采用MTT法,筛选药物作用最佳浓度。用流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳分析诱导凋亡前后的细胞DNA含量,用透射电镜观察凋亡细胞的超微结构。结果2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖能明显抑制胃癌细胞的增长,MTT法显示抑制程度具有时间和剂量效应关系,组间比较表达差异有显著性;流式细胞仪分析可见亚二倍体(Sub-G1)凋亡峰;电镜观察到凋亡小体。结论2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖有诱导人胃癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用。
- 周芸吴静路红王玉玲王爱勤薛群基
- 关键词：人胃癌细胞SGC-7901凋亡作用
- K562细胞向不同细胞系分化时bcl-6表达变化及其机制
- 2006年
- 目的研究诱导K562细胞向不同髓系细胞系定向分化过程中bcl-6表达变化及其机制,以探讨bcl-6与K562细胞定向分化的关系。方法以Western blot方法检测TPA(tetradecanoylphorbol 13-acetate)、羟基脲(Hu)及HMBA(hexameth- ylene bisacetamide)为诱导剂分别诱导K562细胞向巨核细胞系、红细胞系及巨噬细胞系分化时bcl-6表达变化,PCR、克隆、直接DNA测序方法分析bcl-6基因5’调控区序列变异情况。结果bcl-6仅在TPA诱导K562细胞向巨核细胞分化时表达上调,bcl -6基因5’调控区序列未发现有突变发生。结论bcl-6可能是调控K562细胞向不同细胞系定向分化的关键基因,在TPA诱导的K562细胞向巨核细胞分化过程中发挥重要作用,TPA诱导的K562细胞bcl-6表达上调与其调控区基因变异可能无关。
- 张永清黄高升陈协群王哲李健健
- 关键词：K562细胞分化BCL-6基因基因变异
- BCL-6表达对生发中心形成及淋巴瘤发生的作用被引量：6
- 2002年
- 目的 探讨 BCL - 6在正常淋巴组织和一组淋巴瘤中的表达与生发中心形成及不同类型淋巴瘤发生的关系 .方法 形态学及免疫组织化学方法对 17例反应性增生淋巴组织(RL H)及 74例不同类型淋巴瘤进行检测并分类 ,免疫组化法检测各组织石蜡标本中 BCL - 6表达情况 .结果 17例 RL H生发中心细胞、10例滤泡性淋巴瘤 (FL)及 4例弥漫性大 B细胞淋巴瘤 (DL BCL )中等强度表达 BCL - 6 ;3例 FL及 2 1例 DL -BCL BCL- 6表达为强阳性 (72 % ) ,高于其他各组 (P<0 .0 1) .17例 RL H生发中心外细胞 ,4例 DL BCL ,14例小淋巴细胞淋巴瘤 (SL L)、4例套细胞淋巴瘤 (MCL)及 14例经典型霍奇金淋巴瘤 (HD) BCL- 6阴性 .结论 BCL- 6表达与生发中心形成密切相关 .少数 FL和大部分 DL BCL 中 BCL- 6过表达 ,可能与这些淋巴瘤发病机制有关 .检测 BCL- 6有助于 FL 与 SL L,MCL间及 RL H与
- 张永清黄高升王哲闫庆国郭英
- 关键词：BCL-6原癌基因淋巴瘤免疫组织化学基因表达
- Bcl-xL可能介导组织蛋白酶D相关的K562细胞凋亡被引量：6
- 2005年
- 组织蛋白酶(cathepsin)D在氨基葡萄糖硫酸盐(glucosaminesulfate,GS)诱导的慢性髓系白血病K562细胞凋亡过程中为激活线粒体途径的可能的中介分子。为了探讨BclxL在氨基葡萄糖硫酸盐诱导慢性髓系白血病K562细胞凋亡中的可能作用,在倒置显微镜下动态观察细胞生长变化,采用瑞氏-姬姆萨染色观察细胞加药前后的形态学改变,间接免疫荧光法观察GS诱导K562细胞凋亡过程中cathepsinD和细胞色素(cytochrome)C的转位情况,Westernblot检测K562细胞凋亡过程中BclxL、Bax、Bid蛋白的表达变化。结果表明:5mmol/L氨基葡萄糖硫酸盐作用于K562细胞72小时后,细胞增殖受到明显抑制,胞浆出现空泡化;荧光显微镜显示cathepsinD和cytochromeC的荧光信号由颗粒状趋向弥散;BclxL蛋白在GS加药组中表达减低,甚至消失,但在抑胃酶肽(pepstatin)A预处理后的加药组中表达没有明显改变,Bax和Bid蛋白表达在凋亡前后没有明显变化。结论:BclxL蛋白在GS诱导白血病K562细胞凋亡过程中可能介导cathepsinD与线粒体途径之间的联系。
- 朴瑛刘丽梅陈协群梁蓉黄高昇乔岩王爱勤王哲
- 关键词：K562细胞细胞凋亡CATHEPSINDBCL-2家族BCL-XL
- N-乙酰氨基葡萄糖诱导白血病细胞K562向巨噬细胞分化被引量：25
- 2003年
- 目的 :研究N 乙酰氨基葡萄糖对白血病细胞K5 6 2的诱导分化效果 .方法 :利用hexamethylenebisacetamide(HMBA)和N 乙酰氨基葡萄糖 ,分别用不同浓度对白血病K5 6 2细胞进行诱导分化实验 ,通过联苯胺、萘酚AS D氯醋酸酯酶及吉姆萨 瑞氏染色、电镜观察、流式细胞仪证实其分化方向 .结果 :化学诱导剂N 乙酰氨基葡萄糖对K5 6 2细胞在0 .5mmol·L-1浓度作用 2d后有良好的诱导分化效果 ,诱导K5 6 2向巨噬细胞分化 .与HMBA相比 ,N 乙酰氨基葡萄糖在作用浓度和作用时间上都有明显优势 .结论 :N 乙酰氨基葡萄糖可能诱导K5 6
- 王哲乔岩黄高昇王爱勤张永清冯骥良杨国嵘郭英梁蓉
- 关键词：N-乙酰氨基葡萄糖白血病巨噬细胞K562细胞细胞分化
- DIF14/LMBR1蛋白的分子进化分析
- 2004年
- 目的 利用生物信息学方法分析 DIF14 / L MBR1蛋白的分子进化情况并分析其同源蛋白的保守区。方法 利用BL AST同源比较分析寻找 Gen Bank中与 DIF14 / L MBR1高度同源的蛋白序列并下载 ,应用 Clustal X软件对蛋白序列进行多序列对齐 ,绘制进化树 ,利用 SAM- T99软件分析多个序列之间的保守区。 TMpred软件对下载的各种同源的蛋白序列进行跨膜区预测。结果 DIF14 / L MBR1蛋白在各种真核生物中存在高度保守的同源蛋白 ,大部分蛋白属于九次跨膜蛋白 ,各蛋白之间的氨基酸一致性与生物亲缘关系的远近有密切关系 ,人 DIF14 / L MBR1与lipocalin- interacting membrane receptor基因可能有相同的祖先基因 ,但两者功能有所不同。结论 DIF14 / L MBR1蛋白是真核生物中高度保守的基因 ,属于九次跨膜蛋白 ,但在细胞内具体执行的生物学功能有待进一步研究。
- 王哲郭华章黄高升
- 关键词：分子进化氨基酸序列基因序列
