国家自然科学基金(81030010) 作品数:13 被引量:57 H指数:4 相关作者: 窦科峰 阮柏 刘卫辉 金超 郭丰成 更多>> 相关机构: 第四军医大学西京医院 成都军区总医院 第四军医大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
肝癌肝移植的适应证及疗效评价 被引量:5 2014年 肝切除是肝癌最常用的治疗手段。但是由于肝功能不全等因素,很多患者在诊断肝癌时已丧失了手术机会。肝移植不仅清除了肿瘤而且去除了硬化的肝脏,因此对早期肝癌伴有肝功能不全的患者,是理想的治疗方式。对肝癌肝移植来说,适应证的选择是影响术后肝癌复发及远期疗效的最关键因素。米兰标准则是最常用的纳入标准,按此标准进行肝癌肝移植5年生存率大于60.0%,效果良好。但米兰标准也存在局限性,更多的研究主张扩大米兰标准,建立新的标准。在我国,一些学者结合国人肝癌的特点提出了自己的标准,这些标准扩大了肝癌肝移植的适应证,且并未降低术后生存率,但有待进一步验证并形成相对统一的中国标准。另外,采用合理的综合治疗手段,预防肝癌的复发亦有待进一步的研究和探讨。 窦科峰 杨诏旭关键词:肝肿瘤 肝移植 预后 适应证 Notch信号通路与肝脏发育及肝脏疾病关系的研究进展 被引量:2 2013年 Notch基因最早于果蝇体内发现,因其部分功能缺失会导致果蝇翅缘缺刻(Notch)而得名。20世纪80年代中期,Artavanis Tsakonas首次克隆了该基因,发现其编码一类单次跨膜蛋白,即Notch受体。随后发现,从无脊椎动物到脊椎动物多个物种中Notch基因均有表达,其家族成员的结构高度保守。Notch信号通路几乎涉及所有细胞的增殖和分化活动,在调节细胞分化、增殖、凋亡等一系列生理、病理过程中都起重要作用。Notch信号通路在肝脏发育和肝脏疾病的发生、发展中有重要的调控作用,本文就近年来的研究进展做一综述。 马鹏飞 于恒超 王德盛 窦科峰关键词:肝疾病 NOTCH信号通路 红景天苷干预小鼠肝纤维化的研究 被引量:12 2013年 目的:以药物诱导的小鼠肝纤维化为实验模型,研究中药红景天苷对该模型是否有治疗作用,及可能的作用方式,结合该药对大鼠肝纤维化的治疗作用,为临床应用该药提供指导。方法:选取10对同窝同性别8周龄小鼠,每对内两只小鼠随机分进实验组(experimental group,EG)与对照组(control group,CG)。进行CCl4腹腔注射诱导小鼠肝纤维化,并在诱导中期实验组加入红景天苷,对照组继续原诱导方案。诱导12周结束后取小鼠肝组织进行H&E染色、MASSON染色、巨噬细胞的免疫荧光染色及血清Hyp含量表达测定。结果:实验组小鼠肝组织形态较好,假小叶形成较少,胶原沉积也相对较少(P<0.001),其血清中的Hyp含量低于对照组(P<0.01),以上差异有统计学意义。在实验组小鼠肝脏中,F4-80标记的巨噬细胞百分比明显低于对照组(P<0.001),该差异有统计学意义。结论:红景天苷能够影响小鼠的正常肝纤维化进程,该药减轻了小鼠的肝纤维化程度,对小鼠肝纤维化进程有一定的保护作用。此作用的发挥可能是该药物影响了肝脏中的Kupffer细胞的增殖或者凋亡,从而使得该细胞对炎性信号调控发生变化,使得肝星形细胞分泌胶原减少得以实现。该药在大鼠及小鼠肝纤维化模型上的治疗作用提示其临床应用前景较好。 郭丰成 历志 金超 窦科峰关键词:小鼠 肝纤维化 红景天苷 巨噬细胞 一种大鼠肝癌干细胞的离心富集方法 被引量:2 2012年 目的建立一种富集大鼠肝癌干细胞的方法,并检测此种方法分离得到的细胞是否具有肿瘤干细胞的生物学特征。方法二乙基亚硝胺(DENA)腹腔注射构建大鼠肝癌模型,两步胶原酶灌注法分离肝癌细胞并体外培养,Percoll连续梯度密度离心法将细胞分成4层,采用流式细胞仪检测各层细胞的肝癌干细胞表面标志上皮细胞黏附因子(EpCAM)、甲胎蛋白(AFP)的表达,并用实时一聚合酶链反应(ReM—timePCR)验证EpCAM、CDl33、AFP的mRNA表达。绘制生长曲线检测各层细胞增殖能力,Transwell小室检测各层细胞的侵袭能力。结果Percoll离心所得4层细胞中,第3层细胞是富集肝癌干细胞最多的一层,具有最强的增殖能力。第3层细胞EpCAM与AFP阳性表达最高,分别为(84.50±8.31)%和(85.20±8.31)%,与其他各层比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。经ReM—timePCR验证,第3层细胞的EpCAM和AFPmRNA表达最高,分别为(111.34±5.59)和(13.76±0.95),与其他各层比较,差异有统计学意义(P〈0.05),第3层的CD133表达为(17.16±0.42),与第2层、4层比较,差异有统计学意义(P〈0.05),但与第1层比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。