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国家自然科学基金(81060080)
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低氧诱导趋化因子受体表达对视网膜前体细胞迁移能力的影响
2011年
背景体外研究表明,趋化性细胞因子受体4(CXCR4)及其配体基质细胞衍生因子-1(SDF.1)在诱导视网膜前体细胞(RPCs)定向迁移的过程中可能起重要作用。RPCs表达CXCR4升高能增强干细胞的趋化活性,从而提高移植细胞的定向迁移能力。目的探讨RPCs在低氧条件下CXCR4受体的表达。方法分离孕龄17d的NIH小鼠的胚胎视网膜细胞并制备成含5×10^6~10×10^6个/L细胞的悬液,将细胞接种到25cm2培养瓶中,用全神经球贴壁培养法进行培养。RPCs在正常O2(体积分数16%O2)和低O2(体积分数10%O2)环境中培养12h和24h后,用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法检测CXCR4和缺氧诱导因子-1(HIF-1)mRNA的表达;流式细胞仪(FACS)检测RPCs中CXCR4阳性细胞的百分比;Boyden小室实验观察30μg/L的SDF-1对RPCs的趋化效应。结果10%O2培养12h和24h后,RPCs中CXCR4mRNA的表达量(CXCR4mRNA/B—actinmRNA)分别为0.28±0.07和0.48±0.17,比正常氧培养组的0.16±0.02升高了1.75倍和3.00倍,10%O2培养12h和24h后RPCs中HIF-1mRNA表达量(HIF—1mRNA/B—actinmRNA)分别为0.18±0.07和0.38±0.13,比正常氧培养组的0.06±0.01升高了3.00倍和6.30倍,差异有统计学意义(P〈0.01)。Boyden小室实验表明,10%O2培养12h和24h后SDF-1对RPCs的趋化效应由正常氧的13.00%分别上升到36.00%和46.00%。FACS检测表明,10%O2诱导12h和24h后,RPCs中CXCR4阳性细胞率由正常氧浓度的9.01%分别上升到26.90%和46.10%,差异均有统计学意义(P〈0.01)。结论RPCs在低氧条件下CXCR4受体表达增加,同时对SDF-1的趋化能力增强。HIF-1的表达增加是CXCR4表达增高的可能机制。
赖平红
赖铭莹
唐仕波
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低氧
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