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辽宁省高校科研计划项目(2008S239)
作品数:
2
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相关作者:
吴红联
于洋
王惟
周生来
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张梅英
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5-脂氧化酶转基因小鼠表型初步研究
2015年
目的建立5-脂氧化酶(5-LO)高表达转基因小鼠模型,为动脉粥样硬化(AS)发病分子机制的研究提供有应用价值的动物模型。方法对5-LO转基因及正常对照小鼠分别选用RT—PCR、免疫组织化学、血脂、血压监测等方法进行分析实验。结果5-LO及大鼠5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)免疫组织化学实验结果显示,在肾和肺中5-LO及FLAP的表达,转基因小鼠高于正常对照组小鼠:RT—PCR实验结果显示,转基因小鼠与正常对照小鼠比较在骨髓细胞、腹腔细胞、脾脏、肾脏中白三烯介质及其受体均有不同程度的高表达。其中,两种小鼠的腹腔细胞和骨髓细胞中白三烯A4(LTA4)、白三烯B4(LTB4)和半胱酰胺-白三烯受体2(Cys—LTR2)的表达存在差异(P〈0.05),脾和肾脏中LTB4、白三烯C4(LTC4)及Cys—LTR2的表达存在差异(P〈0.05),肾脏中半胱酰胺-白三烯受体1(Cys-LTR1)的表达存在差异(P〈0.05)。C反应蛋白(CRP)、白介素-1β(IL-1β)、血小板衍生因子(PDGF)、坏死因子-κB(NF-κB)等细胞因子检测结果显示,在肾组织中转基因小鼠的各项指标显著高于正常对照小鼠(P〈0.05);血压测定结果显示,转基因小鼠高于正常对照小鼠(P〈0.05);血脂检测结果显示,两种小鼠未见明显差异(P〉0.05)。结论成功建立5-LO高表达转基因小鼠模型。
张梅英
杨葳
吴红联
董婉维
周生来
于洋
王惟
郭晓冲
郑志红
关键词:
转基因小鼠
5-脂氧化酶转基因小鼠模型的制备
被引量:2
2010年
目的建立5-脂氧化酶(5-LO)转基因小鼠进行动脉粥样硬化的发病分子机制的研究。方法通过显微注射的方法,将5-脂氧化酶基因片段(6.8 kb)导入BDF1受精卵雄原核并移植到同期受孕的假孕母鼠输卵管中,对产出仔鼠的鼠尾组织DNA进行PCR、Southern blot检测,对9、20、24号转基因小鼠分别提取腹腔细胞、骨髓细胞及脾、肾组织总RNA和蛋白,并采用RT-PCR、Western blot方法进行转录水平检测和蛋白表达检测。结果共产生25只子代小鼠,经PCR和Southern检测获得7只阳性小鼠,经RT-PCR和Western blot检测结果表明,9、20、24号转基因小鼠腹腔细胞、骨髓细胞、脾、肾5-LO和5-脂氧化酶激活蛋白(FLAP)在RNA和蛋白水平表达均高于正常BDF1对照小鼠,且统计学分析腹腔细胞、骨髓细胞表达均具有显著差异(P<0.05)。结论成功建立5-LO转基因小鼠模型。
张梅英
吴红联
杨葳
李兆阳
董婉维
周生来
于洋
王惟
吕相川
秦英
郑志红
王禄增
关键词:
5-脂氧化酶
动脉粥样硬化
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