侵袭实验可见第3层细胞穿透的数量最多(92.750±4.432),与其他各层比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论利用Percoll连续梯度密度离心法成功地富集了肝癌干细胞,经验证符合肿瘤干细胞生物学特性,为肝癌的靶向治疗、多重耐药等基础研究提供了确切的研究对象。 王兴 刘卫辉 夏宁 张娟 杨建栋 王涛 尤楠 龚振斌 季茹 赵戈 窦科峰关键词:肝细胞 干细胞 细胞分离 肝细胞特异性杀伤载体的构建和应用 2015年 目的间充质干细胞(MSC)有重要的免疫调节和组织再生作用,但其治疗肝损伤的机制尚不完全清楚,既可能通过旁分泌因子调节炎症,也可直接转分化为肝细胞。为明确这两种机制,拟构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的膜定位绿色荧光蛋白(GFP)与白蛋白启动子调控的PE40毒素的共表达质粒,以期杀伤转染MSC中向肝细胞转分化的细胞。方法用PCR获得GFP以及DLL1(Delta-like 1)跨膜区基因片段,融合成膜定位GFP基因并插入pFlag-CMV-1载体。将白蛋白基因启动子和PE40基因片段插入已构建好的膜定位GFP序列下游,构建真核表达载体,荧光显微镜检测GFP的表达。应用可表达白蛋白的人正常肝脏细胞检测该载体对肝细胞的杀伤。结果成功构建肝细胞特异性杀伤载体,该载体转染后对正常肝脏细胞具有杀伤作用,提示该载体可用于探索MSC治疗肝损伤的机制。结论成功构建能特异性杀伤肝细胞的载体。 高春辰 赵俊龙 韩俊 李东东 赵高炀 韩骅 秦鸿雁关键词:肝细胞 绿色荧光蛋白 肝血管瘤外科治疗进展 被引量:20 2013年 肝血管瘤临床表现缺乏特异性,诊断主要依靠影像学检查,治疗上以手术为主的多种方法并存。由于相关的基础和临床研究较少,目前肝血管瘤手术指征、时机和术式的选择存在较多争论。本文结合我们的临床经验,主要介绍肝血管瘤的诊断、治疗现状和进展,旨在为肝血管瘤的诊断和治疗的规范化提供依据。 窦科峰 金成关键词:肝肿瘤 肝血管瘤 肝脏切除术中的微创策略及技术 被引量:2 2012年 手术本身所附带的创伤与外科手术相伴而生、形影不离,理想的外科手术应该是在达到有效治疗病变损伤这一目的的同时尽量减少手术本身造成的损伤所带来的危害,因而手术微创化一直是外科医生的不懈追求和永久的目标。 窦科峰 龚振斌关键词:微创 肝切除术 微创技术 抑癌基因Tg737下调对肝癌细胞增殖的影响及其机制 被引量:5 2014年 目的 探讨下调Tg737表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其下游机制.方法 SMMC7721和MHCC97-H细胞分别转染空白对照病毒和干扰Tg737表达的慢病毒后,用CCK-8法绘制肝癌细胞生长曲线检测其增殖能力变化.通过流式细胞仪检测肝癌细胞周期变化,并进一步检测细胞周期调控蛋白的表达变化,推断可能的分子机制.结果 与转染空白对照病毒的细胞相比,稳定下调Tg737的SMMC7721和MHCC97-H细胞增殖能力增强,G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,调控细胞周期完成G1/S转化的cyclinD1的表达水平增高.结论 在肝癌细胞SMMC7721和MHCC97-H下调Tg737表达可能通过上调cylinD1的表达促进肝癌细胞周期由G1期向S期转化,进而促进肝癌细胞的增殖. 高远 阮柏 张卓超 汪建林 杨西胜 戴斌 周倜 王兴 马奔 刘卫辉 张福琴 窦科峰关键词:肝癌 细胞周期 细胞周期蛋白 γ分泌酶抑制剂对肝血窦内皮细胞的影响 被引量:1 2013年 目的:在建立高纯度小鼠肝血窦内皮细胞的体外培养的基础上研究γ分泌酶抑制剂(DAPT)对肝血窦内皮细胞活性的影响。方法:首先通过胶原酶灌注消化、percoll梯度离心和选择性贴壁分离得到高纯度、可在体外条件下培养的肝血窦内皮细胞,其次用不同浓度的DAPT(15μmol/L、45μmol/L、75μmol/L)处理细胞,然后通过MTT检测细胞增殖情况、Real time PCR检测相关分子改变。结果:在体外条件下DAPT对肝血窦内皮细胞的增殖起到促进作用,这种促进作用随着DAPT浓度的增加相应的增加;DAPT能够导致肝血窦内皮细胞Notch信号下游分子Hes1表达下调,VEGF信号中VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调。结论:γ分泌酶抑制剂(DAPT)通过抑制肝血窦内皮细胞Notch信号,引起肝血窦内皮细胞表面VEGFR1表达下调,VEGFR2表达上调显著增加肝血窦内皮细胞的活性。 金超 任凯夕 晏贤春 马鹏飞 郭丰成 窦科峰关键词:DAPT NOTCH信号 肝脏干细胞恶性转化的研究进展 被引量:4 2013年 越来越多的研究认为,包括肝癌在内的许多恶性肿瘤是干细胞来源的疾病,并且肝癌的发生、耐药、转移及复发与肿瘤内被称作肿瘤干细胞的一小群细胞密切相关。虽然对肝癌及肝癌干细胞的来源仍有争议,但通过近十多年的大量研究,很多学者认为肝癌及肝癌干细胞很有可能是由正常肝脏干细胞在各种致癌因素下发生恶性转化而来的。本文就正常肝脏干细胞恶性转化方面的相关研究进展进行综述。 阮柏 刘杰 窦科峰关键词:肝肿瘤 干细胞 细胞转化 肿瘤