转基因生物新品种培育专项(2009ZX08009-089B)
- 作品数：7 被引量：49H指数：4
- 相关作者：李文滨武小霞王志坤李静姜成涛更多>>
- 相关机构：东北农业大学黑龙江省农业科学院教育部更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项博士科研启动基金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 大豆胞囊线虫抗性候选基因Rhg1的克隆及其功能验证被引量：3
- 2012年
- 大豆胞囊线虫(Soybean cyst nematode,SCN)是大豆生产上一种危害严重的世界性害虫,给大豆的产量和品质造成极大的损失。大豆抗性品种选育是其防治措施中最经济、有效的方法。文章拟利用RT-PCR方法克隆得到大豆胞囊线虫抗性候选基因Rhg1,通过构建植物过量表达载体pCAMBIA3301/Rhg1,并采用根癌农杆菌介导的大豆子叶节方法转化大豆东农50。PCR检测草丁膦抗性植株,表明目的基因已经整合到了大豆基因组中;实时荧光定量PCR结果也进一步证实,目的基因在转基因植株中有较高水平的表达丰度。在胞囊线虫的侵蚀下,转基因植株体内的超氧化物歧化酶含量显著高于野生型植株,而丙二醛含量低于野生型植株。研究证实了Rhg1为大豆胞囊线虫的主抗基因,同时为大豆胞囊线虫的分子抗性育种提供理论基础。
- 高慕娟宋雯雯韩雪王继安
- 关键词：大豆胞囊线虫超氧化物歧化酶丙二醛
- 乙酰丁香酮浓度和共培养pH对大豆再生频率的影响被引量：9
- 2010年
- 农杆菌介导方法是较成熟的遗传转化方法,由于大豆的特殊性使其在转化过程中受很多因素的影响,为了提高大豆的转化频率,对影响农杆菌介导方法转化大豆转化率最大的乙酰丁香酮(AS)和pH两个重要因子进行了研究。结果表明,在农杆菌侵染和共培养阶段的乙酰丁香酮浓度和pH均对大豆转化频率有明显影响,pH5.4～5.6为宜;乙酰丁香酮能显著提高大豆的转化频率,但浓度不宜过高,浓度过高反而降低转化效率,最佳浓度为100μmol·L-1。
- 武小霞李静王志坤刘珊珊李海燕马永李文滨
- 关键词：大豆PH
- 农杆菌介导脂滴包被蛋白基因8-3转化烟草的研究
- 2012年
- 为开发新的抗菌核病基因,针对抗病相关的脂滴包被蛋白基因8-3,设计了分别带有酶切位点XbaI和BamHI的1对引物,从克隆载体pMD19-T-8-3中扩增到基因8-3,双酶切8-3并连接到植物表达载体pBI121上;将重组质粒导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404中,通过其介导将8-3基因转化到烟草中;获得了35株抗性转化株,PCR及测序分析鉴定阳性植株为21株,RT-PCR检测到基因8-3在其中能够表达;通过接种核盘菌和草酸处理试验,表明8-3基因可使烟草提高了草酸耐受水平,从而对菌核病具备一定的抗性。本实验研究了潜在功能基因8-3的抗病性,为植物抗菌核病的研究奠定了基础。
- 牛伯庆汪文静宋洪英谢响明
- 关键词：转基因烟草核盘菌抗性
- 利用花粉管通道法将抗虫基因(cryV)转入大豆的研究被引量：12
- 2010年
- 利用花粉管通道法,在大豆的盛花期将外源抗虫基因(cry V)转入到大豆中,转化成活率达43.88%,成荚率达33.6%。将收获的的种子种植在大豆所温室中,通过卡那霉素筛选、PCR鉴定,Southern-blot检测和RT-PCR检测,共检测出5株阳性植株,确定外源抗虫基因(cry V)已转入到大豆中,转化率达1.8‰。
- 武小霞刘伟婷刘琦李静马永李文滨
- 关键词：大豆花粉管通道法
- ipt与PAPⅡ基因在烟草中共表达减轻PAPⅡ细胞毒性的初步研究
- 2011年
- 利用农杆菌介导方法,分别将PAPⅡ单基因、PAPⅡ基因和异戊烯基转移酶基因(ipt)共表达的双基因(PAPⅡ-ipt)导入烟草品种K326叶细胞中,半定量RT-PCR分析了转基因植株中PAPⅡ、ipt和核糖体蛋白大亚基基因(RPL3A)的表达,并进行了TMV攻毒实验。结果表明:双基因PAPⅡ-ipt对烟草的转化频率高达45.55%,为单基因PAPⅡ的转化频率(13.3%)的3.4倍;50%的转基因植株没有检测到转基因的表达,PAPⅡ-ipt表达的转基因植株中RPL3A基因的表达水平为PAPⅡ表达植株中的1.25倍,且生长发育正常,对TMV病毒的抗性有较大程度的提高。因此,ipt与PAPs基因共表达可作为克服PAPs细胞毒性的有效途径。
- 殷娴李朝霞吴国智程伟王晴陈正华张海燕肖尊安
- 关键词：美洲商陆抗病毒蛋白异戊烯基转移酶细胞毒性
- 农杆菌介导的大豆子叶节和下胚轴转化方法的比较及优化被引量：14
- 2010年
- 以东农50、东农42和黑农44的子叶节和下胚轴为外植体,对农杆菌介导的大豆子叶节和下胚轴2种转化方法进行了比较和优化。结果表明:不同转化方法对大豆的品种要求不同,东农50适合子叶节转化法,而黑农44适合下胚轴转化法。在子叶节转化体系中,卡那霉素的筛选浓度是100 mg.L-1,在下胚轴转化体系中,卡那霉素的筛选浓度是75 mg.L-1,可见下胚轴体系比子叶节体系在卡那霉素筛选过程中表现得更为敏感。在子叶节和下胚轴转化体系中,最适乙酰丁香酮浓度均为200 mol.L-1,最适共培养时间均为3 d。在子叶节转化体系中,5 d苗龄时转化率最高,而下胚轴转化体系中,4～6 d苗龄时转化率均较高,以6 d苗龄最高。
- 段莹莹赵琳陈李淼李文滨
- 关键词：大豆
- 转基因作物的生物安全性管理及安全评价被引量：14
- 2010年
- 随着转基因技术的发展,国内外大量的转基因植物及其产品已进入商业化阶段,中国作为农业大国建立了完善的管理条例和法规等管理体系,以保障人类和环境的安全。本文介绍了国内转基因管理的相关法规、转基因农作物安全评价原则、转基因生物安全评价及转基因植物的食品安全性评价的内容。
- 武小霞张彬彬王志坤姜成涛李文滨
- 关键词：转基因作物安全性管理安全评价
