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湖北省科技攻关计划(2003AA301C22)

作品数：2 被引量：1H指数：1
相关作者：舒柏华何丽芸王胜利徐顺清更多>>
相关机构：华中科技大学更多>>
发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学

主题

  • 2篇生物发光
  • 2篇逆转
  • 2篇逆转录
  • 2篇逆转录聚合酶...
  • 2篇转录
  • 2篇酶链反应
  • 2篇聚合酶
  • 2篇聚合酶链反应
  • 2篇合酶
  • 1篇PCR产物

机构

  • 2篇华中科技大学

作者

  • 2篇徐顺清
  • 2篇王胜利
  • 2篇何丽芸
  • 2篇舒柏华

传媒

  • 2篇中国公共卫生

年份

  • 1篇2008
  • 1篇2007
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
细胞角蛋白19-mRNA定量检测
2008年
目的基于水母发光蛋白生物发光免疫分析技术，建立一种细胞角蛋白19-mRNA（CK19-mRNA）定量检测技术。方法用生物发光分析技术检测淋巴细胞的CK19-mRNA。利用RT—PCR对CK19-mRNA进行放大,PCR引物的5′端用生物素标记，然后用交联了地高辛寡核苷酸探针与目标生物素化的DNA模板杂交。杂交复合物与包被在微孔板上的链亲合素结合，加入标记了水母发光蛋白的地高辛抗体与地高辛特异结合，再加入钙离子激发水母发光蛋白发光，发光强度正比予CK19-mRNA的量。结果该技术的线性范围可达5个数量级，标准曲线的直线回归系数r=0．98～0．99，探测灵敏度可达22amol／L的CK19-mRNA产物。重复性检测中，批间变异系数〈70％，批内变异系数〈6％。结论生物发光分析技术是一种灵敏可靠、非放射性的微量CK19-mRNA定量方法。
何丽芸王胜利徐顺清朱慧君舒柏华
关键词：逆转录聚合酶链反应生物发光
PCR产物生物发光分析技术研究被引量：1
2007年
目的基于水母发光蛋白生物发光分析技术建立一种PCR产物定量检测技术。方法利用RT-PCR对CK19-mRNA进行放大,PCR引物的5’端用生物素标记,然后用交联了地高辛寡核苷酸探针与目标生物素化的DNA模板杂交。杂交复合物与包被在微孔板上的链亲合素结合,加入标记了水母发光蛋白的地高辛抗体与地高辛特异结合,再加入钙离子激发水母发光蛋白发光,发光强度正比于CK19-mRNA的量。结果探测灵敏度可达22 amol/L的RT-PCR产物。结论该定量检测技术是一种灵敏的、可靠的、非放射性的微量CK19-mRNA定量方法。
舒柏华王胜利何丽芸徐顺清
关键词：生物发光
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