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PCR-ELISA检测大鼠卡氏肺孢子虫DNA的研究被引量：3: 2005年; 目的　建立卡氏肺孢子虫 (P .c )DNA的聚合酶链反应酶联免疫吸附测定 (PCR ELISA)方法 ,并探讨其应用价值。　方法　实验组患卡氏肺孢子虫肺炎的SD大鼠和Wistar大鼠各 2 8只 ,采用PCR法扩增大鼠肺组织DNA和支气管肺泡灌洗液 (BALF)DNA ,用PCR ELISA检测其扩增产物。 2 8只患病大鼠分别制作肺组织印片及BALF涂片 ,姬姆萨 (Giemsa)染色镜检 10 0个视野中有无P .c包囊 (或滋养体 ) ,与PCR ELISA检测扩增产物结果比较。　结果　两种方法检测大鼠肺组织DNA阳性率及BALFDNA阳性率 ,结果相同 ,均分别为 96 4% (2 7/2 8)和10 0 % (2 8/2 8)。Giemsa染色镜检P .c包囊 (或滋养体 ) ,结果为阳性的大鼠 ,PCR ELISA检测扩增产物结果也均为阳性。阴性对照组 ,两种大鼠的肺组织和BALF各 10份标本 ,均有 1只大鼠阳性。　结论　PCR ELISA检测大鼠卡氏肺孢子虫DNA ,敏感性较高 ,特异性较好 ,操作简便 ,具有实用价值。; 陈盛霞姜旭淦仇锦波徐会娟帅连云; 关键词：BALF 卡氏肺孢子虫 PCR-ELISA 染色镜检 DNA

猪软骨Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化与鉴定被引量：17: 2006年; 目的:从猪关节软骨中提取纯化Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行鉴定。方法:选择猪关节软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖、胃蛋白酶消化、氯化钠盐析、DE22纤维树脂处理等步骤,提取纯化Ⅱ型胶原蛋白。采用SDS-PAGE、吸收光谱分析、氨基酸成分分析等方法对Ⅱ型胶原蛋白进行鉴定。结果:4 mol/L盐酸胍能有效去除蛋白多糖;分步加入胃蛋白酶的限制性酶解结果满意;氯化钠盐析浓度为2.4 mol/L时最佳。SDS-PAGE电泳结果显示提取纯化的Ⅱ型胶原蛋白与S igm a公司的产品一致。Ⅱ型胶原最大吸收峰为230 nm,氨基酸成分分析显示甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸含量最高。结论:实验结果提示从猪关节软骨提取的Ⅱ型胶原蛋白纯度高,符合II型胶原的特征。提取材料广泛、实验条件简便,结果可靠。; 姜旭淦陈盛霞丁建霞王卉放马洁吴亮许化溪; 关键词：类风湿性关节炎软骨蛋白多糖

PCR检测大鼠卡氏肺孢子虫的研究被引量：6: 2004年; 目的探讨PCR技术检测大鼠卡氏肺孢子虫的应用价值。方法SD大鼠和Wistar大鼠均随机分成实验组和对照组,实验组每周两次皮下注射醋酸可的松,诱导产生卡氏肺孢子虫;8week后,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),用PCR技术检测卡氏肺孢子虫DNA,并与Giemsa染色法比较。结果实验组两种大鼠肺组织卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为9643%和100%,BALF阳性率亦分别为9643%和100%,它们之间均无显著性差异(P>005);BALF的PCR阳性检出率显著高于Giemsa病原染色法,肺组织的两种方法检出率无显著性差异。结论PCR是一种检出率较高的方法,可作为早期诊断PCP的常规方法,特别适用于BALF检测卡氏肺孢子虫DNA。; 陈盛霞姜旭淦徐会娟帅连云仇锦波唐学恒; 关键词：卡氏肺孢子虫卡氏肺孢子虫肺炎聚合酶链反应 GIEMSA染色

卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型的比较研究被引量：14: 2002年; 目的　比较用SpragueDawley(SD)大鼠和Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)模型的差异。方法　选用SD大鼠和Wistar大鼠 ,随机分为实验组和对照组 ,免疫抑制诱导建立动物模型 ;收集肺组织和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,分别制成肺印片和BALF涂片 ,作Giemsa染色 ,镜检卡氏肺孢子虫滋养体和包囊。结果　共收集实验组SD大鼠和Wistar大鼠的肺组织及BALF标本各 2 8份 ,经Giemsa染色后 ,在肺印片中查见Pneumocystiscarinii(Pc)虫体的阳性率分别为 89.2 9%和10 0 % ,两者之间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;BALF阳性率分别为 6 0 .71%和 78.5 7% ,两者之间亦无显著性差异 (P >0 .0 5 )。而同种大鼠的肺印片与BALF涂片 ,其阳性率之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,且肺印片的检出率均显著高于BALF涂片。同种大鼠不同肺叶的肺印片 ,其阳性率之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。; 陈盛霞陈家旭徐会娟马和祥帅连云仇锦波唐学恒; 关键词：卡氏肺孢子虫卡氏肺孢子虫肺炎 GIEMSA染色

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江苏省教育厅自然科学基金(00KJB310009)