中国科学院知识创新工程重要方向项目(KSCX2-SW-303)
- 作品数：8 被引量：138H指数：4
- 相关作者：桂建芳刘军林坚士邹记兴向文洲更多>>
- 相关机构：中国科学院上海水产大学更多>>
- 发文基金：中国科学院知识创新工程重要方向项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 泛素-蛋白水解酶复合体通路在卵母细胞减数分裂和受精中的作用被引量：4
- 2003年
- 泛素-蛋白水解酶复合体通路(Ubiquitin-proteasome pathway,UPP)高效快速并高度选择性地降解特定的蛋白质,从而参与控制多种重要的细胞生物学过程。在卵母细胞减数分裂和受精过程中,该通路通过降解细胞周期中的关键因子,如细胞周期蛋白、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子等细胞周期调控因子,从而参与卵母细胞生发泡破裂、第一极体排放、MⅡ阻滞的维持和克服等过程,使细胞通过特定的检验点。此外,UPP也与丝裂原活化蛋白激酶通路、Polo样激酶、成熟促进因子、蛋白激酶C、钙调蛋白依赖激酶Ⅱ等减数分裂关键调节因子相互作用来参与卵母细胞减数分裂成熟和受精。一些周期蛋白(如 后期促进复合体的某些亚单位等)还充当泛素连接酶成分,直接参与泛素化过程。
- 霍立军范衡宇陈大元孙青原
- 关键词：泛素-蛋白水解酶复合体通路卵母细胞减数分裂受精细胞周期
- 点带石斑鱼的亲鱼培育、产卵受精和胚胎发育被引量：63
- 2003年
- 在水泥池人工养殖条件下 ,对人工诱导性逆转的“功能性雄性”、天然雄性及天然雌性点带石斑鱼 (Epinephelusmalabaricus)亲鱼进行强化培育 ,自然产卵受精。 2 0 0 2年繁殖季节 ,共获 3cm以上的点带石斑鱼苗 14 5万尾。亲鱼培育、产卵受精和胚胎发育的程序 :(1)经过强化培育的亲鱼 ,自然产卵受精 ,受精率平均 81% ,最高 97% ;(2 )成熟的“人工变性雄鱼”的精子头部呈球型 ,精子头径约 3 7— 6 1μm ,尾长 12 4— 4 4 5 μm ;在水温 2 6℃、盐度 3%、pH7 9条件下 ,精子游动时间最长超过 5 8min ,精液中 90 %精子在 31min停止游动 ,与天然雄亲鱼的精子无异 ,可作为生产雄亲鱼的来源 ;(3)在东山岛 ,产卵期由 4月初持续到 11月中旬 ,产卵高潮集中在 4月底至 5月底、9月底至 10月初。在 2 4h内 ,自然产卵通常从 16 :30持续到次日 1:30 ;(4 )产卵适宜水温为 2 3 5— 2 8 6℃ ,最适产卵水温为 2 5 5—2 6 5℃ ;(5 )水温 2 6℃时 ,受精卵在盐度 2 82 %— 2 96 %的海水中呈悬浮状态 ,盐度 2 82 %以下时下沉 ,盐度 2 96 %以上时上浮 ;(6 )在水温 2 4 9— 2 7 6℃、盐度 3%— 3 3%、pH7 6— 8 2的情况下 ,胚胎发育时间为 2 1h。
- 邹记兴常林向文洲胡超群林坚士
- 关键词：点带石斑鱼亲鱼培育产卵受精胚胎发育
- 银鲫Ran基因的cDNA克隆、表达特征及其在精核解凝中的作用被引量：3
- 2006年
- 采用RACE-PCR技术结合SMART cDNA合成技术,从银鲫中克隆到Ran的全长cDNA并对其编码区全长进行了原核表达、相应抗体制备及其时空表达特征分析。RT-PCR结果表明,Ran基因除在脑组织的转录水平较低外,其它组织中的转录水平几乎相同;Ran基因在不同发育阶段的胚胎中都有mRNA转录,但其mRNA的量在原肠期以后呈下降趋势。Western blot结果表明,Ran在卵巢和精巢中均高水平表达,在心、脑、肝、脾、肾中有较低水平表达,在肌肉中则不表达。同时检测到Ran在不同胚胎发育阶段均有较强表达。这表明,Ran基因在银鲫中可能起着多种作用,尤其在生殖细胞的发生中具有重要作用。最后,采用免疫耗竭对该基因编码的蛋白在精核解凝中的作用进行了初步研究,结果表明,Ran蛋白可能与精核解凝相关。
- 李常健刘军桂建芳
- 关键词：银鲫RAN
- 蛋白激酶C在卵母细胞减数分裂成熟和受精中的作用被引量：2
- 2003年
- 蛋白激酶C(PKC)是一类广泛分布在真核细胞中的单链丝/苏氨酸蛋白激酶超家族,在卵母细胞成熟和受精的多个环节发挥着重要调节作用。在卵母细胞成熟过程中,PKC的作用决定于它存在的位置:卵丘细胞中PKC的激活能够促进卵母细胞恢复减数分裂,而卵母细胞中PKC的激活却抑制自身的生发泡破裂,PKC活性在卵母细胞成熟过程中逐渐升高,在第一次减数分裂中/后期转换时活性下降,使卵母细胞得以排出第一极体,进入第二次减数分裂,在哺乳动物卵子的受精过程中,PKC可能作为钙离子的下游靶分子,引发皮质颗粒的排放,并使卵子突破MⅡ期阻滞,形成原核。PKC还参与调节其他重要蛋白激酶,如成熟促进因子(MPF)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活性。目前已经在哺乳动物卵子中发现多种PKC亚型,其中经典型PKC可能在卵皮质反应中发挥最主要的作用。结合作者的工作,对目前已知的PKC在减数分裂与受精中的作用进行了评价和展望。
- 范衡宇佟超陈大元孙青原
- 关键词：蛋白激酶C卵母细胞减数分裂受精卵巢
- 彩鲫Ran基因全长cDNA的克隆及其组织表达特异性分析被引量：3
- 2003年
- 根据Ran的保守区序列设计简并引物 ,结合SMARTcDNA合成及RACE PCR技术 ,克隆到彩鲫(Carassiusauratuscolorvariety)的Ran基因的cDNA全长 ,其编码区全长为 6 4 8bp ,编码 2 15个氨基酸。采用BLAST程序在NCBI数据库中对其进行同源基因搜索 ,结果表明 ,其推测的编码氨基酸序列与斑马鱼和鲑鱼的Ran基因编码的氨基酸序列的同源性分别高达 98%和 97%。还对其编码区全长序列进行了原核表达 ,以经纯化的表达蛋白免疫家兔 ,制备出了具有较高特异性的多克隆抗体。采用Westernblotting进行的组织特异性分析表明 ,Ran蛋白在卵巢、精巢和肾中表达 ,在心、脑、肝、脾和肌肉中不表达。本工作为采用免疫耗竭法、免疫共沉淀、体外系统模拟等方法进一步研究鱼类Ran基因的生理功能及分离鉴定其结合蛋白提供了良好基础。
- 李常健刘军石耀华杨书婷桂建芳
- 关键词：彩鲫克隆抗体特异性
- 点带石斑鱼仔、稚、幼鱼的生长与发育被引量：47
- 2003年
- 报道了点带石斑鱼(Epinephelus malabaricus Bloch & Schneider)仔、稚、幼鱼生长与发育的研究结果:(1)根据卵黄囊、鳍棘、鳞片的变化,点带石斑鱼的胚后发育可分为仔鱼期、稚鱼期和幼鱼期,仔鱼期根据卵黄囊的有无,可分为卵黄囊仔鱼和后期仔鱼。(2)点带石斑鱼胚后发育经历了4次重要的生长变化,分别是:8d前全长缓慢增加,体重负增长;仔鱼期第15～18d快速生长;仔鱼后期至稚鱼前期的第25～34d高速生长;幼鱼期平稳生长。(3)点带石斑鱼生长发育过程最明显的变化是腹鳍第一鳍棘与背鳍第二鳍棘的长出与收回。(4)点带石斑鱼仔、稚、幼鱼生长发育与食性转换过程要经历4个危险期。提出了采取相应预防措施降低死亡率的方法。
- 邹记兴向文洲胡超群林坚士章之蓉
- 关键词：点带石斑鱼仔鱼稚鱼幼鱼发育
- 银鲫两个蛋白合成相关基因全长cDNA的克隆及其特征分析被引量：6
- 2003年
- 通过构建雌核发育银鲫心跳期SMARTcDNA质粒文库并从文库中随机挑选克隆测序 ,克隆得到银鲫翻译起始因子 3亚单位 2 (GTIF3 S2 )和翻译延伸因子 1亚单位α(GEF 1α)基因全长cDNA。银鲫翻译起始因子 3亚单位 2基因cDNA全长 12 80bp ,开放阅读框位于 117— 10 91bp之间 ,编码 32 5个氨基酸。其推断的氨基酸序列存在三个WD结构域。该基因在鱼类中为首次报道。银鲫翻译延伸因子 1亚单位alpha基因cDNA全长 1784bp ,开放阅读框位于82— 14 6 7bp之间 ,编码 4 6 2个氨基酸。RT PCR表明 ,这两个基因在成熟卵母细胞和胚胎发育早期可以检测到少量的转录产物 ,在胚胎发育期间从原肠期开始转录 ,并随着发育进程逐渐增强。成鱼组织中除精巢表达较弱外 ,其他组织都表达较强。同源分析比较表明 ,TIF3 S2和EF 1α在物种进化过程中具有高度的进化保守性 ,在物种间的同源性很高。因此 ,作者认为 ,这两个基因是研究物种间系统发育的优良对象。
- 刘军石耀华尹隽桂建芳
- 关键词：银鲫基因克隆CDNA
- 从灭活病毒诱导的培养细胞中鉴定鱼类抗病毒相关基因被引量：30
- 2003年
- 紫外线灭活的草鱼出血病病毒(GCHV)能诱导鲫鱼囊胚培养细胞(CAB)产生高滴度的干扰素并抵抗病毒入侵,其机制可能是通过诱导一组抗病毒相关基因的表达,而使寄主细胞建立起抗病毒状态.利用抑制性差减杂交技术,构建了灭活病毒诱导鱼类培养细胞基因差异表达的差减cDNA文库.从差减文库中筛选鉴定出272个差异cDNA片段,测序分析发现它们为69个基因,其中46个为已知基因的同源物,23个为未知的假定基因.已知基因包括I型干扰素信号通路的基因Statl和JakI,抗病毒基因Mx和Viperin,以及一系列干扰素激活基因或免疫相关基因.23个未知的假定基因多数具有富含Au成分的序列.虚拟Northern杂交和RT-PCR进一步证实这些基因在灭活病毒诱导的细胞中差异表达.意味着灭活GCHV不仅能诱导CAB细胞分泌干扰素,而且还导致一系列重要抗病毒相关基因或免疫相关基因的表达,揭示鱼类干扰素系统的信号转导途径和抗病毒机制与哺乳类基本相似.
- 张义兵张奇亚徐德全胡成钰桂建芳
- 关键词：灭活病毒鱼类免疫相关基因草鱼出血病病毒抑制性差减杂交
